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1、马鞭草抗乙肝有效部位化学成分探究作者：陈丽花，李志军，王定勇【摘要】目的研究马鞭草(VerbenaofficinalisL.)抗乙肝有效部位的化学成分。方法采用柱层析和薄层层析分离马鞭草有效部位中的化学成分；用IR、ESIMS、1HNMR、13CNMR等波谱技术鉴定结构。结果分离并鉴定了6个化合物，分别为山奈酚(1)、桝皮素(2)、杨梅素(3)、熊果酸(4)、马鞭草昔(5)和杨梅昔(6)。结论首次报道马鞭草抗乙肝有效部位的化学成分;化合物3、6为首次从该植物中分离得到。【关键词】马鞭草杨梅素抗乙肝作用Abstract：
2、ObjectiveTostudythechemicalconstituentsintheantiHBVactivefractionofVerbenaofficinalis・MethodsTheconstituentswereseparatedandpurifiedbycolumnchromatographyandthinlayerchromatography,andtheirstruetureswereelucidatedbyIR,MS,1HNMRand13CNMR.ResultsSixcompoundswereiso
3、latedfromtheeffectivefractionofVerbenaofficinalis：kaempferol(1),quercetin(2),myricetin(3),ursolicacid(4),verbenalin(5)andmyricetrin(6).ConelusionsChemicalconstituentsintheantiHBVactivefractionofVerbenaofficinaliswerefirstreported.Compounds3and6wereobtainedfromth
4、isplantforthefirsttime・Keywords：Verbenaofficinalis；chemicalconstituents；myricetin；antihepatitisBvirus马鞭草(VerbenaofficinalisL.)为马鞭草科(Verbenaceae)多年生草本植物，始载于《名医别录》，民间以其全草或带根全草入药。马鞭草作为传统中药，具有清热解毒、消肿利尿、活血通经等功效，广泛用于治疗伤风感冒、水肿、痢疾、黄疸等证［1］。现代研究表明，马鞭草能抑制乙型肝炎病毒(HBV)和HBsAg,
5、并能抗乙肝纤维化［2-3］。利用酶联免疫吸附检测(ELISA)技术［4］,作者筛选到马鞭草抗乙肝活性的有效部位。为阐明其药效物质基础，本文对该有效部位进行系统的化学成分研究,从中分离得到6个化合物,分别鉴定为山奈酚(1)、桝皮素(2)、杨梅素(3)、熊果酸⑷、马鞭草昔(5)和杨梅昔(6),其中化合物3和6为首次从该植物中分离得到。1仪器与材料熔点用XRC1显微熔点仪(四川大学科仪厂制造)测定，温度计未校正；红外光谱用NicoletPROTG460光谱仪测定，澳化钾压片；核磁共振用BrukerAM500型核磁共振仪测定,
6、TMS为内标;ESIMS在HP1100LC/MS±测定。柱色谱用硅胶（200〜300目）、薄层色谱用硅胶（10〜40um）均为青岛海洋化工厂生产，SephadexLH20为美国GE公司产品，0DS为日本YMC产品。马鞭草于2008年8月采自广东省广州市，由广东药学院中药学院曾令杰博士鉴定为马鞭草（VerbenaofficinalisL.）。2提取与分离取阴干的马鞭草10kg,粉碎至约60目，用适量甲醇室温浸泡3次，每次7d,合并提取液，抽滤，减压回收甲醇得墨绿色黏膏状提取物280go取该提取物250g分散于适量热水中再
7、转移至2500mL分液漏斗，依次用石油瞇、CHC13萃取3次（每次用1000mL溶剂），除掉极性小的化学成分,再用EtOAc萃取3次（每次用1000mL）,减压浓缩乙酸乙酯萃取液后得到乙酸乙酯萃取物35goELISA法检测结果表明乙酸乙酯萃取物为马鞭草抗乙肝活性有效部位［4］。有效部位经硅胶柱层析（200〜300目），三氯甲烷甲醇系统（体积比20:1〜0:1）梯度洗脱。TLC检测，合并相同组分，共得到7个部分;各部分再经SephadexLH20柱层析［洗脱剂为甲醇水（体积比3：2）］、ODS柱层析［洗脱剂为乙騰水（体积
8、比1：1）］、制备薄层层析（展开剂为氯仿甲醇体系）等反复分离纯化，得到化合物1（20mg）.2（38mg）.3（15mg）、4（30mg）、5（55mg）和6（10mg）。3结构鉴定化合物1：黄色粉末，mp275.0〜276・5°C。HC1Mg试验显阳性。ESIMS(m/z):287.0[M+H]+o1HNMR(500MHz,DM
