小儿退热贴祛邪作用的实验研究论文

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1、小儿退热贴祛邪作用的实验研究论文【关键词】小儿摘要：目的观察小儿退热贴的祛邪作用，为临床治疗小儿外感发热提供实验依据。方法采用给药清除流感A型病毒感染小鼠体内病毒的方法，观察小儿退热贴对流感A型病毒感染小鼠的存活率、平均存活时间、肺指数及血凝滴度的影响；体外抗流感病毒试验采用MTT法检测病毒抑制率；体外抑菌实验(MIC测定法)观察小儿退热贴对肺克杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型链球菌、肺炎球菌的抑制作用；采用给药治疗葡萄球菌感染小鼠的方法，观察小儿退热贴对葡萄球菌感染小鼠的死亡率的影响。结果小儿退热贴1.04gkg1d1可提高流感病毒A型感染小鼠的

2、存活率、延长其存活时间，肺指数和血凝滴度与病毒对照组相比较具有显著性差异；小儿退热贴在浓度5～1280μg/ml的范围内，随浓度的增加，对流感病毒的抑制率也增加，并表现出量效关系；小儿退热贴含生药量0.83g/ml对肺克杆菌有较强的抑制作用、含生药量0.11g/ml对绿脓杆菌有较强的抑制作用、含生药量0.06g/ml对金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用、对乙型链球菌和肺炎球菌没有抑制作用；小儿退热贴可降低金黄色葡萄球菌感染小鼠的死亡率.freelentalStudyonEliminatingPathogenicEffectsofInfantileUmbil

3、icalPasteAbstract:ObjectiveToprovideanexperimentalevidentforclinicaltreatinginfantilefever,inatingpathogeniceffectsofinfantileumbilicalpaste.MethodsTTmethodtodetectprotectrateofvirusinvitro;Inanotherexperiment,edicineinhibitiontoKlebsiellaPneumoniaebactedostatic，P.aeruginosa,acp

4、ococcus，beta-streptococcus，preumococcusinvitro.uench氏法计算，本实验用流感病毒A型H2N3株TCID50=10-5/0.1ml。结果见表2。表2流感病毒A型H2N3株毒力测定病毒稀释度（略）2.2.2药物毒性测定Vero细胞生长呈单层，将小儿退热贴浸膏倍比稀释，浓度为25.6，12.8，6.4，3.2，1.6，0.8，0.4，0.2，0.1mg/ml，每一稀释浓度重复3次，同时设正常细胞对照，37℃，5%CO2培养，观察CPE，采用MTT法，在培养48h的细胞中，加入含MTT5mg/ml的培养液，0.

5、0lml/孔，继续培养4～6h，加入二甲亚砜(DMSO)，0.1ml/孔，测定570nm波长下的吸光度(A值)。按下列公式计算细胞存活率，并用统计软件SPSSll.5的Probit回归法计算出小儿退热贴浸膏致细胞半数中毒浓度(TC50)。结果见表3。表3小儿退热贴浸膏致Vero细胞病变和细胞存活率的影响观察（略）小儿退热贴浸膏所致Vero细胞的毒性表现为细胞增殖缓慢，胞质颗粒增多，形态改变，折光性增强，但仍可贴壁。实验显示该药毒性仅在浓度＞0.1mg/ml才呈现。MTT比色法测定，按Reed-Muench氏法计算小儿退热贴浸膏TC50为10.22mg/

6、ml(直线回归Y=77.5909-2.65985X)，通过实验可知小儿退热贴浸膏浓度≤0.1mg/ml对细胞生长无明显影响。2.2.3体外抗流感病毒实验Vero细胞生长呈单层于96孔培养板，加入l00TCID50病毒液，0.1ml/孔，37℃、5％CO2吸附1h，弃去病毒液，加入TC50(10.22mg/m1)的1/10倍稀释5个浓度的小儿退热贴浸膏，以4倍倍比稀释，即分别为1280，320，80，20，5μg/ml,并设病毒对照(不加药液)，细胞对照(不加病毒)，受试药物和阳性药物对照组(细胞不加病毒，加相对应不同浓度的药液)。每一浓度重复3次，37

7、℃、5％CO2培养48h，观察细胞病变，记录病变程度，待病毒对照细胞病变达75％以上时为实验终点，用MTT法检测病毒抑制率，按照统计软件SPSS11.5的Probit回归法计算IC50。结果见表4。表4不同浓度小儿退热贴浸膏对A型流感病毒H2N3株的抑制作用项目（略）病毒抑制率=［实验组(药物＋病毒)平均A值病毒对照组平均A值］/(药物组平均A值病毒对照组平均A值)×100％结果表明小儿退热贴浸膏在体外有明显抑制流感病毒的作用，表现在：①病毒性特异性CPE在用药组呈现抑制效应；②随着药物浓度的增加，细胞皱缩、变圆、脱落、碎裂等CPE特征逐渐减弱，病毒的

8、感染性滴度明显下降(病毒抑制率增加)。在浓度5～1280μg/ml的范围内，随着药物浓度的增加