抑癌基因pten在子宫内膜异位症发生发展中的作用论文

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1、抑癌基因PTEN在子宫内膜异位症发生发展中的作用论文马佳佳,陈必良,马向东,王德堂【关键词】子宫内膜异位症【Abstract】AIM:Toinvestigatetheexpressionofphosphataseandtensionhomologuedeletedonchromosome10,thetumorsuppressorgenePTEN,inectopicendometriuminpatientsetriosisandtostudytheroleofPTENinthepathogenesisofth

2、edisease.METHODS:TheexpressionofPTENinectopicendometriumin37patientsetriosis,including20ovarianendometriosisand17adenomyosispatients,ethod.Thirtythrecpatientsyomaetriumdecreasedsignificantlyasparedainlyseeninthecytoplasm.Thegeneexpressionshoetriosisandinco

3、ntrols.ThePTENstainingorefrequentinsecretoryphasethaninproliferativephase.ButthedifferenceyosisetriosisRNAetriosis(P=0.0026).CONCLUSION:ThechangeofthePTENexpressionmaybeinvolvedinthepathophysiologyofendometriosis.【Keyetriosis;endometrium;insituhybridizatio

4、n;genes,suppressor,tumor;RNA,messenger【摘要】目的:检测第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)在子宫内膜异位症(EMS)中的表达,探讨其在EMS发病机制中的作用.方法:收集EMS患者子宫内膜病灶37(卵巢巧克力囊肿20,子宫肌腺症17)例和正常子宫内膜33例,采用原位杂交技术检测PTENmRNA在异位内膜组织中的定位和表达强度,并比较PTEN基因表达与EMS临床分型的关系.结果:PTENmRNA主要表达于腺体细胞的胞质中;与正常子宫内膜相比.free

5、lRNA的表达呈明显的周期性改变,在增殖期内膜呈低水平表达,分泌期表达增加,但这一差异仅在正常子宫内膜组织中有意义(P=0.0102);PTENmRNA的表达水平随临床分期的增加而降低(P=0.0026);但在子宫肌腺症和卵巢巧克力囊肿组织中,PTEN基因表达水平无差异(55.0%vs52.9%,P=0.4018).结论:PTENmRNA表达水平的降低可能是EMS的发病机制之一.【关键词】PTEN;子宫内膜异位症;子宫内膜;原位杂交;基因,抑制,肿瘤;RNA,信使0引言子宫内膜异位症(endometrios

6、is,EMS)是育龄期妇女常见的一种妇科病,近年国内报道的临床发病率约为10%,其发病机制涉及经血逆流、激素、免疫、遗传、环境等多个方面.目前,在基因水平上研究EMS的发病机制及其生物学特性已经成为妇科基础研究的热点之一.新近发现的第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(phosphataseandtensionhomologuedeletedonchromosome10,.freelo内未接受任何激素治疗.子宫内膜分期按各期内膜形态学特点并结合患者月经史做出判断.PTEN原位杂交试剂盒、原位杂交专

7、用盖玻片及DAB显色剂购自武汉博士德公司;DEPC为Sigma公司产品;PTEN寡核酸探针序列为:①5′ATTGCTATGGGATTTCCTGCAGAAAGACTT3′;②5′GGGAGTAACTATTCCCAGTCAGAGGCGCTA3′;③5′TTCTGACACCACTGACTCTGATCCAGAGAA3′.1.2方法1.2.1标本处理术中所取标本均用多聚甲醛(含1mL/LDEPC)固定,常规石蜡包埋,5μm连续切片,每一标本留取4张切片,其中1张做HE染色,明确病理诊断并进行分期,2张做原位杂交染色,

8、1张作为阴性对照.1.2.2原位杂交严格按照试剂盒说明书进行操作.将石蜡切片常规脱蜡至水,加30mL/LH2O2室温处理15min灭活内源性过氧化物酶,DEPC水洗涤2×5min.加胃蛋白酶于37℃消化30min,暴露mRNA核酸片段,40℃预杂交4h,滤纸吸干预杂交液滴,40℃杂交过夜.杂交后梯度SSC溶液洗涤,加封闭液37℃30min,滴加生物素化鼠抗地高辛37℃孵育1h,滴加SABC室温孵育30min,滴加

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