荆防散干预一氧化氮合酶一氧化氮通路的抗炎机制实验研究论文

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1、荆防散干预一氧化氮合酶一氧化氮通路的抗炎机制实验研究论文刘晓帅曾南梁珂赵璐瞿礼萍宋美芳张崇燕【摘要】目的观察荆防散干预炎症模型动物一氧化氮合酶-一氧化氮（NOS/NO）通路的抗炎机制，为其功效和临床应用提供药理学依据。方法采用角叉菜胶诱导大鼠胸膜炎模型和卵白蛋白致小鼠哮喘模型，测定大鼠胸腔渗出液与小鼠肺组织匀浆中NOS，iNOS活力和NO含量的变化。结果荆防散各剂量组能不同程度地降低小鼠肺组织匀浆与大鼠胸腔渗出液中NOS、iNOS活力，并减少NO含量，其中以5g·kg-1剂量作用显著。结论荆防散能通过抑制NOS活力，

2、尤其是与炎症反应密切相关的iNOS活力，从而减少炎症介质NO的生成来发挥抗炎作用.freelechanismrelatedtoNOS/NOpathmatoryactionofJingFangSan,andtopharmacologicalbasisforitsefficiencyandclinicaluseoftreatingallergicinflammationdisease.MethodsInflammatedanimalmodelin-inducedasthmainmice.Pleurorrheainratsa

3、ndlungtissuehomogenateinmiceodelgroup,JingFangSanatthedosesof5，2.5and1.25g·kg-1coulddecreasetheNOSactivityandtheNOlevelininflammatedareaindifferentdegree,andthesuppressiveeffectostsignificantatthedose5g·kg-1.ConclusionJingFangSanhasanti-inflammatoryactionintalin

4、flammationmodels,echanismmayberelatedtosuppressingNOSactivity,especiallyiNOS,anddecreasetheNOlevel.Keymation；NOS/NOpathg·L-1。醋酸地塞米松片，天津太平洋制药有限公司产品，批号060201。1.2动物昆明种小鼠，体重20～25g；SD大鼠，体重200～260g，由四川省医学科学院实验动物研究所提供，合格证号分别为scxk（川）2004－15、scxk（川）2004-16。1.3试剂角叉菜胶，sigm

5、a,Lot17H1148；一氧化氮测试盒（硝酸还原酶法，批号20070913）、NOS测试盒（测分型，批号20070913），南京建成生物工程研究所产品。1.4仪器MultiskanMK3酶标仪，Thermolabsystems；BS323S电子天平，Sartorious；JY92-Ⅱ超声波细胞粉碎机，宁波新芝生物科技股份有限公司产品；980型超声雾化器，上海医械专机厂产品；SHIMAD20SPD-10高效液相色谱仪。2方法2.1荆防散对卵白蛋白致哮喘模型小鼠的影响健康♂昆明种小鼠，按体重随机分为6组，分别为对照组、模

6、型组及荆防散大、中、小（5，2.5，1.25g·kg-1）剂量组及地塞米松组。除正常对照组腹腔注射生理盐水外，其余各组均于实验第1，7，15和21天分别iP卵白蛋白抗原液0.2ml（含卵白蛋白100μg、氢氧化铝1mg）；实验第28天开始将小鼠置于钟罩内，以50mg/L的卵白蛋白溶液（对照组用蒸馏水）雾化攻击，雾化速度可控且前后一致，1次/d，30min/次，连续7d。每次喷雾前30min，正常对照组、哮喘模型组小鼠灌胃蒸馏水，其余各组分别灌胃给予相应药物。各组小鼠于末次攻击后24h处死，取肺组织用生理盐水制成10%匀

7、浆，-75℃保存备用。按照试剂盒说明测定肺组织中NOS，iNOS活力与NO含量。2.2荆防散对角叉菜胶致胸膜炎模型大鼠的影响健康♂SD大鼠，按体重随机分为6组，分组同实验“2.1”项。各组动物灌胃给药，1次/d，连续7d。各组大鼠末次给药后30min乙醚浅麻醉，于右胸腔注射1%角叉菜胶0.2ml致炎（对照组注射等量生理盐水）。致炎后5h，大鼠股动脉放血处死，打开胸腔，吸取胸腔渗出液，再用2ml生理盐水冲洗胸腔，合并渗出液和冲洗液，3000r·min-1离心10min，上清液-75℃保存备用。按试剂盒说明测定胸腔渗出液N

8、OS，iNOS活力与NO含量。3结果3.1荆防散对卵白蛋白致哮喘模型小鼠的影响见表1。与对照组相比，模型组小鼠肺组织中的NOS，iNOS活力异常升高，同时NO含量显著增加，提示造模成功。与模型组比较，荆防散5，2.5，1.25g·kg-1均能明显降低小鼠肺组织中NO含量（P＜0.05，P＜0.01），5，2.5g·kg-1剂量明显