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1、复合蛋白酶水解海参生殖腺工艺的研究王艺技求食品,II斜枝Vo1.28,.03,2007委妻解瀛謦穗朦麓掰觉向怡卉,苏秀榕,董明敏,郑卫星,陆福军(宁波大学生命科学与生物工程学院,宁波浙江315211)摘要:结合实际生产和复合蛋白酶的特性,本文研究了复合蛋白酶水解海参生殖腺的工艺及条件.本工艺省去了传统工艺的pH控制.酶解温度采用程序升温,45~65oC.通过单因素和正交实验分析了酶用量,底物浓度及时问对生殖腺水解的影响,确定其最佳水解条件为:底物浓度13%,酶浓度0.4%,时间2,5h.关曩谓:海参,生殖腺,复合蛋白酶,水解度Abstraet:
2、Consideringthepracticalproductionandthecharacteristicsofmixedprotease,processandconditionsforhydrolysisofgonadbymixedproteasewasstudiedComparedtotraditionaIprocess.pHcontro1wassavedinthisprocessThetemperatureofhydrolysiswas45℃-65℃Theeffectsofthemainparametersincludingenzymed
3、osage,substrateconcentrationandhydrolysistimeonhydrolysiswereinvestigated.Onthebasisoforthogonaltest,theoptimumhydrolyticconditionswereasfollows:substrateconcentrationwas13%.enzymeconcentrationwas0.4%andhydrolysistimewas2.5h.Keywords:Seacucumber;Gonad;Protamex;Degreeofhydrol
4、ysis中图分类号:TS201.2+5文献标识码:A文章编号:1002—0306(2007)03—0143—03海参,棘皮动物门,海参纲动物的通称,是重要的海洋无脊椎动物.自古以来,海参就是名贵的滋补珍品,具有延缓衰老和防治肿瘤的作用t".海参生殖腺营养丰富,蛋白含量高,特别是雄性生殖性蛋白含量高达55%,比同批海参体壁的蛋白含量(30.15%)高出近25个百分点.海参生殖腺氨基酸种类繁多,包括甘氨酸,谷氨酸,天门冬氨酸,丙氨酸,胱氨酸,精氨酸等18种,含全部的人体必须氨基酸.近年来多肽越来越受到重视,现代生物学实验已经证明【2J,多肽与蛋白质
5、,氨基酸相比具有更多优点:吸收率收稿日期:2006—09—27通讯联系人作者简介:向怡卉(J98J一),女,硕士研究生,研究方向:水产品加工与贮藏.基金项目:浙江省回国人才基金资助.好;具有低抗原,促进脂质代谢,降低胆固醇,促进矿物质吸收,降血压,抗氧化等生理功能;有较好的酸,热稳定性,水溶性.目前从海洋生物中通过酶解制备活性肽方面的研究已有报道,并取得一定进展.从海参体壁中制备活性多肽的研究工作也已展开.但是,有关以海参生殖腺为原料制备活性多肽的研究还未有报道.本文主要对复合蛋白酶水解生殖腺的最适工艺条件进行研究,同时结合复合蛋白酶本身特性和
6、酶解产品生产的实际需求对传统工艺进行改进,为开发海参生殖腺功能食品提供依据,从而提高海参的综合利用率,丰富功能食品市场.1材料与方法1.1实验材料海参生殖腺2o04年12月取于大连棒锤岛海参有限公司,活刺参用蒸馏水冲洗后解剖取出内脏,取生殖腺于干净离心管中备用;复合蛋白酶1.0xl0U/g远天酶制剂厂;其他试剂均为分析纯.1.2实验方法1.2.1水解工艺活海参一解剖一取生殖腺一加酶和纯净水一45℃水解一50℃水解一55c(=水解一60℃水解一65c(=水解一1()()℃灭酶5rnin一生殖腺水解液1.2.2测定方法氨基态氮的测定:水合茚三酮法;
7、总氮的测定:凯氏定氮法;水解度的计算:DH(%)=水解的氨基酸态氮/样品中的总氮量X100%.2实验结果2.1复合蛋白酶水解海参生殖腺的单因素实验影响酶促水解反应的因素很多,诸如反应温度,pH,底物浓度,加酶量,反应时间.即使同一种酶在水解不同底物时,水解的条件也不尽相同,所以首先对酶水解条件进行单因素分析.2.1.1底物浓度对水解度的影响分别配制底物浓度为8%,10%,12%,14%,16%,18%和20%的海参生殖食品,业斜妓ScienceandTechnologyofFoodIndustry腺溶液,加酶量为0.5%,在45,50,55,6
8、0和65oC分别水解24min后,得出最佳的底物浓度,结果见图1.一一Z0底物浓度(%)图l底物浓度对生殖腺水解度的影响由图1可见,随着底物浓度的降低
