抗癌药合用维拉帕米对体外人胃癌细胞的影响论文

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1、抗癌药合用维拉帕米对体外人胃癌细胞的影响论文.freelachneoplasms;verapamil;drugtherapy;chemosensitizers;multidrugresistanceAbstract:AIMTostudytheaffectoncellsfromtheantitu-moreffectsofverapamil（VPM）binedycin（ADM）fluorouracil（5-Fu）andcispatin（CDDP）.METHODSMTTassayangastriccarcinomacelllineinvitroSGC-7901individua

2、llyorinbinations.Lightandelectronmicroscopesployedtoobservethechangesinmorphologyofthecelltreatedetry2.51to6.31（P0.01）.ThegroitosisandtheformationofDNAicrostructureofcellsshoitochondria，dilationofendoplasmicreticulumandsoon.CONCLUSIONVPMcanincreasethesensitivityofcarcinomacellstokindsofan

3、titumordrugs，andsoreducetheirsideeffects.0引言化学治疗在胃癌治疗中占有很重要的地位［1-3］，但存在着药物毒性以及肿瘤细胞对化疗药物缺乏敏感性或产生多药耐药性（multidrugresistance，MDR）［4-7］.使得肿瘤常规化疗面临新的挑战.近年来国外学者做了很多研究工作，其中钙拮抗剂（calci-umantagonist，CA）作为化疗增敏剂引起人们极大兴趣.我们应用MTT法、光镜、电镜、流式细胞仪，观察无毒剂量VPM与小剂量化疗药合并用药前后对人胃癌细胞SGC-7901影响，为胃癌治疗提供新疗法.1材料和方法1.1材料

4、阿霉素，深圳万乐有限公司产品.5-氟尿嘧啶，上海海普制药厂产品.顺铂，济南齐鲁制药厂产品.维拉帕米，德国LudI1640细胞培养液，美国Gibco公司产品.胎牛血清，浙江金华清湖犊牛应用研究站产品.MTT试剂，美国Sigma公司产品.二甲基亚砜（DMSO），北京亚太精细化工公司产品.胰蛋白酶，美国Sigma公司产品.二氧化碳孵箱，美国Forma公司产品.酶联免疫仪，南京华东电子管厂产品.透射电子显微镜，日本JEM-EX产品.流式细胞仪ProfileII型，美国Conlter公司产品.人胃癌细胞株SGC-7901由本校唐都医院消化内科提供.将SGC-7901细胞置于含有10

5、0mLL-1小牛血清的RPMI1640培养液中，加青霉素100×103UL-1、链霉素100×103UL-1，置于37℃，50mLL-1CO2饱和湿度孵箱内培养，贴壁生长的细胞用2.5gL-1胰蛋白酶消化传代.1.2方法1.2.1MTT试验取对数生长期的SGC-7901细胞，以2.5gL-1胰蛋白酶消化，计活细胞数，以1×107L-1浓度细胞悬液接种于96孔培养板上，每孔100μL，培养24h加药.采取不同药物接触方案:①单加不同浓度VPM;②单加不同浓度3种化疗药;③不同浓度VPM分别与不同浓度3种化疗药联合同时加药;④空白对照组加等量培养液，设调零孔.每种药物浓度在0

6、.001～1.0倍血浆最高浓度（PPC）范围之内.继续培养120h，每孔中各加20μLMTT溶液，继续培养4h用快速翻转培养板的方法［8］去除培养液，每孔加DMSO150μL，用微量振荡器振荡10min待形成的甲月替完全溶解后，在酶联免疫测定仪上选择波长490nm测定光吸光度A（OD490），比色时空白孔调零.全部实验重复3次，取平均值，实验结果采取配对t检验分析.1.2.2细胞形态学检查细胞超微结构观察:SGC-7901细胞经VPM分别与ADM，CDDP，5-FU联合用药及单独处理，在培养瓶内培养120h.药物浓度选择均为单独用药时对细胞增殖无抑制的浓度.VMP1000

7、0μgL-1，ADM10μgL-1，CDDP10μgL-1，5-FU10μgL－1.经培养120h2.5gL-1胰蛋白酶消化、计数、离心、PBS洗涤，经20gL-1戊二醛和10gL-1锇酸水溶液先后两次固定，乙醇梯度脱水包埋、超薄切片、经双染色、透射电镜观察并摄片.光学显微镜检查:培养器中放入载玻片进行细胞培养，分组及药物浓度同流式细胞仪检测.载玻片HE染色.1.2.3细胞周期动力学分析分组及实验方法同前，经2.5gL-1胰蛋白酶消化，计数，PBS洗涤，离心，冰乙醇固定，再离心PBS洗涤后，制成1010L-1mL细胞悬液，经碘