瑞舒伐他汀对冠心病患者单核巨噬细胞abca1及srebp2表达的影响论文

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1、瑞舒伐他汀对冠心病患者单核巨噬细胞ABCA1及SREBP2表达的影响论文张培东刘映峰郭阳缪绯【摘要】目的探讨瑞舒伐他汀对冠心病（CHD）患者单核巨噬细胞ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)mRNA和固醇调节元件结合蛋白2（SREBP2）mRNA表达的影响。方法体外分离并培养CHD患者单核细胞，经佛波酯（PMA）诱导48h成为巨噬细胞后，分别给予0、0.1、1、5、10μmol/L瑞舒伐他汀干预;提取细胞总RNA，用实时荧光相对定量PCR(实时RTPCR)检测ABCA1和SREBP2mRNA的表达。结果不同

2、浓度瑞舒伐他汀干预组单核巨噬细胞ABCA1mRNA表达水平存在差异（P＜0.05），给予0.1、1、5、10μmol/L瑞舒伐他汀干预组的ABCA1mRNA表达水平与空白对照组比较均有降低（P＜0.05）。不同浓度瑞舒伐他汀干预组SREBP2mRNA表达量也存在差异（P＜0.05）,并且与对照组比较均有明显升高（P＜0.05）。结论在CHD外周血来源单核巨噬细胞干预模型中，瑞舒伐他汀能下调胆固醇逆转运相关基因ABCA1mRNA的表达，并且上调细胞内胆固醇合成相关基因SREBP2mRNA的表达。【关键词】瑞舒伐他

3、汀；ATP结合盒转运蛋白A1；固醇调节元件结合蛋白2【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofrosuvastatinonexpressionsofATPbindingcassettetransporterA1(ABCA1)andSterolregulatoryelementbindingprotein2(SREBP2)mRNAinmonocytesandmacrophagesofcoronaryheartdisease(CHD).MethodsMonocytesedi

4、um.Culturedmonocytesacrophagesbyphorbolmyristateacetate(PMA)for48h.Eachgroupol/Lrosuvastatinrespectively.TotalRNAofthesecellseRTPCRedtoinspecttheexpressionsofABCA1andSREBP2mRNAinthecells.ResultsAmplificationproductsofABCA1andSREBP2haveexcellentspecificity.T

5、hegroupsofdifferentconcentrationsofrosuvastatinhaddifferentexpressionofABCA1mRNAlevels(P＜0.05)inmonocytemacrophages.TheexpressionsofABCA1mRNAingroupsgivenrosuvastatinRNAlevels(P＜0.05).TheexpressionsofSREBP2mRNAingroupsgivenrosuvastatinodelofmacrophageinducedf

6、rommonocytesofCHDpatients,theexpressionofABCA1mRNAcanbedoRNAcanbeupregulatedbyRosuvastatin.【Keyentbindingprotein2瑞舒伐他汀（rosuvastatin）是最新的他汀类降脂药，大量多中心临床试验证明瑞舒伐他汀具有独特的强效降低低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)和显著升高高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)的疗效.freel公司产品，胎牛血清为杭州四季青公司产品，氟波酯（PMA）为Sigma公司产品，总RNA抽提试

7、剂盒为美国Invitrogen公司产品，cDNA合成试剂盒为MBI公司产品，荧光定量PCR试剂盒(染料法)均购自美国Invitrogen公司上海分部，瑞舒伐他汀为英国阿斯利康公司产品（分子量为1001.14，10mg/片），其他试剂为国产或进口分析纯。荧光PCR定量仪器型号：BIOradIQ5。1.2单核巨噬细胞的培养选取来我院就诊经冠状动脉造影确诊为CHD的患者外周血20ml，500U/ml肝素抗凝，全血以Hanks液1倍稀释混匀，缓慢加入含有4ml淋巴细胞分离液的离心管中，1500r/min离心后吸取环状乳

8、白色淋巴细胞层，再以5mlHanks液充分混匀，2000r/min离心洗涤2次；以10%胎牛血清的DMEM16404ml将细胞吹开混匀，将细胞悬液每孔2ml种于12孔板中，37℃下CO2孵箱恒温培养。细胞浓度在106个/ml水平。培养2d后的细胞，各组用含终浓度为50ng/ml的PMA刺激48h，使之转化为巨噬细胞。光学显微镜下观察细胞形态改变。1.3试验