酵母双杂交系统技术介绍

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3、creeningSystem（630491）酵母双杂交-蛋白与蛋白的相互作用Matchmaker™GoldYeastTwo-HybridSystem（630489）Makeyourown“Mate&Plate™”librarySystem(630490)酵母三杂交—三个蛋白之间的相互作用pBridgeThree-HybridVector（630404）16June20217酵母双杂交系统技术介绍背景介绍:MatchmakerGold系统原理ReporterGene酵母单杂交酵母双杂交酵母三杂交1

4、6June20218酵母双杂交系统技术介绍ReporterGeneReporterGene主要内容酵母双杂交的背景介绍酵母双杂交的基本原理Clontech酵母双杂交系统常见问题分析16June20219酵母双杂交系统技术介绍基本原理:酵母双杂交参考文献Nature.1989Jul20;340(6230):245-6.Anovelgeneticsystemtodetectprotein-proteininteractions.FieldsS,SongO.DepartmentofMicrobiolo

5、gy,StateUniversityofNewYorkatStonyBrook,StonyBrook11794.28000次引用16June202110酵母双杂交系统技术介绍基本原理:GAL4转录因子的结构ADDNA-BDGAL4蛋白具有两个功能结构域BD结合结构域AD激活结构域16June202111酵母双杂交系统技术介绍基本原理:GAL4转录因子的分子机理在GAL4based双杂交系统中:正常情况在酵母细胞内PromotergalmetabolicgeneGALUASTranscriptio

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8、ch蛋白互作相关试剂盒文库筛选文库构建酵母双杂交系统：630489酵母菌转化试剂盒：630439酵母培养基（套装）：630495插入片段检测：630497酵母质粒提取：630467体内验证：630489630305体外Co-IP验证：63045863045963172363160416June202117酵母双杂交系统技术介绍文库构建:ClontechMM文库构建方法SMART合成cDNA共转化，涂板培养，收集菌液文库分装，冻存1mlmatingAAAAAAAAATTTTTTTTCCCAAAAA