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《自体外周血干细胞与骨基质明胶复合移植治疗兔桡骨缺损的实验研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、自体外周血干细胞与骨基质明胶复合移植治疗兔桡骨缺损的实验研究作者:张小舟 刘秀平 邹三明 王以强 王群涛【摘要】目的观察自体外周血干细胞/骨基质明胶海绵(APBSC/BMG)复合移植治疗骨缺损的疗效。方法36只家兔双侧桡骨做成长度1.2cm的骨缺损,随机分为每组18只。分别进行X线、生物力学以及组织学的对比研究。结果术后第3、6、9、12周,X线观察,改进的Gary评分及光镜观察结果显示,APBSC/BMG组优于BMG组;术后第14周,APBSC/BMG组整骨破坏载荷和骨缺损修复形态学评分均明显优于BMG组。结论APBSC/B
2、MG在BMG的骨形态蛋白诱导下具有明显的成骨作用,因此APBSC/BMG复合移植治疗骨缺损的疗效优于单纯BMG移植。 【关键词】干细胞骨移植骨折愈合 【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectofrepairingsegmentalbonydefectsbythegraftingofautologousperipheralbloodstemcells(APBSC)andbonematrixgelatin,(BMG).Methods36rabbitslyintotadeto1.2cmdefec
3、ts.parativeresearchsadebyX-rays,biomechanicsandhistology.ResultsgroupAisbetterthangroupBbyX-rayobersation,Garyevaluationgradingandobersationresultoftelescope3,6,9,12orphologygrading14oteosteogenesisthroughconductofBMP(bonemorphlogyprotEin)anditisaneethodfortherepair
4、ofbonydefects. 【Keycell;Bonetansplantation;Bonefracturehealing 骨基质明胶(bonematrixgelatin,BMG)是一种临床常用的骨移植材料。我们采用自体外周血干细胞(autologousperipheralbloodstemcell,APBSC)与BMG复合移植修复骨缺损进行了实验研究,本实验取材简单,在实验中进行了X线检查,生物力学试验,组织学检查,效果理想,达到了预期目的,在临床有广阔的应用前景。现报告如下。 1材料和方法 1.1实验材料
5、1.1.1BMG的准备家兔6只,体重2.0~2.5kg,雌雄不限,于耳缘静脉注射10ml空气栓塞处死。取出股骨干,切除两干骺端,剔除附着骨干的软组织及骨膜,刮净髓腔,用生理盐水反复冲洗3遍,经脱脂、脱钙及去除部分水溶性蛋白制成BMG,冻干、C060灭菌备用[1]。术前30min置于生理盐水中。 1.1.2APBSC的采集[2]及APBSC/BMG复合物的制备:家兔术前3天,按50ug/kg体重从耳缘静脉注射粒细胞集落刺激因子(日本ChuGAL制药有限公司),每天1次。手术前从股静脉抽血8mL,先注入干燥的抗凝试管中摇匀,然后
6、缓慢注入含有等量淋巴细胞分离液Ficoll-Paque(Amersham公司)的试管中,用400g速度离心40min后可见试管内分为4层:最上层为淋巴细胞分离液层;第二层为单个核细胞层(不透明,略混浊);第三层为血清层;第四层为红细胞层。用吸管吸出最上层,弃之。吸出第二层注入另厂无菌干燥的试管中,加入等量生理盐水,用相同的速度再离心5min,吸出底层的单个核细胞层,将其注入10ml含1:1000000肝素的生理盐水中,吹打成细胞悬液,把BMG放入上述混合液中留置30min,制成APBSC/BMG复合物备用。 1.2分组与造模
7、健康成年家兔36只,体重2.5~3.5kg,雌雄各半。随机分为2组,每组18只。BMG组(n=18):全麻后双侧前肢各做一2.5cm长的皮肤纵形切口,沿肌间隙分离至桡骨。用骨膜剥离器分开尺骨与桡骨之间的骨间膜,剥离挠骨中段骨膜1.5cm长,锯断1.2cm长,造成骨缺损,将BMG分别移植到两侧骨缺损处。BMG与饶骨近、远端骨干在髓腔各套接0.1cm,不做内固定,逐层缝合,关闭切口。 APBSC/BMG组(n=18):骨缺损造模方法与BMG组相同,将APBSC/BMG复合物分别移植到两侧骨缺损处。BMG与桡骨近、远端骨干在髓腔各
8、套接0.lcm。将剩余的混合液约0.4mL抽出,分别注入两侧BMG髓腔内,不做内固定,逐层缝合,关闭切口。 1.3检查方法术后第3、6、9、12周每组动物先行X线检查,其申术后第3、6、9周每组各取2只动物进行组织学检查。术后第12周所有剩余动物X线检查后,生物力学检查,最