正文描述:《三叶斑潜蝇热激蛋白hsp90基因的克隆及其在高温胁迫下的表达分析》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、2013,39(5):110-116PlantProtection研究报告ResearchReports三叶斑潜蝇热激蛋白Hsp90基因的克隆及其在高温胁迫下的表达分析吉青战1,2,王海鸿1*,雷仲仁1,张靠稳2*,王娇1,2,张烨1(1.中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100193;2.北方民族大学,银川750021)摘要采用RT-PCR及RACE技术克隆了三叶斑潜蝇Hsp90基因全长cDNA序列,并用实时定量RT-PCR的方法检测其在不同发育阶段受到高温胁迫后的表达水平。该基因的cDNA序列全长2408bp,开放阅读框为2145bp,编
2、码714个氨基酸;5′非编码区为151bp,3′非编码区为112bp。该基因推导的氨基酸序列与其他昆虫同源序列比较有很高的相似性(80%~99%)。聚类分析结果显示三叶斑潜蝇与美洲斑潜蝇和南美斑潜蝇的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR检测结果表明三叶斑潜蝇Hsp90基因的表达受到热胁迫的诱导,诱导3龄幼虫最大表达量的温度比诱导其他发育阶段的温度低,在43℃时预蛹和蛹的表达量在整个生命周期中最高,在检测的高温胁迫条件下,雄虫比雌虫的表达量更高。该结果为阐明三叶斑潜蝇胁迫耐受能力及其对其他潜蝇种群的取代机制奠定了分子基础。关键词三叶斑潜蝇;Hsp90基因;热胁迫;表达中图分类号:
3、S433.89文献标识码:ADOI:10.3969/j.issn.0529-1542.2013.05.015Cloningandexpressionofheatshockprotein90geneinrelationtoheatstressintheleafminer,Liriomyzatrifolii1,2,WangHaihong1,LeiZhongren1,ZhangKaowen2,WangJiao1,2,ZhangYe1JiQingzhan(1.StateKeyLaboratoryforBiologyofPlantDiseasesandInsectPests,Inst
4、ituteofPlantProtection,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijing100193,China;2.BeifangUniversityofNationalities,Yinchuan750021,China)AbstractAfull-lengthcDNAencodingheatshockprotein90(Hsp90)wasclonedfromLiriomyzatrifoliiusingRT-PCRandRACEmethods,andtheexpressionlevelsofthisgeneinrelatio
5、ntohightemperaturestressduringdifferentdevelopmentalstageswereinvestigatedusingreal-timequantitativePCR(qRT-PCR).ThecDNAis2408bpinlength,containinganopenreadingframe(ORF)of2145bp,encoding714aminoacidresidues,witha5′untranslatedregion(UTR)of151bpanda3′UTRof112bp.Clusteranalysisconfirmedthat
6、thededucedaminoacidsequencesharedhighidentitywiththereportedhomologoussequencesfromotherinsects(80%-99%).EvolutionresultsshowedthegeneticrelationofL.trifoliiwasmoreclosetothatofL.sativaeandL.huidobrensis.qRT-PCRanalysisshowedthatexpressionofHsp90genecouldbeinducedbyheatstress.Themaximumofi
7、nductivetemperatureofthethirdinstarlarvaewaslowerthanthatofotherdevelopmentalstages.Geneexpressionattainedthemaximumatthestageofprepupaandpupaat43℃.Higherexpressionlevelwasob-servedinmalethaninfemalewhenexposuretoheatstresstested.Ourresearchprovidedawayforward
显示全部收起
温馨提示:
1. 部分包含数学公式或PPT动画的文件,查看预览时可能会显示错乱或异常,文件下载后无此问题,请放心下载。
2. 本文档由用户上传,版权归属用户,天天文库负责整理代发布。如果您对本文档版权有争议请及时联系客服。
3. 下载前请仔细阅读文档内容,确认文档内容符合您的需求后进行下载,若出现内容与标题不符可向本站投诉处理。
4. 下载文档时可能由于网络波动等原因无法下载或下载错误,付费完成后未能成功下载的用户请联系客服处理。