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时间:2018-07-06
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1、防风中色原酮类化合物的抗氧化活性研究论文李丽,桂语歌,时东方,刘春明【摘要】目的采用超声提取法进行提取,考察了不同提取时间,不同提取温度及不同提取溶剂对防风中色原酮类化合物提取率的影响。方法采用Folin-Ciocalteu方法测定防风不同提取物总酚含量,采用DPPH抗氧化活性体外评价体系对防风不同提取物的抗氧化活性进行了系统研究。结果超声提取90min样品总酚含量最高,而超声120min乙醇提取物表现出强抗氧化活性。结论防风不同提取物表现出不同的抗氧化活性.freele,temperatureandsolvent.MethodsFolin-Cilcaileumethodeasureth
2、eantioxidantactivityofdifferentextracts.ResultsTheTPCsof80%ethanolextractat90minshoinexhibitedstrongantioxidantactivityinDPPHassay.ConclusionTheantioxidantactivityindifferentsamplesdidn'tshoones;Thetotalphenolic;Antioxidantactivity;DPPH防风为伞形科多年生草本植物防风Saposhnikoviadivaricata(Turcz.)Schischk的干燥根。药理
3、研究表明,防风具有解热镇痛、镇静、抗炎、抗菌、抗过敏等多方面的药理作用[1,2]。防风中主要含有色原酮类、香豆素类以及多糖类等多种化学成分,而主要有效成分为色原酮化合物[3~9]。本文以防风中的色原酮化合物为研究对象,采用超声提取法进行提取,考察了不同提取时间,不同提取温度以及不同提取溶剂对防风中色原酮化合物提取率的影响。采用Folin-Ciocalteu方法测定防风不同提取物的总酚含量。采用DPPH抗氧化活性体外评价体系对防风不同提取物的抗氧化活性进行了系统研究。1器材1.1样品和试剂防风Saposhnikoviadivaricata(Turcz.)Schischk药材购于北京同仁堂长
4、春药店;所用试剂均为分析纯试剂,购于北京北化精细化学品有限责任公司。没食子酸,Folin-Ciocalteu试剂,2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH˙)购自SigmaChemicalCo.公司(St.Louis,Mo)。1.2仪器旋转蒸发仪(上海爱郎仪器有限公司);SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);BS-124S电子天平(SartoriusAG,Sartorius);加样枪(Germany);HS-Z11-Ⅱ电热蒸馏水器(上海跃进医疗器械厂);紫外-可见分光光度仪(DU800,BeckmanCoulter,Inc.USA)。2方法2
5、.1样品制备精密称取2g防风样品,采用80%乙醇为提取溶剂,分别超声提取30,60,90,120,150min,提取液过滤,水浴温度40℃减压回收乙醇至干,用3ml80%乙醇定容得样品提取液。精密称取2g防风样品,采用80%乙醇为提取溶剂超声提取0.5h,提取2次,提取温度分别为30,40,50,60,70,80℃,将提取液过滤,水浴温度40℃减压回收乙醇至干,用3ml80%乙醇定容得样品提取液。精密称取2g防风样品,以80%乙醇,正丁醇和醋酸乙酯为提取溶剂,30℃超声提取0.5h,提取2次,将提取液过滤,水浴温度40℃减压回收乙醇至干,用3ml80%醋醇定容得样品提取液。2.2样品总多
6、酚含量测定样品总酚含量的测定采用国际上通用的Folin-Ciocalteu方法[10],样品总酚含量结果表示为每克提取物中含有相当没食子酸的毫克数。吸取0.2ml一定浓度的没食子酸标准品溶液,加入1ml0.5mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,再加入0.8ml7.5%的碳酸钠溶液充分混合,室温下放置30min,然后在765nm下测吸光度值(紫外-可见分光光度仪:DU800,BeckmanCoulter,.freelg/ml)。之后吸取0.2ml一定浓度的不同提取方式的样品溶液,使样品溶液的吸光值落在标准曲线上,加入1ml0.5mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,再
7、加入0.8ml7.5%的碳酸钠溶液充分混合,室温下放置30min,然后在765nm下测吸光度值,得样品溶液的吸光度值,代入标准曲线方程,得到样品的总酚含量。2.3DPPH方法测定样品的抗氧化活性准确称取[DPPH·],配置浓度为0.04076mg/ml的[DPPH·]乙醇溶液,得到[DPPH·]标准曲线方程为:Y=18.032X-0.0016,R2=0.9993。自由基残留率的测定及计算方法参照文献[11,12]。在实验中以乙醇为溶
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