肉鸡沙门氏菌的分离鉴定及药敏试验_王傲雪 (1)

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1、中国畜牧兽医２０１３年第４０卷第７期疾病防治·１６７·肉鸡沙门氏菌的分离鉴定及药敏试验王傲雪１，２，张凌云２，张桉潮３，李昆鹏２．４，张秀丽２，梁晚枫１，张林波２（１．延边大学，吉林延吉１３３０００；２．吉林农业大学，吉林长春１３０１１８；３．吉林正大实业有限公司，吉林长春１３００３３；４．中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京１００１９３）摘要：为了解吉林省某地鸡源性沙门氏菌的感染及耐药情况，对该地７个肉鸡场１５０份病鸡组织样品进行细菌分离，并进行了血凝试验、致病性试验和药敏试验。分离得到２６株沙

2、门氏菌，经血凝鉴定有１９株呈阳性，其中５株呈强阳性并均能使雏鸡致死。药敏试验结果显示，该５株沙门氏菌对头孢噻肟较为敏感；对氨苄西林、替米考星、林可霉素、阿奇霉素和头孢拉定表现出极高的耐药性，耐药率高达１００％；诺氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、强力霉素和氯霉素５种临床用药与痢菌净不具有协同或累加作用。试验结果表明，沙门氏菌是危害该地肉鸡养殖场的主要病原菌之一，且耐药性十分严重。关键词：沙门氏菌；分离鉴定；药敏试验中图分类号：Ｓ８５２．６１＋４文献标识码：Ａ文章编号：１６７１－７２３６（２０１３）０７－０

3、１６７－０４禽沙门氏菌病（ａｖｉａｎｓａｌｍｏｎａｌｌｏｓｉｓ）是由１种限公司。或多种沙门氏菌引起的禽类急性或慢性传染病的总１．１．３沙门氏菌属诊断血清沙门氏菌Ａ～Ｆ群称，已被国际兽疫局列为Ｂ类传染病（廖成水等，“Ｏ”多价诊断血清购于中国生物技术集团公司兰州２０１０）。沙门氏菌是影响食品安全的致病菌之一，广生物制品研究所，批号：２０１００１０１。泛存在于自然界和温血动物体内，是一种重要的人１．１．４试验药物头孢噻肟、头孢唑啉、头孢拉定、兽共患性病原菌。随着中国集约化养鸡业的发展，庆大霉素、恩诺沙星、

4、强力霉素、奥复星和卡那霉素病毒性传染病依靠良好的疫苗和完善的免疫程序基８种药敏纸片均购自杭州微生物试剂有限公司，批本得到控制，而细菌性传染病日趋严重，难以防制，号１０１２２３；硫酸庆大霉素、阿莫西林、头孢曲松、诺使得极易形成耐药性的沙门氏菌的流行愈演愈烈氟沙星、痢菌净、阿米卡星、泰勒菌素、阿奇霉素、壮（申之义等，２００１）。虽然抗生素的应用对控制和预观霉素、新霉素、左旋氧氟沙星、林可霉素、呋喃唑防沙门氏菌病发挥了巨大的作用，然而随着抗菌药酮、泰妙菌素、替米考星、复方新诺明、沙拉沙星、磷物的滥用及不当

5、使用，沙门氏菌病的耐药性日趋严霉素、黏杆菌素、青霉素、氯霉素、阿奇霉素、甲硝唑、重，加强对该菌耐药性的监测力度和耐药机制的研环丙沙星、氨苄西林、左旋氧氟沙星及培氟沙星２７究迫在眉睫（邓树轩等，２００７）。鉴于此，作者对吉林种药敏纸片按ＷＳ／Ｔ１２５－１９９９纸片法抗菌药物敏省某地鸡源沙门氏菌病进行了病原菌的分离、鉴定感试验标准生物制药实验室自制，密封低温保存备及药敏试验，为临床兽医选择和使用抗菌药物提供用；青霉素钾购自江苏南农高科动物药业有限公司。参考。１．１．５试验动物１日龄健康ＡＡ＋雏鸡由德惠市

6、１材料与方法种鸡场提供。１．１材料１．２方法１．１．１病料来源２０１０年４月—２０１０年５月收１．２．１病料采集病料来源于发病地区，病鸡临床集的１５０份来自吉林省某地７个规模鸡场疑似患沙症状表现为精神萎顿，畏寒不愿走动，同时腹泻排白门氏菌病的病料。色浆糊状稀便，泄殖腔周围羽毛污染，将其处死并剖１．１．２培养基ＨＥ营养琼脂培养基、ＳＳ营养琼检取其肺脏、心脏、肝脏、脾脏和肠，于－２０℃保存脂培养基和三糖铁琼脂（ＴＳＩ）均购自青岛某技术有备用。１．２．２沙门氏菌的分离鉴定在实验室无菌条件收稿日期：２０１２

7、－１２－２５下将病料组织划线接种于ＨＥ营养琼脂培养基和作者简介：王傲雪（１９８６－），女，吉林人，硕士生，研究方向：鸡病ＳＳ营养琼脂培养基，置３７℃培养１８～２０ｈ后观研究与防治。通信作者：张林波（１９７３－），男，吉林人，博士生导师，教授，从事察，挑取直径约０．５ｍｍ的小菌落进行革兰氏染色，免疫学研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｃｚｌｂ＠１６３．ｃｏｍ革兰氏阴性、大多单个存在或有少量成对排列的小·１６８·疾病防治中国畜牧兽医２０１３年第４０卷第７期杆菌为可疑落菌，按照Ｉｃｇｅｎｌ等（２００２）的介绍对其１．

8、２．８联合药敏试验ＦＩＣ指数ＦＩＣ指数＝（甲药纯化扩增，并将革兰氏阴性短杆菌分离菌株接种于联合时的ＭＩＣ／甲药单独时的ＭＩＣ）＋（乙药联合时ＴＳＩ中。的ＭＩＣ／乙药单独时的ＭＩＣ）。ＦＩＣ指数≤０．５，协１．２．３血清型鉴定挑取三糖铁培养物中呈阳性同作用；０．５＜ＦＩＣ指数≤１，相加（累加）作用；１＜的菌落进行沙门氏菌Ａ～Ｆ多价“Ｏ”诊断血清玻片ＭＩＣ指数≤２，无关作用；ＦＩＣ指数＞２，颉颃作用。凝集试验，并设生理盐水为对照。玻片凝集试验用２结果与分析于筛选常见的菌体