egr1基因剔除对雨蛙素诱导小鼠胰腺炎的影响

《egr1基因剔除对雨蛙素诱导小鼠胰腺炎的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、Egr1基因剔除对雨蛙素诱导小鼠胰腺炎的影响　　【Abstract】AIM:TostudytheroleofEgr1intheinitiationofacutepancreatitis.METHODS:Experimentalpancreatitisiceamylaseandmyeloperoxidase(MPO)activitieseasured.Thehistologyofpancreasandlungicroscopy.RESULTS:Theiceamylasesice.Hoiceice［（168.1±41.7）%vs(274.0±98.7%),P<0.05］.InEg

2、r1knockoutmice,thehistologicalappearanceinpancreasandlungimproved,thoughsomevacuolesinacinarcellsandlightedemainpancreasageisamelioratedinEgr1knockoutmicestimulatedbyhighdosageofcearulein,suggestingthatEgr1isoneoftheimportantfactorsintheinitiationofacutepancreatitis.　　【Keyice,knockout　　【摘要】目的：

3、探讨Egr1在实验性胰腺炎发病中的作用.方法：利用Egr1基因剔除小鼠，采用大剂量雨蛙素诱导的实验性胰腺炎模型，观察Egr1基因剔除后，胰腺组织水肿，组织髓过氧化物酶（MPO）水平，血清淀粉酶水平，肺组织MPO水平，以及胰腺与肺组织学改变.结果：与野生型相比，Egr1基因剔除小鼠胰腺组织水肿明显减轻［（166.0±13.5）%vs(132.3±17.7)%,P<0.05］，但组织MPO水平与血清淀粉酶与野生型组间相比无明显改变；肺组织MPO水平与野生型组相比明显降低［（168.1±41.7）%vs（274.0±98.7）%,P<0.05］.在组织学上，Egr1基因剔除组

4、胰腺和肺组织学明显改善，但胰腺腺泡仍有空泡变性及轻度肿胀.结论：Egr1基因剔除可明显减轻实验性胰腺炎胰腺和肺组织的损伤.　　【关键词】急性病；胰腺炎；早期生长反应因子1；小鼠，基因敲除　　0引言　　前炎性转录因子及炎性因子在急性胰腺炎的发生和发展中有重要作用.其中，核转录因子κB(nuclearfactorκB,NFκB)及其靶因子的研究加深了人们的认识［1-4］.核转录因子早期生长反应因子1(earlygrool/L的氯化钠离心得上清，再将上清中入预冷的乙醇中，其沉淀物即基因组DNA.基因型鉴定用常规PCR方法，引物为：egr1上游5′AACCGGCCCAGCAAGACC3′，

5、下游5′GGGCACAGGGGATGGGAATG3′产物片段400pb；neo基因：5′CTCGTGCTTTACGGTATCGC3′，和egr1上游引物一起使用，产物片段420bp.　　1.2方法　　小鼠（雌雄不拘，22～26g）在实验前禁食24h，但可自由饮水.雨蛙素（cearulein，Sigma）溶于生理盐水中(50g/L),ip［50μg/(kg・h）］5h诱导实验性胰腺炎结束时，用乙醚麻醉后剪开胸腔，抽取心内血液，并取少量肺组织.然后，剪开腹腔，显露胰腺组织，小心剪下放入预冷的中性PBS液（pH7.4）中，并剔除脂肪.一部分固定于中性100g/L的多聚甲醛，

6、其它放入液氮中冷冻后，-70℃保存.血液离心后取血清，分装后-70℃保存.正常对照组（control,Con）小鼠注射同体积的生理盐水.实验分正常对照组，野生型雨蛙素组（PO）、组织含水的比率的检测，以及组织学检查参考文献［3］进行.其中酶活性和含水量，均为与对照的百分比来表示.　　　　统计学处理：数据均用(x±s)表示.用SSPS10.0软件F检验对数据进行分析.　　2结果　　大剂量的雨蛙素可明显引起胰腺炎，胰腺组织表现为急性水肿、组织间隙增宽，胰腺腺泡细胞明显肿胀，少数细胞表现为空泡变性（Fig1A），而正常对照组胰腺组织在组织学上没有明显的改变（Fig1B）.在组织学上，KO

7、组（Fig1C）无明显水肿，组织间隙无明显增宽，其组织水肿与正常对照组相比也无明显的差异.但是，胰腺腺泡细胞仍轻度肿胀及空泡变性，并可见少量炎性细胞的浸润.血清淀粉酶［(624.9±24.3)%］、组织MPO［(235.3±64.5)%］和组织含水量(166.0±13.5)%在PO［(235.0±49.6)%］与PO的检测（Fig2D）也表明，PO水平也明显增高.结果提示，Egr1基因剔除，可以明显减轻实验性胰腺炎肺组织的炎症.　　虽然Egr1基因剔除不能完全减轻胰腺