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1、熊果酸通过影响Bax和Bcl 【Abstract】AIM:Tostudytheeffectsofursolicacid(UA)onhumanMCF7cellapoptosisandthemechanismprobablyinvolved.METHODS:MCF7cellsol/L)for24h,apoptoticcellsentednucleiicroscope.AfterMCF7cellstreatedol/L)for24h,subG1peakandcellcycleol/LofUAfor24h,theproteinexpressionofcytochromec,Bcl2andBa
2、xmunofluorescencecellstaining(SABCCy3)andthegreylevelsofimmunofluorescenceoncytochromecandBcl2andBaxent,apoptoticcellsincreaseddosedependentlyandthemorphologicalchangesofMCF7cellsdisplayedmanyhallmarkfeaturesofapoptosis,includingchromatinaggregationandfragmentednuclei.SubG1ratesin0,20and50μmol/L
3、ofUAdetectedbyFCML/LDMSO,50μmol/LofUAsignificantlyincreasedthegreylevelsofBax(59.3±7.8,213.6±7.4,P<0.01),cytochromec(88.2±6.9,188.1±15.4,P<0.01)andthegreyratioofBax/Bcl2(1.0±0.1,2.4±0.4,P<0.01)andincreasednoticeablythegreylevelofBcl2(58.1±6.1,92.1±12.4,P<0.01).Cytochromecinducedby50μ
4、mol/LofUAreleasedintocytoplasm.CONCLUSION:ApoptosisinducedecdependentapoptoticpathaybeapotentialChinesemedicinalponentforbreastneoplasm. 【Keyec 【摘要】目的：探讨中药成分熊果酸（ursolicacid,UA）诱导MCF7人乳腺癌细胞的凋亡作用，并通过分析UA作用后的MCF7细胞Bax,Bcl2,cytochromec蛋白表达的变化，探讨其诱导MCF7细胞凋亡的分子机制.方法：采用细胞培养技术，用0,10,30和50μmol/L的UA处理MC
5、F7细胞24h，用Ho染细胞，在荧光显微镜下观察凋亡细胞的形态变化.用0,20和50μmol/L的UA处理MCF7细胞24h，用PI染细胞，在流式细胞仪上测定细胞周期的变化.用0和50μmol/L的UA处理MCF7细胞24h，采用荧光免疫细胞化学SABCCy3法检测Bax,Bcl2,cytochromec蛋白表达，在荧光显微镜下拍照，用QCF7细胞24h，随着UA浓度增加，在荧光显微镜下出现凋亡细胞增多，细胞呈现典型的凋亡形态学特征，核质浓集和凋亡小体.用0,20和50μmol/L的UA处理MCF7细胞24h，流式细胞仪检测亚G1峰比例分别为0.05,0.22,0.43与对照组5mL/
6、LDMSO比较，50μmol/L的UA使MCF7细胞中的Bax灰度（59.3±7.8,213.6±7.4,P<0.01）和cytochromec灰度（88.2±6.9，188.1±15.4，P<0.01）增加，Bax/Bcl2灰度比值升高（1.0±0.1，2.4±0.4，P<0.01），Bcl2灰度(58.1±6.1,92.1±12.4,P<0.01)稍有增加.UA促进线粒体放释cytochromec进入胞质.结论：UA诱导MCF7细胞凋亡，其机制涉及到Bax/Bcl2比值升高引起线粒体释放cytochromec所依赖的凋亡调节信号通路.表明治疗乳腺癌，UA可能
7、是有效的中药成分. 【关键词】熊果酸；MCF7细胞；细胞凋亡；基因,Bax；基因,Bcl2；细胞色素C类 0 引言 熊果酸（ursolicacid,UA），属三萜类化合物，自然资源丰富.许多研究表明，UA具有诱导多种肿瘤细胞凋亡的作用［1-3］.但UA对MCF7细胞的凋亡作用机制不明，我们以MCF7细胞为材料，应用荧光免疫细胞方法和图像分析技术，探讨UA诱导MCF7细胞凋亡机制. 1材料和方法 1.1材料 人乳腺癌细胞株MCF7引自
