马鞭草抗乙肝有效部位化学成分研究论文

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1、马鞭草抗乙肝有效部位化学成分研究论文陈丽花,李志军,王定勇【摘要】目的研究马鞭草(VerbenaofficinalisL.)抗乙肝有效部位的化学成分。方法采用柱层析和薄层层析分离马鞭草有效部位中的化学成分;用IR、ESIMS、1HNMR、13CNMR等波谱技术鉴定结构。结果分离并鉴定了6个化合物，分别为山柰酚(1)、槲皮素(2)、杨梅素(3)、熊果酸(4)、马鞭草苷(5)和杨梅苷(6)。结论首次报道马鞭草抗乙肝有效部位的化学成分;化合物3、6为首次从该植物中分离得到。【关键词】马鞭草杨梅素抗乙肝作用Abstract:ObjectiveTostudythechemical

2、constituentsintheantiHBVactivefractionofVerbenaofficinalis.MethodsTheconstituentsnchromatographyandthinlayerchromatography,andtheirstructurestheeffectivefractionofVerbenaofficinalis:kaempferol(1),quercetin(2),myricetin(3),ursolicacid(4),verbenalin(5)andmyricetrin(6).ConclusionsChemicalcons

3、tituentsintheantiHBVactivefractionofVerbenaofficinalisthisplantforthefirsttime.Keyicalconstituents;myricetin;antihepatitisBvirus马鞭草(VerbenaofficinalisL.)为马鞭草科(Verbenaceae)多年生草本植物，始载于《名医别录》，民间以其全草或带根全草入药。马鞭草作为传统中药，具有清热解毒、消肿利尿、活血通经等功效，广泛用于治疗伤风感冒、水肿、痢疾、黄疸等证1。现代研究表明，马鞭草能抑制乙型肝炎病毒(HBV)和HBsAg，并能

4、抗乙肝纤维化2-3。利用酶联免疫吸附检测(ELISA)技术4.freel)均为青岛海洋化工厂生产，SephadexLH20为美国GE公司产品，ODS为日本YMC产品。马鞭草于2008年8月采自广东省广州市，由广东药学院中药学院曾令杰博士鉴定为马鞭草(VerbenaofficinalisL.)。2提取与分离取阴干的马鞭草10kg，粉碎至约60目，用适量甲醇室温浸泡3次,.freelL分液漏斗,依次用石油醚、CHCl3萃取3次(每次用1000mL溶剂)，除掉极性小的化学成分,再用EtOAc萃取3次(每次用1000mL),减压浓缩乙酸乙酯萃取液后得到乙酸乙酯萃取物35g。ELIS

5、A法检测结果表明乙酸乙酯萃取物为马鞭草抗乙肝活性有效部位4。有效部位经硅胶柱层析(200～300目)，三氯甲烷甲醇系统(体积比20∶1～0∶1)梯度洗脱。TLC检测，合并相同组分，共得到7个部分;各部分再经SephadexLH20柱层析洗脱剂为甲醇水(体积比3∶2)、ODS柱层析洗脱剂为乙腈水(体积比1∶1)、制备薄层层析(展开剂为氯仿甲醇体系)等反复分离纯化，得到化合物1(20mg)、2(38mg)、3(15mg)、4(30mg)、5(55mg)和6(10mg)。3结构鉴定化合物1：黄色粉末，mp275.0～276.5℃。HClMg试验显阳性。ESIMS(m/

6、z):287.0M+H+。1HNMR(500MHz,DMSOd6)δ:12.18(1H,s,5OH),8.15(2H,d,J=8.5Hz,H2′,6′),7.02(2H,d,J=8.5Hz,H3′,5′),6.55(1H,d,J=2.0Hz,H8),6.27(1H,J=2.0Hz,H6)。13CNMR(125MHz,DMSOd6)δ:146.9(C2),133.5(C3),176.5(C4),162.2(C5),99.0(C6),164.9(C7),94.3(C8),157.6(C9),103.9(C10),123.1(C1’),130.

7、3(C2′,6′),116.2(C3′,5′),160.1(C4′)。以上波谱数据与文献5报道的山柰酚一致。化合物2：黄色粉末，mp303.0～304.5℃。HClMg试验显阳性。ESIMS(m/z):325.0M+Na+。1HNMR(500MHz,DMSOd6)δ:12.20(1H,s,5OH),7.80(1H,d,J=1.8Hz,H2′),7.68(1H,dd,J=8.6,1.8Hz,H6′),6.98(1H,d,J=8.6Hz,H5′),6.51(1H,J=2.0Hz,H8