GBT 19427-2003 蜂胶中芦丁、杨梅酮、榭皮素、灰菲醇

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1、GB/T19427-2003.JJ曰~J-月9台本标准的附录a和附录s为资料性附录。本标准由中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局提出。本标准由中华全国供销合作总社归口。本标准起草单位:中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局。本标准主要起草人:庞国芳、李学民、张进杰、曹彦忠、范春林、贾光群。本标准系首次发布的国家标准。GB/T19427-2003蜂胶中芦丁、杨梅酮、榭皮素、灰菲醇、芹菜素、松属素、苛因、高良姜素含量的测定方法液相色谱一串联质谱检测法和液相色谱一紫外检测法范围本标准规定了蜂胶中芦丁、杨梅酮、懈皮素、获菲醇、芹菜素、松属素、苛因、高良姜素含量的液相色谱一串联质谱和液相色谱测

2、定方法本标准适用于蜂胶中芦丁、杨梅酮、枷皮素、茨菲醇、芹菜素、松属素、苛因、高良姜素含量的测定本标准液相色谱一串联质谱法的检出限:芦丁为0.15g/kg;杨酶酮为。.050g/kg;懈皮素、高良姜素为。.025g/kg;茨菲醇、芹菜素、松属素、苛因为。.0060g/kg,液相色谱法的检出限:杨梅酮、茨菲醇、芹菜素、苛因为0.10g/kg;芦丁、懈皮素、松属素、高良姜素为。20g/kge2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使

3、用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GB/T6379测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重现性和再现性(GB/丁6379-1986,neqISO5725:1981)GB/T6682分析实骑富用水规格和试聆方法(GB/T6682-1992,ne(iISO3696:1987)原理甲醇溶解试样,反相液相色谱柱分离黄酮化合物,八种黄酮化合物用液相色谱一串联质谱仪测定或用高效液相色谱紫外检测器测定,外标法定量。4试荆和材料除另有说明外,所用试剂均为优级纯,水为GB/T6682规定的一级水。4.1甲醇:色谱纯。4.2磷酸。4.3甲醇+水(1+1)

4、:量取50mL甲醇与50mL水混合。4.4芦丁、杨梅酮、棚皮素、获菲醇、芹菜素、松属素、苛因和高良姜素标准物质:纯度)99%.4.5芦丁、杨梅酮、榭皮素、获菲醇、芹菜素、松属素、苛因和高良姜素标准储备溶液:准确称取适量的每种标准物质(4.4),用甲醇(4.1)配制成浓度为。.10mg/mL的混合标准储备溶液。4.6芦丁、杨梅酮、撇皮素、获菲醇、芹菜素、松属素、苛因和高良姜素标准工作溶液:根据需要用甲醇(4.1)和甲醇+水(4.3)将标准储备溶液(4.5)分别稀释成适当浓度的标准工作溶液。5仪器5.1液相色谱一串联质谱仪:配有电喷雾离子源。5.2高效液相色谱仪:配有紫外检测器。GB/

5、T19427-20035.3温度可调超声波水浴。5.4注射过滤器:容积为3MI或5mL,并带有。,45ym过滤膜5.5微量注射器:25川。6分析步骤6.1试样溶液的制备称取。1g--0.2g试样,精确到0.001g,置于50ml,容量瓶内,加入40mL甲醇,在60℃的超声波水浴中,振荡40min,待样品完全溶解后,取出冷却至室温然后用甲醉定容至50mL^-100mL,摇匀。用注射过滤器将试样溶液过滤至样品瓶内,摇匀后,供液相色谱仪测定。过滤的样液取1MI,与1ml,水混合后,供液相色谱一串联质谱仪测定。6.2测定6.2,1液相色谱条件6.2.1.1串联质谱法a)色谱柱:Mighty

6、silRP-183}cm150mmX4.6mm(内径)或相当者;b)流动相:甲醇+水(65-1-35),用磷酸(4.2)调节流动相至pH=3;c)流速:0.3ml-/min;d)进样量:20pL.62.12萦外检测法a)色谱柱:MightysilRP-183ICm150mmX4.6mm(内径)或相当者:b)流动相:甲醇+水〔58+42),用磷酸(4.2)调节流动相至pH=3;c)流速:0.7MI./min;d)检测波长:270nm;e)进样量,10川6.2.2质谱条件a)扫描方式:正离子扫描;b)检测方式:多反应检测;c)电喷雾电压:4000V;d)化气压力:0.055MPa;e)

7、气帘气压力:0.069MPa;f)辅助气流速:6L/rnin;9)离子源温度:380"C;h)去簇电压:100v;i)定性离子对、定量离子对和碰撞气能量,见表19表1八种黄酮化合物的定性离子对、定量离子对、碰撞气能量和去簇电压GB/T19427-20036.2.3测定6.2.3.1液相色谱一串联质谱检测法测定用芦丁、杨梅酮、懈皮素、豉菲醇、芹菜素、松属素、苛因、高良姜素标准储备溶液配成的混合标准工作溶液(4.6)分别进样,以标准工作溶液浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,

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