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1、携带HGF基因的减毒沙门氏菌对大鼠胃溃疡愈合及CD34表达的影响的论文作者:刘书文,哈小琴,吕同德,张有成,刘斌【摘要】目的:通过对乙酸性胃溃疡大鼠口服携带肝细胞生长因子(hgf)基因的减毒鼠伤寒沙门氏菌(st)后检测胃溃疡愈合情况及局部和cd34蛋白表达的研究,探讨基因药物sthgf对乙酸性大鼠胃溃疡的治疗作用.方法:建立乙酸性胃溃疡大鼠77只,并随机选出5只,给予携带绿色荧光蛋白(gfp)基因的st后观察gfp在大鼠胃壁中的分布,剩余大鼠随机分为3组(n=24):sthgf治疗组,st治疗组,nahco3对照组;增菌后各组动物于造模第2日起灌胃相应药物,隔日一次,分
2、别于给药后7,14,21d取胃溃疡组织行he病理组织学观察,免疫组化法检测cd34蛋白的表达.结果:给药后7d光镜下溃疡部位黏膜消失,局部有大量坏死组织,各组胃黏膜上皮爬行不明显;给药后14,21d,sthgf组黏膜上皮增生较另两组快(p<0.01);给药后7,14,21d,cd34蛋白在sthgf组的表达高于另两组(p<0.05),组间有统计学差异.结论:sthgf可促进实验性大鼠胃溃疡黏膜上皮修复和溃疡面血管增生,加快溃疡愈合.【关键词】疫苗,减毒;沙门菌,鼠伤寒;胃溃疡;愈合;肝细胞生长因子;cd34 【abstract】aim:toinvestigateth
3、eeffectoftheattenuatedsalmonellatyphimurium(st)ethods:seventysevenaceticacidinducedgastriculcerratmodelslyselectedouttoobservethedistributionofgreenfluorescentprotein(gfp)inthegastrictissue,thentheremainingratslydividedinto3groups(n=24):sthgftreatmentgroup,sttreatmentgroupandnahco3contr
4、olgroup.ratsofeachgroupg/lnahco3everyotherdayorally.histopathologicalexaminationoftheulcertissueedbyhestainingandtheexpressionsofcd34munohistochemicalmethodinistration.results:onday7,gastricmucosadisappearedinulcersite,agreatofnecrotictissuecraproliferatedmorequicklyinsthgfgroupthaninothe
5、r2groups(p<0.01).theexpressionofcd34proteininsthgfgrouponellatyphimuriumcarryinghgfgenecouldpromotegastricmucosarepairandneation,thusacceleratingthehealingofulcersinexperimentalrats. 【keyonellatyphimurium;stomachulcer;healing;hepatocytegroonellatyphimurium,st)是一种良好的口服dna载体.研究发现,在体内,st
6、可以将编码外源基因的真核质粒递呈入抗原递呈细胞(如巨噬细胞、树突状细胞等),并在其中表达及释放[1].肝细胞生长因子(hepatocytegroinggrog/kg)腹腔内给药麻醉后固定,常规消毒大鼠腹部皮肤,上腹部正中切口长2.0cm,打开腹腔,暴露术野,微量注射器在大鼠胃窦前壁浆膜下(进针0.5mm以防止乙酸漏出)注入30μl的纯冰乙酸后依次缝合腹壁各层组织. 1.2.2分组、给药及病理观察建立大鼠模型77只,并随机选出5只,给予stgfp用于检测gfp在胃壁中的分布,72只大鼠随机分成3组(n=24):sthgf治疗组,st组和碳酸氢钠(nahco3)对照组,s
7、thgf,stgfp和st菌株在lb培养液中37℃摇菌过夜活化并在sthgf组中加入丁胺卡那霉素50μl(sthgf对丁胺卡那霉素有抗性),次日扩大培养约16h(10mllb液中加相应活化的菌100μl),在a525nm波长测值计算菌量,菌液离心去上清后用1×105mg/lnahco3重悬菌体,调整细菌数为2×109cfu/ml,每只0.5ml,nahco3组给1×105mg/lnahco30.5ml,自术后第2日起隔日给药一次,直到取标本;除stgfp组5只于给药7d后全部取标本外,其余三组分别于给药后