石榴皮对红细胞膜脂质过氧化的保护作用论文

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1、石榴皮对红细胞膜脂质过氧化的保护作用论文周本宏，王慧媛，吴玥，冯琪，刘春，张杰【摘要】目的研究石榴(PunicagranatumL.)皮提取物对红细胞膜脂质过氧化损伤的保护作用。方法采用3种活性氧产生体系诱发脂质过氧化为实验模型，设立模型对照组（MC）、正常对照组（NC）以及3个石榴皮提取物给药组，观察比较各组的丙二醛（MDA）含量。结果同MC组相比.freelegranatepericarps(PunicagranatumL.)onlipidperoxidationdamageoferythrocytemembr

2、ane.MethodsModeloflipidperoxidationoferythrocytemembraneadebythreekindsofradicalsgenerationsystems，xanthine（Xan）xanthineoxidase(XO)system,H2O2,andUVlight.Observationadeonthecontentofmalondialdehyde(MDA).ResultsparedembraneinducedbyXanXOsystem,H2O2orUVlightin

3、allofthethreePunicagranatumL.groupL.mayprotecterythrocytemembranefromthelipidperoxidativedamageinducedbyradicals.KeyL;erythrocytemembrane;lipidperoxidation脂质过氧化发生在需氧细胞中，是分子态的氧与不饱和脂肪酸作用的过程；自由基被证明广泛地参与脂质过氧化过程。细胞膜因富含饱和脂肪酸最易受自由基攻击，自由基对细胞膜的损伤主要是产生脂质过氧化反应，引起膜结构和功能的改

4、变，从而影响甚至损伤机体的功能而引起一系列疾病。如有报道指明活性氧自由基与哮喘、发热、关节炎、帕金森综合征、唐氏症、痴呆等疾病的发生有关［1］。自由基清除剂作为抗氧化剂，可以防止脂质过氧化的发生，从而预防机体因自由基产生的病变。许多陆生植物的次级代谢产物都可以作为抗氧化剂，特别是带有酚羟基的物质，如黄酮、鞣质、香豆素等［2,3］。石榴(PunicagranatumL.)是我国已知的最早的可食用的植物之一，在我国被广泛的种植。我国5个最有影响的石榴产区分别是：山西临潼、山东枣庄、安徽怀远、四川会理、云南蒙自。石榴皮是

5、石榴科石榴属落叶灌木或小乔木石榴的干燥果皮，在中药中它被用来治疗痢疾、细菌感染、腹泻、寄生虫病及出血等疾病。近来又有报道指出石榴皮还有杀精子［4］及抗淋球菌的作用［5］。因为石榴皮中主要含有鞣质，占总质量的10.4%～21.3%，多酚类化合物已被证明具有清除自由基的作用，所以石榴皮可能具有清除自由基而抗氧化的作用。本实验用2种方法研究不同鞣质含量的石榴皮提取物对大鼠红细胞膜氧化损伤的保护作用。脂质过氧化物可分解产生丙二醛（MDA），本实验用MDA的量来衡量脂质过氧化的程度。实验采用3个不同浓度的给药组来研究抗氧化性

6、和剂量的效应关系。1材料UV2800紫外分光光度计（Unico上海仪器有限公司）；高速冷冻离心机（3K30Sigma公司）；冷冻干燥机（ChristALPHA14）；大白兔，武汉大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK(鄂)2003-0004；石榴皮（购自武汉市药材公司，经武汉大学药学院张洪教授鉴定为石榴科石榴属石榴的果皮）；黄嘌呤（Xan）和黄嘌呤氧化酶（XO）（Sigma公司）；考马斯亮兰蛋白测定试剂盒和丙二醛（MDA）测定试剂盒（南京建成生物工程研究所）；其他试剂均为国产分析纯。2方法2.1实验药物的制备

7、称取一定量石榴皮，粉碎，用3倍量的70％的丙酮在室温下浸渍约6h，再超声30min，滤取滤液。其残渣再重复以上操作3次，将滤液合并，浓缩，冷冻干燥，制成粉末。2.2红细胞膜的制备兔全血在0～4℃用低渗溶血法制备［6］，膜蛋白含量用考马斯亮兰试剂盒测定，得膜蛋白浓度0.7778g/L。2.3XanXO体系诱导细胞膜脂质过氧化反应终体积为1.0mL。各取制得的红细胞膜0.5mL，分别加待测药物0.1mL（MC和NC组加pH7.4磷酸盐缓冲液），置37℃水浴15min，再加1.0mmoL/L的Xan溶液0.3mL，0.

8、4U/mL的XO0.1mL,立即将反应管置37℃水浴1h待测。对照组、空白组、0.3mg/mL剂量组、0.5mg/mL剂量组、1mg/mL剂量组都分别检测12次。2.4UV照射诱导细胞膜脂质过氧化反应终体积为1mL，内含细胞膜0.5mL及不同浓度的药物0.1mL（MC和NC组用pH7.4磷酸盐缓冲液代替），再加入0.4mLpH7.4的磷酸盐缓冲液，反应管置紫