磷酸肌酸、左旋精氨酸对移植供心保护作用的实验研究论文

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1、磷酸肌酸、左旋精氨酸对移植供心保护作用的实验研究论文.freelin，对照组:供心用4℃的St.Thomas液保存;1组:保存液中添加磷酸肌酸（CP）;2组:保存液中添加左旋精氨酸（L-arg）;3组:保存液中添加磷酸肌酸及左旋精氨酸。保存后进行颈部异位心脏移植术，并观察供心复跳情况。24h后处死受体动物，切除移植心脏.freellyallocatedinto4groupstogettheheartspreservedfor480minoved24haftertransplantationtodeterminethecontentso

2、fSOD，ATPaseandMDA，andtostudythemyocardialultrastructure.ResultsArrhythmiauchlessfrequentingroup3thanincontrolgroup，group1andgroup2.ThecontentsofSODandATPaseagesinmyocardialultrastructurea公司提供。1.3实验方法1.3.1动物分组随机分为4组（n=10）。对照组:停搏液及保存液中均不含CP或L-arg;1组:供心停搏液及保存液中均含CP，CP浓度为10

3、nmol.L;2组:供心停搏液及保存液中均含L-arg，其浓度为5.0g.L;3组:供心停搏液及保存液中均含CP及L-arg。另取40只体重相当的近交系DA）含量的测定移植24h后处死动物，取左心室肌，分别用二甲基亚砜化学发光法、生物发光法、荧光分光光度法测定心肌组织中SOD、ATP酶及MDA含量。1.4.3心肌超微结构观察取2块不同部位左心室组织放入4%的戊二醛液中固定，按常规制作电镜切片，锇酸染色，H-7500透射电镜下观察心肌超微结构并摄片，放大倍数为35万倍。1.5统计学处理实验数据用ˉx±s表示，采用t检验和F检验进行组间比

4、较，P0.05为差异有显著性。2结果2.1各组供心复跳情况对照组有2例未自动复跳，出现心室纤颤，心脏按摩后转正常节律;实验组有3例未自动复跳，经心脏按摩后复跳，2例24h内出现期前收缩。2.2各组动物心肌组织中SOD、ATP酶、MDA含量比较与对照组相比，实验组心肌组织中SOD、ATP酶含量明显增高，MDA含量降低（P0.05）。在实验组中，3组心肌组织中SOD、ATP酶含量高于1组、2组，而MDA含量则低于1组、2组。见表1。2.3心脏超微结构变化对照组:线粒体排列紊乱，部分线粒体成空泡，肌丝不整齐、间隙增宽（图1）。1、2组病理改

5、变较对照组为轻（图2、图3）。3组病理改变最轻，心肌细胞线粒体轻度肿胀，无嵴紊乱及消失现象，未见核膜、核仁明显改变（图4）。表1心肌组织中SOD、ATP酶、MDA含量比较（略）与对照组比较:△P0.05;与1组比较:*P0.05;与2组比较:#P0.05图1对照组心肌超微结构改变（锇酸染色，×35万）（略）图2实验1组心肌超微结构改变（锇酸染色，×35万）（略）图3实验2组心肌超微结构改变（锇酸染色，×35万）（略）图4实验3组心肌超微结构改变（锇酸染色，×35万）（略）3讨论目前常用的心脏保存液可分为细胞内液型及细胞外液型。模仿细胞

6、内离子环境的保存液被称为细胞内液型，相似于细胞外液离子浓度的保存液被称为细胞外液型。一些临床研究提示，细胞内液型保护液具有较好的心脏保存作用［1］。尽管低温和冷缺血延迟了细胞的死亡，但低温既降低了代谢又抑制了能量的产生，并且使得某些温度依赖性酶的活性降低，从而引起细胞肿胀。缺氧使无氧糖酵解过程被激活，产生大量乳酸，导致细胞酸中毒;而在血流和氧恢复的时候，心肌又会发生缺血.再灌注损伤。研究证实，黄嘌呤氧化酶和氧自由基产生的钙超载是再灌注损伤的内源性机制，此过程与缺血期ATP减少有关［2］。近年来，内皮功能的保存与心肌保护的关系受到关注。

7、正常情况下，内皮能够合成一些具有松弛血管平滑肌的血管活性因子，如内皮依赖性一氧化氮（NO）、内皮依赖性超极化因子、前列腺环素、内皮素等。然而高钾成分的细胞内液对内皮细胞的功能和结构具有损害作用。内源性CP的生物合成是由精氨酸和甘氨酸在肾合成开始，然后在肝甲基化形成肌酸，继而在各组织被磷酸化为CP。CP在高能量转换的细胞如心肌、骨骼肌等组织中含量较高，其分子中存在的高能磷酸键可在肌细胞内的各位点提供能量。心脏在冷缺血期间，心肌从有氧代谢变为无氧代谢，缺血使能量供应不足，高能磷酸盐耗竭，CP、ATP水平急剧下降。大量研究表明，外源性CP作

8、为一种高效供能物质对心肌细胞在代谢和功能上具有保护作用。其作用机制可能为:①进入细胞并参与高能磷酸肌酸水平的维持;②抑制肌纤维膜5′-核苷酸酶从而维持高能磷酸水平;③抑制溶血脂酶的聚集;④保护心肌免受过氧化损害［3］。L