egr1基因剔除对雨蛙素诱导小鼠胰腺炎的影响

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1、Egr1基因剔除对雨蛙素诱导小鼠胰腺炎的影响段佑才,姜泊,智发朝,宋于刚,陈学清【关键词】急性病KnockoutEgr1amelioratescearuleininducedpancreatitisinmice　　【Abstract】AIM:TostudytheroleofEgr1intheinitiationofacutepancreatitis.METHODS:Experimentalpancreatitisiceamylaseandmyeloperoxidase(MPO)activitieseasur

2、ed.Thehistologyofpancreasandlungicroscopy.RESULTS:Theiceamylasesice.Hoiceice〔（168.1±41.7）%vs(274.0±98.7%),P0.05〕.InEgr1knockoutmice,thehistologicalappearanceinpancreasandlungimproved,thoughsomevacuolesinacinarcellsandlightedemainpancreasageisamelioratedinE

3、gr1knockoutmicestimulatedbyhighdosageofcearulein,suggestingthatEgr1isoneoftheimportantfactorsintheinitiationofacutepancreatitis.　　【Keyice,knockout　　【摘要】目的：探讨Egr1在实验性胰腺炎发病中的作用.方法：利用Egr1基因剔除小鼠，采用大剂量雨蛙素诱导的实验性胰腺炎模型，观察Egr1基因剔除后，胰腺组织水肿，组织髓过氧化物酶（MPO）水平，血清淀粉酶水平，肺组

4、织MPO水平，以及胰腺与肺组织学改变.结果：与野生型相比，Egr1基因剔除小鼠胰腺组织水肿明显减轻〔（166.0±13.5）%vs(132.3±17.7)%,P0.05〕，但组织MPO水平与血清淀粉酶与野生型组间相比无明显改变；肺组织MPO水平与野生型组相比明显降低〔（168.1±41.7）%vs（274.0±98.7）%,P0.05〕.在组织学上，Egr1基因剔除组胰腺和肺组织学明显改善，但胰腺腺泡仍有空泡变性及轻度肿胀.结论：Egr1基因剔除可明显减轻实验性胰腺炎胰腺和肺组织的损伤.　　【关键词】急性病

5、；胰腺炎；早期生长反应因子1；小鼠，基因敲除　　0引言　　前炎性转录因子及炎性因子在急性胰腺炎的发生和发展中有重要作用.其中，核转录因子κB(nuclearfactorκB,NFκB)及其靶因子的研究加深了人们的认识〔1-4〕.核转录因子早期生长反应因子1(earlygrool/L的氯化钠离心得上清，再将上清中入预冷的乙醇中，其沉淀物即基因组DNA.基因型鉴定用常规PCR方法，引物为：egr1上游5＇AACCGGCCCAGCAAGACC3＇，下游5＇GGGCACAGGGGATGGGAATG3＇产物片段400

6、pb；neo基因：5＇CTCGTGCTTTACGGTATCGC3＇，和egr1上游引物一起使用，产物片段420bp.　　1.2方法　　小鼠（雌雄不拘，22～26g）在实验前禁食24h，但可自由饮水.雨蛙素（cearulein，Sigma）溶于生理盐水中(50g/L),ip〔50μg/(kg・h）〕5h诱导实验性胰腺炎结束时，用乙醚麻醉后剪开胸腔，抽取心内血液，并取少量肺组织.然后，剪开腹腔，显露胰腺组织，小心剪下放入预冷的中性PBS液（pH7.4）中，并剔除脂肪.一部分固定于中性100g/L的多聚甲醛，其它

7、放入液氮中冷冻后，-70℃保存.血液离心后取血清，分装后-70℃保存.正常对照组（control,Con）小鼠注射同体积的生理盐水.实验分正常对照组，野生型雨蛙素组（PO）、组织含水的比率的检测，以及组织学检查　　3讨论　　我们利用Egr1基因剔除小鼠，对Egr1在急性胰腺炎中的作用探讨发现，在雨蛙素诱导的胰腺炎模型中，Egr1基因剔除可明显减轻胰腺组织的水肿，表明Egr1对TF有调节作用〔5〕.Egr1基因剔除对于组织MPO及血清淀粉酶无明显影响.由于NFκB是急性胰腺炎炎症的重要调节因子〔3〕，而且胰腺

8、炎发生时胰酶本身对于胰腺组织的可能的直接损伤作用，所以，我们认为胰腺本身的炎症和损伤在很大程度上可能与NFκB和胰腺激活有关〔7〕.我们的结果提示，NFκB和胰酶的激活在对胰腺组织直接损伤方面可能起着较为重要的作用.　　虽然Egr1基因剔除不能完全减轻胰腺腺泡细胞损伤，但可明显减轻肺组织的损伤.以前的研究表明，如果减少炎症因子如ICAM1，C5a在肺组织中的表达〔2,8〕，可明显减轻肺组织的炎性浸润.所以，肺组织