高原鼢鼠肉木瓜蛋白酶酶解物对小鼠免疫功能的影响(1)

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1、高原鼢鼠肉木瓜蛋白酶酶解物对小鼠免疫功能的影响(1)潘明，赵弋清，侯若彤，刘素君，杨志荣【摘要】目的研究高原鼢鼠肉蛋白的木瓜蛋白酶酶解物生理活性功能，对酶解物进行了免疫活性实验。方法通过MTT法和中性红比色法测定其对小鼠脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞吞噬功能、网状内皮系统吞噬功能、NK细胞杀伤毒性，鼠抗体生成脾细胞数(IgM?PFC)的影响。结果酶解物高、中剂量与对照相比有显著差异，而其中以高剂量组的活性最明显，能够显著提高小鼠淋巴细胞的增殖能力；激活小鼠网状内皮系统，增强吞噬功能；增强NK细胞活性；增加小鼠脾脏的抗体生成细胞数。结论高原鼢鼠肉蛋白的木瓜蛋白酶酶解

2、物能明显提高正常小鼠细胞免疫、体液免疫及NK细胞杀伤毒性的能力。【关键词】高原鼢鼠肉；木瓜蛋白酶；酶解；免疫功能　　Abstract：ObjectiveInordertoinvestigatethephysiologicalfuntionsofpapaindigestofMyospalaxbaileyifleshprotein,immuneactivityexperimentethodandneutralredcolorimetricmethodeasuretheeffectofthedigestontheproliferationofspleenlymphoc

3、yteofmice,thephagocyticfunctionofceliacmacrophageandreticuloendothelialsystem,thekillingtoxicityofNKcells,andthenumberofsplenocyteinducedbyratantibody(IgM?PFC).ResultsThegroupsiddledosagehavesignificantdifferencefromthecontrolgroup,ostobviousactivity.ConclusionThepapaindigestofMyospa

4、laxbaileyifleshproteinhasasignificantpromotioneffectonthecellandhumoralimmunityofnormalrataseat；Papain；Hydrolysis；Immunefunction高原鼢鼠Myospalaxbaileyi是栖息于青藏高原的一种危害草场和农田的数量巨大的地下啮齿动物。据营养成分的分析结果（《四川动物》待发），高原鼢鼠肌肉除含有亚油酸等对人体有益的不饱和脂肪酸外，还有丰富的蛋白质,钙、镁、铁、锌、磷等无机盐和烟酸、核黄素、视黄醇等维生素，是一种营养价值很高的蛋白质资源。近年的

5、研究表明，蛋白质水解为小肽后就可以被人体吸收［1］，而蛋白质水解产物具有蛋白质无法比拟的生理功能和营养价值。近几年对高原鼢鼠肉的研究集中在脂溶性成分抗缺氧机制上［2～5］，目前尚未见对高原鼢鼠肌肉蛋白酶解液免疫功能的相关研究报道。为了综合开发利用高原鼢鼠资源，变害为宝，提高高原鼢鼠肉蛋白的营养和利用价值，本研究采用酶法水解高原鼢鼠肉，对酶解液的氨基酸成分进行了分析，并针对免疫系统中T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞，进行了T淋巴细胞转化实验、小鼠抗体生成脾细胞数(IgM-PFC)、NK细胞杀伤毒性实验等免疫学实验，探讨高原鼢鼠肉酶解液对小鼠免疫功能的影响。　　1材

6、料与方法　　1.1材料与试剂　　1.1.1材料　　高原鼢鼠Myospalaxbaileyi：捕于四川省阿坝州若尔盖县。　　1.1.2试剂　　木瓜蛋白酶5.8×105U/g，美国Sigma公司产品；RIMP1640培养基，美国GIBCO公司产品；MTT，ConA，LPS；Alsever溶液；Hank's溶液；0.8%戊二醛溶液；1.51%绵羊红细胞悬液。其它试剂：市售，均为分析纯。　　1.1.3动物　　昆明种健康成年小鼠，雌雄各半，体重20～22g，由四川大学华西实验动物中心提供。　　1.2仪器与设备　　DS?1高速捣碎机(上海标本模型厂)；KMTD?500型电热

7、恒温震荡水槽(上海益恒实验仪器有限公司)；LD5?10型离心机(北京医学仪器厂)；KQ?400超声波发生仪(昆山市超声仪器有限公司)；Phs?2c型pH计(上海虹益仪器厂)；751?G型紫外光栅可见分光光度计(上海分析仪器厂)等。　　1.3方法　　1.3.1酶解液制备［6］高原鼢鼠Myospalaxbaileyi肉木瓜蛋白酶解液，酶解液100℃煮沸10min，冷却至室温，以10000r/min，离心5min，收集上清液。残渣再重复提取两次，合并3次的上清液，静置，分去油脂后真空浓缩，真空干燥得酶解高原鼢鼠肉蛋白，密封冷藏。　　1.3.2酶解液氨基酸分析　　采用日

8、立835?50型氨基酸分