高产纳他霉素基因工程菌株的构建及其发酵条件优化-制药工程专业论文

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1、优秀毕业论文分类号：R9单位代码：10422密级：学号：201214042⑧∥菇办孑SHANDONGUNIVERSITY硕士学位论文ThesisforMasterDegree(专业学位)论文题目：高产纳他霉素基因工程菌株的构建及其发酵条件优化ConstructionandFermentationOptimizationofHigh—YieldNatamycinGeneticEngineeringStrains作者姓名王淼培养单位药学院专业名称制药工程指导教师朱希强研究员合作导师2015年5月13日精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优秀毕业论文原创性声明本人郑重

2、声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名：建日期：望垒：!：当关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。(保密论文在

3、解密后应遵守此规定)论文作者签名：墟导师签精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优秀毕业论文目录摘要．．1ABSTRACT．3主要符号说明5第一章前言61．1纳他霉素简介71．1．1纳他霉素结构与性质71．1．2作为生物防腐剂的优点．．101．2纳他霉素应用及前景．111．2．1在食品中的应用．．111．2．2在医药中的应用．．111．2．3其他方面．．111．2．4应用前景．．121．3纳他霉素的生物合成121．3．1纳他霉素的生产菌株．．121．3．2纳他霉素微生物合成基因一131．3．3纳他霉素生物合成途径．．141．4发酵法制备纳他霉素研究进展171．5胆

4、固醇氧化酶对纳他霉素合成的影响181．5．1胆固醇氧化酶概述．．181．5．2胆固醇氧化酶对纳他霉素合成的影响．．181．6本课题研究的主要内容191．7本课题的研究目的及意义．19第二章高产纳他霉素基因工程菌株的构建202．1材料202．1．1菌种及质粒．．202．1．2主要仪器．．202．1．3主要试剂．．202．1．4培养基及溶液的配制一21精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优秀毕业论文2．2方法．222．2．1ChoD的添加对S,gilvosporeus712产纳他霉素的影响222．2．2接合转移受体菌的筛选222．2．3DNA的操作．222．2．4大

5、肠杆菌．放线菌的接合转移282．2．5工程菌的确证一292．2．6细胞干重测定方法．．292．2．7纳他霉素含量测定方法292．3结果与讨论302．3．1胞外ChoD的添加对S．gilvosporeus712产纳他霉素的影响．．302．3．2接合转移受体菌的筛选．．3l2．3．3重组载体T-pennE*-ponE的构建312．3．4重组载体pSET-仇朋E*-pimE的构建．352．3．5基因工程菌株的构建．．372．4小结．38第三章基因工程菌株摇瓶及发酵罐发酵393．1材料．393．1．1菌种．．393．1．2主要仪器．．393．1．3主要试剂．．393．1．4培养基及溶液

6、的配制．．403．2方法．423．2．1菌种的活化．．423．2．2S．gilvosporeusswjs-801摇瓶发酵产纳他霉素研究423．2．3S．gilvosporeusswjs-801发酵罐发酵产纳他霉素研究423．2．4含His标签的胆固醇氧化酶的表达检测．．423．2．5胆固醇氧化酶活性的测定方法．．443．3结果与讨论453．3．1建立标准曲线．．45精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优秀毕业论文3．3．2PimE．His6的检测463．3．3摇瓶发酵验证PimE过表达对纳他霉素产量的影响463．3．41-L发酵罐发酵验证PimE过表达对纳他霉素

7、产量的影响．473．4小结．49第四章基因工程菌株发酵条件的优化504．1材料一504．1．1菌种．．504．1．2主要仪器．．504．1．3主要试剂．．514．1．4培养基．．514．2方法．524．2．1碳源的筛选．．524．2．2氮源的筛选．．524．2．3摇瓶装液量的筛选．．524．2．4Plackett．Burrmn设计筛选显著性影响因素一524．2．5正交实验设计用于发酵培养基的优化一534．3结果与讨论544．3．1碳源对纳他霉素发酵的影响一544．3．2氮源对纳他霉素发酵的影