乙型肝炎病毒宫内感染的机制

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1、乙型肝炎病毒宫内感染的机制　　摘要:目的探索乙型肝炎病毒（HBV）宫内传播的机制和时间.方法孕妇和新生儿血清HBsAg和HBVDNA检测采用ELISA和PCR法.引产胎儿肝组织和胎盘的HBsAg，HBxAg，HBcAg和HBVDNA检测采用ABC免疫组化染色和原位杂交.结果母亲外周血HBV高浓度（≥0.02μg・L-1）、先兆早产和胎盘绒毛毛细血管内皮细胞HBV感染导致宫内感染发生的危险性比值比（OR）分别为7.06，13.08和16.15.胎盘HBV感染从孕早期、孕中期至足月分娩愈来愈严重且广泛.在足月分娩胎盘中，从母面蜕膜细胞至胎儿面绒毛毛细血管内皮细胞HBV感染率呈逐渐下

2、降趋势，但胎儿宫内感染的OR值却越来越大.1例孕19munohistochemistry;insituhybridization　　Abstract:AIMToexplorethemechanismandtimingofhepatitisBvirus（HBV）intrauterineinfection.METHODSSerologicHBVinfectionmarkersofpregnantenand　neinedbyABCimmunohistochemicalstainingandinsituhybridization.RESULTSIntrauterineinfectionORsofhi

3、ghconcentration（≥0.02μg・L-1）ofHBVinmaternalperipheralblood，threatenprematurelabourandplacentalvillouscapillaryendothelialcell（VCEC）infec-tionegraduallyseriousmaternalside，theORofintrauterineinfectionhadanincreasingtrend.Oneinducedabortedfetallivertissue（19aybetissionroutes-hematogenousandcel

4、lu-lartransferroutes.Theintrauterineinfectioncanoccurbe-forethe19thaintimingispos-siblyinthethird-trimesterpregnancy.　　0引言　　乙型病毒性肝炎（乙肝）是世界流行性疾病，严重地危害着人民的生活和健康.乙肝疫苗对乙肝的预防，包括HBsAg阳性母亲所生婴儿分娩时与产后的传播的阻断均有作用.但是，对于胎儿在母亲怀孕期间子宫内HBV的传播，包括乙肝疫苗在内的现有措施却难以发挥作用.我国每年出生婴儿2000多万，按母亲HBsAg携带率为10%，胎儿宫内感染发生率为10%计算，每年约有2

5、0多万名这样的婴儿出生，而这些受染婴儿很可能终身携带，其中约25%最终将死于肝硬化与肝癌.因此弄清胎儿宫内HBV感染的机制，提出针对性的措施是当务之急.目前，国内有关文献仅数篇［1-4］，且是描述性研究，样本量小，结果不一，为此我们从1992年开始，应用现代流行病学、分子生物学和病理学方法，对胎儿宫内HBV感染的危险因素、传播机制和时间进行了深入探讨.　　1材料和方法　　1.1对象与标本在陕西省妇幼保健院连续性选择1995-10～12行人流术的孕早期孕妇，共计287例，其中24例HBsAg阳性;1995-09/1996-12行水囊引产的孕中期HBsAg阳性孕妇及其胎儿，共计11对;1992-

6、03/1997-12HBsAg阳性足月分娩孕妇及其婴儿各350名作为研究对象.分别采集孕妇及其新生儿外周血并进行流行病学调查，收集引产胎儿肝组织，同时还收集了上述研究对象的胎盘组织，40mg・L-1多聚甲醛固定，常规石蜡包埋后，进行5μm连续切片，待检.　　1.2病例对照调查按统一表格，由培训的调查员进行，内容分六大类51项，主要包括孕妇既往肝炎史，孕产史，妊娠期间先兆流产史、先兆早产史、孕周，胎盘外观、大小及质量，新生儿Apgar记分、体质量，羊水污染情况等.凡婴儿出生后24h内血清HBsAg和（或）HBVDNA阳性者为宫内感染，作为病例组，阴性者为对照组.　　1.3实验室检

7、测　　1.3.1外周血HBV感染标志检测HBsAg，抗-HBs，HBeAg，抗-HBe和抗-HBc检测采用ELISA法.HBVDNA检测采用PCR法［5］.HBVDNA定量分析采用斑点杂交法，<0.02μg・L-1为低浓度，≥0.02μg・L-1为高浓度.　　1.3.2胎盘和引产胎儿肝组织的免疫组织化学和原位杂交检测HBsAg，HBcAg和HBxAg检测采用ABC免疫组化染色