肉鸡中沙门菌污染监测.doc

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1、肉鸡中沙门菌污染监测[摘要]目的对肉鸡养殖和屠宰环节进行沙门菌监测，确定肉鸡在养殖和屠宰环节中沙门菌的污染状况，分析肉鸡中沙门菌的污染来源，为食品安全风险评估提供基础数据，同时也为预防和控制由沙门菌起的食源性疾病提供科学依据。方法在四川省成都市、遂宁市选取肉鸡养殖场和屠宰场作为监测点。采集肉鸡活体肛拭、养殖场环境样本，肉鸡胴体，屠宰场环境样本进行沙门菌分离，并对检出菌株运用脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行分子分型，用微量肉汤稀释法进行14种抗生素药物敏感实验。结果共从2个肉鸡屠宰场和1个肉鸡养殖场采集样本417份，检出沙门菌12株

2、，检出率为2.87%。通过PFGE分型，共得到4个带型。其中遂宁养殖场的1株环境分离株和遂宁屠宰场的3株肉鸡胴体分离株具有相同PFGE型别，成都屠宰场的2株环境分离株和该屠宰场4株肉鸡胴体分离株具有相似PFGE型别。遂宁分离的4株沙门菌对14种抗生素100%敏感。成都分离的8株沙门菌对14抗生素耐药程度各异,其中4株沙门菌能耐受3种以上药物。结论四川省部分地区肉鸡在养殖和屠宰环节存在沙门菌污染，且有多重耐药菌株出现，应进一步加大监测力度。沙门菌是引起食源性疾病的常见致病菌之一。在自然界沙门菌分布广泛,主要由于食入污染食品,引起感

3、染性腹泻。在全球范围内沙门菌引起的细菌性食物中毒都位居前列[1,2]，并且呈现上升趋势。在我国导致细菌性食物中毒的致病菌中沙门菌位居首位[3]。鸡肉作为沙门菌污染的主要食物之一[4]，监测肉鸡中沙门菌的来源、污染和耐药状况,对因肉鸡沙门菌污染导致食物中毒的风险评估和预防、控制、治疗沙门菌引起的食物中毒具有非常重要的意义。近年来养殖中抗生素的过度和不正确使用导致动物中分离到耐药沙门菌的情况越来越普遍，且多重耐药的沙门菌也多有报道[5]。降低沙门菌对食品的污染是控制沙门菌食源性疾病的总要途径之一。通过溯源找出并消除污染源是防治沙门菌

4、污染的有效手段。基于脉冲场凝胶电泳（pulsed-fieldgelelectrophoresis，PFGE）的细菌分子分型技术已被多个国家用于建立了细菌分子分型网络及溯源平台（PulseNet，Foodnet），并以此分析食源性致病菌来源和传播[6]。现今PFGE已被认为是沙门菌食物中毒的溯源分析的金标准。根据“2010年国家食品安全风险监测-肉鸡沙门氏菌专项监测”,在四川省内选取养殖场和屠宰场作为监测点,以肉鸡活体和屠宰后胴体作为监测对象开展监测工作，监测肉鸡在饲养和屠宰过程中沙门菌的污染状况，利用PFGE分子分型分析沙门菌的

5、污染来源和扩散途径，检测肉鸡中沙门菌的耐药状况。为四川省沙门菌风险评估供可靠的基础数据，同时为预防和控制由沙门菌起的食源性疾病提供科学依据。1材料与方法1.1监测点的设立根据“国家食品安全风险监测-肉鸡沙门氏菌专项监测”要求，分别选取遂宁市规范化肉鸡养殖加工企业的养殖场和屠宰场及成都市1大型屠宰场进行样本采集。监测养殖和屠宰前活鸡体内和屠宰后鸡胴体沙门菌带菌状况，及养殖场和屠宰场环境中沙门菌污染状况。1.2样品采集监测点样本采集按照“国家食品安全风险监测-肉鸡沙门氏菌专项监测”提供方法。鸡活体肛拭采集是将拭子轻轻旋转插入鸡肛门内

6、约3～4cm处，紧靠肠壁表面黏液后退出后迅速插回拭子管内并拧紧螺帽。鸡胴体采集是采集屠宰后深加工之前的胴体鸡。养殖场中采取活鸡肛拭，养殖场环境样本为采取多份鸡场地面土壤和鸡笼各部位表面涂抹拭子于同一采样袋中作为1份环境混合样本。屠宰场先采取屠宰前活鸡肛拭，再在屠宰后采取胴体鸡，单独包装冷藏送回实验室检验，屠宰场环境样本为宰场台面各部位涂抹拭子和各种用具涂抹拭子于同一采样袋中作为1份环境混合样本。养殖场中采集鸡活体肛拭45份，鸡养殖场环境样本3份。屠宰场中采集鸡活体肛拭171份，鸡胴体176份，屠宰场环境样本12份。1.3菌株分离

7、和鉴定样品处理按照“食品安全风险监测-肉鸡沙门氏菌专项监测”提供方法。沙门菌分离鉴定参照《食品微生物学检验沙门氏菌检验》(GB4789.4-2010)。疑似菌株生化鉴定采用全自动细菌生化鉴定仪(VITEK32)。血清分型采用泰国S＆A公司诊断血清。1.4药物敏感实验分离得到的沙门菌用微量肉汤稀释法检测最低抑菌浓度(MIC)。结果判定依照《抗微生物药物敏感性试验执行标准》2010版(M100-S20)判定,质控菌株ATCC25922来源于中国CDC营养与食品安全所。1.5沙门菌PFGE分型分析1.5.1PFGE分型沙门菌PFGE按

8、照中国疾病预防控制中心推荐的PlusNet的PFGE标准方法进行[6]，标准菌株H9812来源于中国细菌性传染病分子分型实验室，电泳以H9812/XbaI为Marker。取新鲜琼脂培养物均匀悬浊于3ml细胞悬液(100mMTris-HCL，100mMEDTA，p