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时间:2020-12-21
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1、湖北大学生命科学学院生物化学实验报告不同水果中维生素C的含量比较(间接碘量法)杨勇2014级生物技术产业班2015/5/19一.实验目的1.掌握间接碘量法测定维生素C的原理和方法;2.了解维生素C的功能及测定意义;3.了解不同水果中的维生素C的含量,给维生素C的摄入提供有价值的建议;二.实验原理维生素C又称作抗坏血酸。在1928年,从牛的肾上腺皮质质中提取出来的结晶物质,证明对治疗和预防坏血病有特殊功效,因此称作抗坏血酸。维生素C,六碳多羟基,酸性化合物,白色针状结晶,有酸味,可溶于水。在弱酸性条件下,可被碘氧化为脱氢抗坏血酸。维生素C的分子式为C6H8O6,
2、分子量为176,分子中的烯二醇基具有还原性,易被氧化为烯二酮基。碘溶液具有氧化性质,可以用标准碘溶液对维生素C进行直接滴定和间接滴定,本实验,我们采用间接滴定法,测定不通水多种水果中的维生素C的含量。反应1.C6H8O6+I2=C6H6O6+2HI;反应2.I2+2Na2S2O3=Na2S4O6+2NaI三.实验器材1.实验仪器:组织搅碎机、容量瓶(50ML)(四只)、电子分析天平、锥形瓶(100ML)(四只)、酸式滴定管、胶头滴管、漏斗(四只)、滤纸、移液枪(带移液枪头)、烧杯(四只)2.实验试剂:2%草酸溶液、1%草酸溶液、0.5%淀粉溶液、2mol/L醋
3、酸溶液、0.01mol/L标准碘溶液、0.01mol/L标准Na2S2O3溶液、新鲜水果(苹果、橙子、柚子、香蕉)四.实验步骤1.提取样品:将新鲜水果用水洗净,用纱布或者吸水纸拭去表面的水。然后各称取20.0g,加2%草酸100ML置于组织搅碎机中打成浆状。然后各称取桨状物5.0g,倒入50ML容量瓶中以2%的草酸溶液稀释到刻度(若浆状物中泡沫较多,可以加入数滴辛醇或者丁醇)。静置10min,过滤(最初的数ML不要)。过滤液体备用。2.完全反应;取四只干净的锥形瓶,分别标上序号或者字样,再分别取过滤试样2.0ML到50ML锥形瓶中,加入9ML1%草酸溶液,加入
4、2mol/L的醋酸溶液2~3ML(调节溶液的ph为5-6弱酸性),然后每个锥形瓶中加入10ML标准碘液,将每个锥形瓶都摇匀,静置1min,待滴定;1.样品滴定:静置后,用0.01mol/L的Na2S2O3溶液滴定溶液中剩余的碘,滴定到浅黄色时,加入2-3滴0.5%淀粉溶液作为指示剂,然后继续滴定到蓝色消失,并且在30s内溶液不变色,此时即为滴定终点,记录下每一组的实验数据,完成下面的表格(表-1)。2.计算。根据实验数据计算每种水果中维生素C的含量(mg/100g)。3.实验分析和评估4.实验小组讨论(为摄入适量维生素C提出有价值的意见)五.数据记录表-1不同
5、水果中维生素C的含量测定苹果橙子梨子香蕉样品过滤液/ml1.01.01.01.01%草酸/ml9.09.09.09.0标准碘溶液/ml10.010.010.010.0滴定前示数0000滴定后示数8.02.410.83.6消耗标准0.01mol/lNa2S4O6溶液8.02.410.83.6维生素C含量(mg/100g)4.87.63.47.0六.计算m=(v1*c1-v2*c2/2)*M*25*100/1000mo式中m:100g水果样品中抗环血酸的含量(mg);V1:样品溶液中加入的标准碘溶液的体积(ML);C1:标准碘溶液的浓度(mol/L);V2:滴定溶
6、液中剩余碘消耗的标准Na2S2O3溶液的体积(ML);C2:标准Na2S4O6溶液的物质的量浓度(mol/L);25:稀释倍数25;M:维生素C的摩尔质量;100:水果样品100g;m0:所取水果样品匀浆质量为m0=5.0g;1000:将最终的单位统一为升;2:单质碘和硫代硫酸钠的反应关系为,I2—2Na2S2O3七.实验信息搜集水果种类维生素的含量(mg/100g)苹果5.0梨子4.0香蕉8.0-10.0橙子33.0八.实验分析与思考1.1.维生素C属于不稳定维生素,尤其是在溶液状态下,容易被热、碱、氧和光破坏,在酸性条件下较为稳定。提取维生素C应该迅速,以
7、防样品暴露于空气中被氧化破坏。2.滴定速度应该迅速,并且要注意碘的挥发性。3.有的水果细胞色素对滴定实验可能造成干扰,可以使用一定的脱色剂,再加入指示剂方面,要把握好时机,判断滴定终点要准确。4.本次试验中,我们所用到的实验试剂均为本组成员自己配制的,在配制过程中,也出现了一些不足或者缺陷,例如,配置溶液,没有是固体完全溶解就进行定容;在提取样品进行过滤时,没有严格静置10min,也没有完全过滤水果匀浆;滴定只进行了一次,没有进行平行滴定以减小偶然误差等;5.在设计实验时,也存在考虑不周方面,经过查阅资料获知100g橙子中的维生素含量大约为33mg,而在设计实
8、验时,将标准碘的加入量定位为10ML,
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