血小板因子4对环磷酰胺诱导化学损伤小鼠骨髓细胞的保护作用论文

《血小板因子4对环磷酰胺诱导化学损伤小鼠骨髓细胞的保护作用论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、血小板因子4对环磷酰胺诱导化学损伤小鼠骨髓细胞的保护作用论文.freelgkg-1，腹腔一次性注射，造成药物损伤模型.给CTX前给予PF4预处理，给药后动态观察小鼠外周血白细胞数的变化，并于第5和第8日，分别用流式细胞仪（FCM）测定骨髓有核细胞DNA的含量及细胞周期变化.结果注射CTX后4d，外周血白细胞降至最低点，然后逐渐回升.freelide;hematopoieticstemcellAbstract:AIMToprovideevidenceforstudyingthechemo-protectiv

2、eeffectofPF4anditsmachanismonmurinehematopoieticcellstreatedicegkg-1）tomakethemodelsofchemicallesions.Thenthenumbersoftheirperipheral）.RESULTSThereentgroupsandtheoneofCTXgroups（P0.05）.Onday5，bonemarroentgroupsent，bonemarroentgroupsurinebonemarrothecytotox

3、iceffectsofCTX.PF4shouldbeapotentprotectiveagentduringchemotherapy.0引言骨髓造血系统是对化疗非常敏感的组织，在造血系统恶性肿瘤的治疗过程中，常因骨髓造血抑制而限制化疗药物的剂量，直接影响肿瘤的治疗效果.环磷酰胺（CTX）是肿瘤化疗中最常用的烷化剂，但其对正常骨髓细胞也有很强的抑制作用.此外，作为免疫抑制剂的化疗药物，CTX还是干细胞移植前预处理最常用的药物之一.已有研究表明，血小板因子4（PF4）对5-FU处理的小鼠骨髓有明显的保护作用［

4、1］.但Han等［2］体外实验证明，PF4对HL-60，HEL，SMMC7721及MKN-45等肿瘤细胞株无保护作用.PF4的保护作用与其能可逆性抑制造血干/祖细胞的增殖有关［3］，但对烷化剂CTX的作用至今尚未见报道.为进一步探讨PF4对CTX诱导的损伤小鼠骨髓造血干细胞的影响，我们建立了CTX诱导小鼠骨髓损伤的实验动物模型.通过流式细胞仪测定细胞周期的变化，探讨了PF4对造血干细胞的化疗保护作用的机制.1材料和方法1.1材料动物:一级BALB/c小鼠36只，雄性，体质量18～20g，鼠龄10～12a公

5、司，系500μg甘氨酸缓冲液冻干品，用5mL三蒸水稀释成工作液，4℃冰箱备用，稀释浓度为100mgL-1.CTX由江苏恒瑞医药股份有限公司生产，批号01111221，200mg/支，溶于10mL生理盐水中，稀释浓度为20gL-1.1.2方法1.2.1分组将36只小鼠随机分为3组，即PF4处理组、单独CTX处理组和PBS对照组，每组12只.PF4处理组:小鼠一次性ipCTX，剂量为200mgkg-1，用CTX前26h和20h各ipPF4，剂量为40μgkg-1.单独CTX处理组:CTX用法同上，给CTX前i

6、p等体积的PBS缓冲液.PBS对照组:按上述方法注射等体积的PBS.各组分别于给CTX前及给CTX后2，4，5，6和8d取尾静脉血进行白细胞计数.1.2.2制备骨髓有核细胞悬液给予CTX后第5日及第8日每组小鼠各取6只，以颈椎脱臼法处死.取出股骨，剔除肌肉和结缔组织，剪开股骨两头，用6号针头以RPMI1640液冲出骨髓细胞，再用4号针头过滤制成单个骨髓细胞悬液，检测骨髓有核细胞（bonemarroin-1，5min），弃上清，用PBS洗涤2次，再加入1mLPBS重悬成单细胞悬液，加入2mL无水乙醇，立即混

7、匀，用封口膜封口，放置4℃冰箱冷藏备用.每份样品的细胞数约为（5～10）×105个.1.2.4细胞周期分析取上述样品，用PBS洗2次，以洗去残留的无水乙醇，加100μLPBS后混匀，用碘化丙锭染色后，以流式细胞仪分析细胞周期及DNA含量的变化.以上实验均重复2次.统计学处理:数据用x±s表示，组间比较采用t检验.2结果2.1PF4对CTX损伤小鼠外周血白细胞的影响各组小鼠外周血白细胞的动态变化见Fig1.单独用CTX后4d，期最少，CTX组的细胞周期发生变化，G0/G1期细胞占75.7%，而PF4处理组G

8、0/G1期比例占82.1%，较单独CTX处理组明显增多，差异有显著性（P0.01）.第8日（Fig2D为CTX组）3个组比较G0/G1期比例无明显差异（P0.05）.3讨论PF4是激活的血小板α颗粒释放的特异蛋白，属于CXC类趋化因子，除与炎症有关外［4，5］，与多种细胞的生物功能均有着密切联系，其中与造血和肿瘤的关系日益受到重视，包括抑制血管新生［6，7］、抑制内皮细胞增殖［8］及以依赖和不依赖肝素两种途径抑制造血干/祖细胞