肿瘤相关抗原在人大肠癌中的表达论文

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1、肿瘤相关抗原在人大肠癌中的表达论文冯慧,伊德林,曾艳,刘芙蓉,方瑾,宋今丹【摘要】目的应用ND1单抗和抗CEA单抗对大肠癌细胞的标记情况对比,探讨LEA在大肠癌中的表达及意义。方法采用流式细胞仪和免疫细胞化学染色检测大肠癌细胞系LEA和CEA的表达。并采用间接ELISA法测定LEA和CEA单抗对大肠癌细胞系的特异性。应用免疫组化检测其在大肠癌组织中的表达。结果流式细胞仪检测显示,LEA抗原在CCL187、CX1、CLoneA和CCL229细胞表达的阳性峰平均荧光强度呈递减趋势.freelorassocia

2、tedAntigeninColorectalCarcinomaAbstract:ObjectiveThisstudyaassociatedantigenLEAincolorectalcarcinomacellsthroughtheparisonofaneonoclonalantibody(ND1)andantiCEAmonoclonalantibody.MethodsExpressionofLEAandCEAincolorectalcarcinomacellsmunocytochemistryandfloet

3、ry.ThespecificityofLEAandCEAincolorectalcancercellsmunohistochemicalmethod.ResultsFloetrydetectionshoeanfluorescenceintensityountinloonoclonalantibodyND1hadstrongerspecificbindingactivitytothecolorectalcarcinomacelllinesasparedtotheCEA(P0.01).TheexpressionofL

4、EAordifferentiationdegree(P0.01)andexhibitedhigherselectivityinilarselectivityinoderately,andpoorlydifferentiatedcolorectalcancer(P0.05).ConclusionLEAismorespecificaassociatedantigen.LEAmayberelatedtothedifferentiationdegree,invasivenessandmalignancydegreeofc

5、ancercells.LEAcanbeusedasausefulmeasurementfortheearlydiagnosisandmalignancydegreeofcolorectalcarcinoma.Keyorassociatedantigen;Colorectalcancercells;Expression0引言大肠癌是我国最常见的恶性肿瘤之一。其发生是一个以原癌基因激活和抑癌基因失活为基础的多步骤、多阶段的过程。目前,晚期大肠癌的5年生存率并无多大改观1。提高大肠癌治愈率的关键在于早发现、早诊断、早治

6、疗。因此寻找理想的特异性强、敏感性高的肿瘤相关抗原是提高防治的重要手段之一。CEA(Carcinoembryonicantigen,CEA)是最早发现的大肠癌血清肿瘤标志物,即癌胚抗原2,分子量约为180kD的糖蛋白,编码基因位于19号染色体,CEA在大多数恶性肿瘤血清中均有不同程度升高,特异性较低,对大肠癌的早期诊断价值不高。1986年宋今丹教授在美国哈佛大学进行合作研究期间,用人大肠癌细胞系CCL187作为免疫原,将获得的单克隆抗体命名为ND1,将其所识别的大肠癌细胞表面肿瘤相关抗原命名为LEA(Large

7、ExternalAntigen,LEA)3。生物学特性研究表明,LEA是一种大分子量的可溶性大肠癌相关抗原,位于细胞表面的细胞膜,分子量大于500kD,属糖蛋白。本研究应用抗人大肠癌单克隆抗体ND1与抗CEA单抗在大肠癌细胞表面的标记情况作比较,进一步证明抗人大肠癌细胞膜表面抗原(LEA)的单克隆抗体(ND1)有很高的特异性,为应用此抗体进行大肠癌临床病理辅助诊断、血清学检测和导向治疗等提供重要的实验依据。1材料与方法1.1实验材料1.1.1动物与细胞Balb/c纯系小鼠由本校实验动物部提供,动物合格证号:省动

8、字01110,分泌抗人大肠癌mAbND1的鼠杂交瘤细胞株IC2由宋今丹研制建株,人大肠癌细胞系CCL187、CX1、CCL229和CLoneA均由美国哈佛大学医学院DanaFarber肿瘤研究所惠赠,人宫颈癌细胞系HeLa由哈佛大学赠送。1.1.2试剂与仪器RPMI1640、DMEM培养基为Sigma公司产品,抗LEA单克隆抗体由本室研制;降植烷为

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