口服含pmg36ep30重组质粒的乳酸乳球菌对小鼠免疫应答的影响论文

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1、口服含pMG36EP30重组质粒的乳酸乳球菌对小鼠免疫应答的影响论文【摘要】目的用含pMG36EP30重组质粒的乳酸乳球菌口服免疫小鼠，观察其所诱导的小鼠细胞及体液免疫类型。方法BABL/C小鼠随机分成疫苗免疫组、乳球菌对照组、生理盐水组，每次分别饲喂5×109个悬浮在缓冲液中的重组乳酸乳球菌、不含重组质粒的乳酸乳球菌及等体积生理盐水。于第27、34及48天从鼠尾静脉取血，分离血清，ELISA法检测免疫球蛋白G(IgG)、γ干扰素（INFγ）、白细胞介素4（IL4）水平。结果疫苗免疫组IgG

2、水平与乳球菌对照组、生理盐水组比较差异有显著性（F=134.97,q=20.33、19.90,P0.01）。疫苗免疫组INFγ、IL4水平与生理盐水组及乳球菌对照组比较差异均有显著意义(F=79.20、17.05，q=6.18～16.79，P0.01)。结论该口服疫苗能引起小鼠特异性的体液免疫反应并能促进细胞免疫应答。【关键词】乳酸乳球菌pMG36EP30重组质粒免疫测定小鼠［ABSTRACT］ObjectiveTostudythechangesofimmuneresponseinmicea

3、fteroralvaccinationagondii.MethodsSixtoeighticelydividedintothreegroups:vaccinatedgroup,nonvaccinatedcontrolgroup,normalsalinegroup.Theyalsaline(salinegroup).Serumsamplesofimmunizedmiceeasuredofimmunizedmiceshomunizationoralimmunityofmiceandenhanc

4、edTh1immunityresponse.［KEYG36EP30;immunoassay;rats乳酸口服疫苗使用安全方便，可诱导机体的体液和细胞免疫.freelg/L)100μL于4℃包板过夜，次日去包被液，用0.5g/LTBST洗板3次,.freelin,每孔加入2mol/LH2SO450μL终止反应,酶标仪检测波长490nm处的吸光度（A）值。1.6细胞因子的检测末次免疫后2周，分离5只小鼠的血清用于细胞因子INFγ、IL4水平的检测，操作步骤按试剂盒说明书进行。2结果2.1特异性抗

5、P30IgG的检测疫苗免疫组IgG水平与乳球菌对照组、生理盐水组比较差异有显著意义（F=134.97,q=20.33、19.90,P0.01）；生理盐水组与乳球菌对照组比较差异无显著性（q=0.42,P0.05）。见表1。2.2各组细胞因子的测定疫苗免疫组INFγ、IL4水平与生理盐水组及乳球菌对照组比较，差异均有显著意义(F=79.20、17.05，q=6.18～16.79，P0.01)。3讨论含乳酸菌的口服疫苗由于可诱导黏膜免疫应答，所以特别适合用于研制抵抗经黏膜侵入宿主的病原体疫苗。乳酸

6、菌具有佐剂作用，这也是乳酸口服疫苗的另一个优点3。Th1细胞多分泌IFNγ、IL2，与Tc细胞的增殖、分化、成熟有关，因此Th1细胞可促进细胞介导的免疫应答，Th2细胞多分泌IL4、IL5、IL6、IL10，与B细胞增殖、成熟和促进抗体生成有关，故可增强抗体介导的免疫应答。通过检测由Th1和Th2细胞分泌的细胞因子、特异性表1各组血清中特异性抗P30IgG水平比较表2各组血清中INFγ、IL4的检测结果比较IgG，可以分析该口服疫苗所能引起的系统免疫应答。本研究结果显示，含重组质粒

7、pMG36EP30的乳酸乳球菌口服免疫小鼠，可使小鼠血清中特异性抗P30IgG的水平明显提高，说明引发了体液免疫反应。本文结果亦显示，疫苗免疫组血清中INFγ水平升高，IL4水平下降，说明该口服疫苗诱导了Th1型占优势的免疫应答，Th2型免疫应答被抑制。Th1型免疫应答的增强有利于杀灭存在于细胞内的病原体，可用于研制预防细胞内感染病原体的疫苗。弓形虫是一种寄生在有核细胞内的原虫，其主要的感染部位是黏膜，所以乳酸口服疫苗对于研制弓形虫疫苗具有明显的优势。【