资源描述：
《老年冠心病患者mthfr基因多态性探究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、老年冠心病患者MTHFR基因多态性探究【摘要】目的探讨N5,N10亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性与老年冠心病的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测114例冠心病患者及31例对照组MTHFR基因多态性。结果冠心病组与对照组MTHFR基因C677T位点各基因型频率、T等位基因频率、T/T纯合子频率差异无显著性差异。结论MTHFR基因多态性与老年冠心病无显著关系,不能被确定为老年冠心病的独立危险因素。【关键词】MTHFR基因多态性;冠心病Therelationshipbetweencoronaryheartdiseas
2、eandmethylenetetrahydrofolatereductaseinelderlyLIXiao-bo,LIYan,LIYa-ping,etal.DepartmentofSeniorCadres,TheFirstPeople’sHospitalofYunnanProvince,Kunming650032,Chia【Abstract】ObjectiveToobservetherelationshipofpolymorphismsinmethylenetetrahydrofolatereductase(MTHFR)andcoronaryheartdisea
3、se(CHD)intheelderly.MethodsPolymerasechainreaction-restrictionfragmentlength9polymorphism(PCR-RFLP)wasusedtoanalyzetheMTHFRC677Tgenotypesinasampleof114caseswithdocumentedCHDand31controlsamongtheelderlypatients.ResultsTherewerenodifferencesingenotypefrequencyorallelefrequenciesbetween
4、CHDandthecontrol.ConclusionMTHFRgenemutationcannotascertainedtobeindependentriskofcoronaryheartdiseaseintheelderly.【Keywords】Methylenetetrahydrofolatereductase;Polymorphism;Coronaryheartdisease冠状动脉粥样硬化性心脏病简称冠心病(coronaryheartdiseaseCHD),是指由于冠状动脉粥样硬化使管腔狭窄或阻塞导致心肌缺血缺氧而引起的心脏病,是临床上最为常见的心血管
5、疾病,发病率和病死率都较高,严重影响人类生活质量。N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate9reductase,MTHFR)是一种黄素蛋白,催化体内N5,N10-亚甲基四氢叶酸生成N5-亚甲基四氢叶酸的还原反应,其活性降低可引起同型半胱氨酸血症[1]。轻-中度高同型半胱氨酸血症是动脉粥样硬化和脑梗死重要的独立危险因素[2]。1995年Frosst等[3]报告,MTHFR基因C677T突变,致不耐热性增加而活性大大减低,从而抑制蛋氨酸循环中Hcy再甲基化过程,导致Hcy水平升高。MTHFR基因作为冠心病的一个候选基因,
6、成为近年来的研究热点。本研究通过对114例冠心病患者及31例对照组MTHFR基因多态性进行测定,探讨老年冠心病患者与MTHFR基因多态性的关系。1对象和方法1.1研究对象所有研究对象均为2005年7月至2007年2月间收入我科的老年住院患者,分为冠心病组和对照组,均经临床症状、心肌酶学、心电图及冠状动脉造影确诊,两组年龄相当。冠心病组114例,对照组31例。两组均排除肝肾功能不全、恶性肿瘤及周围血管疾病等。1.2方法1.2.1实验方法1.2.1.1模板DNA的制备抗凝血经提纯外周血有核细胞后,用基因组DNA抽提试剂盒(上海生工)提取基因组DNA后,置于4℃保存待
7、用。1.2.1.2引物设计上游引物:5’-CCCCAAAGGCCACCCCGAAGCAG-3’,下游引物:5’-CCGGGGACGATGGGGCAAGTGA-3’。扩增MTHFR基因中含多态性位点的DNA片段,扩增产物长度174bp。1.2.1.3PCR反应条件95℃预变性5min,然后按96℃30s,65℃30s,72℃30s,循环35次,末次循环后72℃延伸59min,产物经含EB的2%的琼脂糖凝胶电泳检测。1.2.1.4MTHFR基因限制性片段长度多态性(restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP)分析取10μl扩
8、增产物,加入8个单位Hi
