罗布麻对红细胞膜脂质过氧化损伤的保护作用

《罗布麻对红细胞膜脂质过氧化损伤的保护作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、罗布麻对红细胞膜脂质过氧化损伤的保护作用【关键词】 ,罗布麻　　摘 要 目的研究罗布麻提取物对红细胞膜脂质过氧化损伤的保护作用。方法采用三种活性氧产生体系诱发脂质过氧化为实验模型，设立模型对照组（MC），正常对照组（NC），以及剂量分别为0.1，0.2，0.4，0.8mg/mL的四个罗布麻提取物给药组，观察比较各组的丙二醛（MDA）含量。结果同MC组相比，四组罗布麻提取物对黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶系统，H2O2及UV照射三种方法引起的细胞膜脂质过氧化产物丙二醛（MDA）的生成增加均有抑制作用，且有一定的剂量依赖关系。结论罗布麻醇提物对自由基引起的细胞膜脂

2、质过氧化损伤有保护作用。　　关键词 罗布麻；自由基；红细胞膜；脂质过氧化、　　细胞膜具有维持细胞完整性和功能的作用。因其富含饱和脂肪酸最易受自由基攻击，自由基对细胞膜的损伤主要是产生脂质过氧化反应，从而引起膜结构和功能的改变。因此，抗氧化剂可有效地防止自由基对细胞膜脂质的过氧化损伤。　　罗布麻属于夹竹桃科植物（Apocynumvenetum）,又名红麻，是生长在盐硷沙荒地区的野生植物，我国罗布麻的资源非常丰富，分布范围小，用罗布麻作茶饮及药用有悠久的历史。现代研究认为其可预防和治疗老年高血压、感冒、气管炎，对增强机体抗病能力均有一定的作用。罗布麻提取

3、物的主要成分为黄酮类化合物［1］，而黄酮类化合物由于含有还原性酚羟基，可直接清除氧自由基，抑制脂质过氧化。本文观察了罗布麻提取物对体外黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶、过氧化氢（H2O2）和UV照射等三种自由基产生体系诱导细胞膜脂质过氧化的影响，报道如下。　　1 仪器与材料　　1.1 药物与试剂 　　罗布麻叶购自武汉市药材公司，经鉴定为FoliumapocyniVeneti。黄嘌呤（Xan）和黄嘌呤氧化酶（XO）为Sigma公司产品，考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒和丙二醛（MDA）测定试剂盒购于南京建成生物工程研究所，其他试剂均为国产分析纯。　　1.2 动物 　　大白

4、兔购于华中科技大学同济医学院动物实验室　　1.3 仪器  　　UV-2201紫外分光光度计（日本岛津）、高速冷冻离心机（Sigma公司）　　1.4 实验药物的制备［2］ 　　罗布麻叶100g，用φ=70％乙醇回流提取2次，每次1h，合并提取液，回收溶剂后，得到浸膏20.9g。取该浸膏，用蒸馏水配成浓度分别为0.1、0.2、0.4、0.8mg/mL的溶液，经02μm微孔滤膜过滤，4℃保存备用。　　2 方法与结果　　2.1 方法　　2.1.1 红细胞膜的制备 　　兔全血在0~4℃用低渗溶血法［3］制备，膜蛋白含量用考马斯亮蓝试剂盒测定，得膜蛋白浓度0.0

5、98g/L［4］。　　2.1.2 Xan-XO体系诱导细胞膜脂质过氧化 　　各取细胞膜悬液（0.098g/L）0.5mL，分别加待测药物01mL（对照加pH7.8磷酸盐缓冲液），置37℃水浴15min，再加1.0mmol/LXan溶液0.3mL，0.4U/mLXO0.1mL,立即将反应管置37℃水浴1h待测。　　2.1.3 H2O2诱导细胞膜脂质过氧化 　　以2mol/LH2O2(终浓度为18mmol/L)代替Xan-XO，用pH7.8磷酸盐缓冲液补充反应体系的体积至1.0mL，其余条件同“2.1.2”项。　　2.1.4 UV照射诱导细胞膜脂质过氧化

6、 　　反应终体积为1mL，内含细胞膜0.5mL及不同浓度的药物或等体积的磷酸盐缓冲液，反应管置紫外灯下照射1h后待测。　　2.1.5 脂质过氧化物的检测 　　采用MDA试剂盒测定,测定过氧化脂质降解产物中的丙二醛（MDA）含量以反映脂质过氧化程度。以下式计算罗布麻对反应体系诱导MDA生成的抑制率：抑制率=对照组MDA含量-给药组MDA含量[]对照组MDA含量-正常组MDA含量×100％　　2.1.6 统计学处理 　　MDA数值采用s的形式，多组资料间的两两比较用t检验，P<0.05认为有显著性差异。　　2.2 结果　　2.2.1 罗布麻醇提物对Xan

7、-XO体系诱导细胞膜脂质过氧化生成的影响 　　结果表明，Xan-XO系统可诱导细胞膜发生脂质过氧化反应，使对照组的MDA含量明显升高（P<0.001）；四个罗布麻组的MDA值较对照组均有显著下降，并有一定的剂量依赖关系（P<0.001,P<0.01）。见表1。表1 罗布麻对Xan-XO诱导细胞膜脂质过氧化生成的影响（略）　　2.2.2 罗布麻醇提物对H2O2诱导细胞膜脂质过氧化生成的影响  　　结果表明，H2O2可诱导细胞膜脂质过氧化反应，使对照组的MDA含量明显升高（P<0.001）；四个罗布麻组的MDA值较对照组均有显著下降，并有一定的剂量依赖关

8、系（P<0.001,P<0.01）。见表2。表2 罗布麻对H2O2诱导细胞膜脂质过氧化生成的影响（略）注：与