褪黑素对庆大霉素急性肾损伤保护作用的研究

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1、褪黑素对庆大霉素急性肾损伤保护作用的研究【摘要】目的观察褪黑素(MLT)对庆大霉素(GM)所致大鼠急性肾损伤的保护作用,并探讨其可能的机制。方法将24只组、GM+MLT组、对照(Cont)组。应用药物前后,分别记录并观察各组大鼠体质量和24h尿量的变化;检测并观察用药后第5天血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿N乙酰βD氨基葡萄糖苷酶(NAG)以及血清、组织匀浆中丙二醛(MDA)、过氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSHPx)各指标的变化;处死大鼠后经肉眼观察和光镜检查肾组织

2、的形态学变化。结果3组大鼠的肾组织形态学评分比较,差异有显著性;GM+MLT组血BUN、Cr,尿NAG以及血清、组织匀浆中MDA、SOD、GSHPx各指标与GM组比较差异有显著性(t=-10.41~9.55,P<0.01)。结论MLT可通过抗氧化作用减轻庆大霉素对肾脏的损伤,对急性肾损伤具有一定的保护作用。【关键词】褪黑素庆大霉素肾小管坏死急性大鼠[ABSTRACT]ObjectiveTostudyelatoninpossessesprotectiveeffectsongentamici

3、ninducedacuterenalinjuryandapproachitspossiblemechanism.MethodsTlydividedintothreegroups:GMgroup,GM+MLTgroupandControlgroup.Theeent.Bloodureanitrogen(BUN),serumcreatinine(Cr),thelevelofmalondialdehyde(MDA)inserumandrenaltissue,theactivitiesofsuperox

4、idedismutase(SOD)andglutathioneperoxidase(GSHPx)inserumandrenaltissueeasuredbeforeandfivedaysaftergentamicinandmelatonininistered.Renalhistomorphologicalchangesicroscopicallyafterthemiceicininducedacuterenalinjury.Theantioxidativefunctionsofmelaton

5、inmightbeinvolvedintheprotectiveeffects.[KEY)作为氨基糖甙类抗生素,具有抗菌谱广、疗效较可靠、价廉等优点,临床广泛应用于革兰阴性菌、肠球菌及分支杆菌感染治疗[1]。有文献报道应用GM治疗后7d以上有10%~20%病人出现急性肾衰竭[2],增加了治疗风险及治疗成本,极大地限制了GM的应用。因此,对GM肾毒性的机制及防治方法的研究具有重要的临床意义。褪黑素(MLT)是由松果体合成分泌的一种吲哚类神经内分泌激素,具有很强的抗氧化作用。实验研究表明,MLT对毒

6、物或其他因素所致的急性肝、脑损伤有一定的保护作用[3,4]。本实验通过形态学和功能学研究,探讨MLT对GM所致急性肾损伤的保护作用及其可能的机制。1材料与方法1.1动物及分组健康成年组、GM+MLT组、对照(Cont)组,每组8只,雌雄各半。于实验前1周分别将其单独饲养于金属代谢笼中,给以充分的标准饲料、水及自然光。1.2实验方法GM组:每次将GM(青岛国风制药厂提供,批号H37021973)70mg/kg皮下注射,每天2次,共4d;GM+MLT组:GM剂量及注射方法同GM组,在皮下注射GM前给

7、予MLT(由Sigma公司提供)5mg/kg腹腔注射,每天1次,共4d;Cont组:用等量生理盐水代替GM和MLT,分别经皮下和腹腔注射,共4d。分别于注射药物前1d及实验第5天称取并记录每只大鼠的体质量,同时记录24h尿量。实验第5天在收集24h尿液后,行乙醚吸入麻醉摘眼球取血,颈椎离断处死大鼠,解剖取肾,左肾用40g/L的甲醛固定,常规石蜡切片及苏木精伊红染色,右肾用于制备100g/L肾组织匀浆。1.3各指标的检测方法应用全自动生化分析仪分别测定血清中尿素氮(BUN)及肌酐(Cr)的含量。

8、采用南京建成生物工程研究所提供的相应试剂盒检测尿N乙酰βD氨基葡萄糖苷酶(NAG)的活性和血清、肾组织匀浆中丙二醛(MDA)的含量及过氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSHPx)的活性。1.4肾组织形态学观察采用HOUGHTON等[5]的方法观察切片,将病变分为0~4级。0级:肾组织结构无异常;1级:肾小管上皮细胞局灶性颗粒空泡变性,小管腔中出现颗粒状碎屑,有或无小灶状上皮脱落(<1%的肾小管出现上皮脱落);2级:1%~50%的皮质肾小管出现上皮坏死及脱落;3级:>

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