高二理科生物选修1学案.doc

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1、专题五DNA和蛋白质技术课题1DNA粗提取与鉴定【新课导学】一、基础知识1．提取生物大分子的基本思路是选用一定的或方法分离具有不同或性质（简称理化性质）的。2．DNA的溶解性特点：DNA在中溶解度不同；据图5－1分析：DNA在NaCl溶液浓度时溶解度最小，使用较高浓度的NaCl溶液，可使DNA；使用浓度为可使DNA析出。利用DNA酒精而蛋白质酒精的原理，可以达到目的。3．DNA的耐受性特点：能水解蛋白质而不能分解DNA；在℃时蛋白质变性沉淀而DNA分子不变性。能与蛋白质结合瓦解细胞膜而不破坏DNA分子。4．DNA的鉴定原理：当鉴定提取出的物质是否是DNA时，需要使用

2、进行鉴定。在条件下，该试剂与DNA反应，呈现色。二、实验设计1．实验材料的选取：选取材料时应本着、、的原则。2．破碎细胞，获取含DNA的滤液：鸡血：向鸡血细胞液中加入一定量并玻棒搅拌，用过滤后，收集。洋葱：向研钵中加入一定量和，搅拌研磨，用过滤后，收集滤液。思考：在以上实验中，蒸馏水的作用是，洗涤剂的作用是，食盐的作用是。3．去除滤液中的杂质：为了提取的DNA，需要将进一步处理。课本上三个方案的原理分别是：方案一原理：；方案二原理：；方案三原理：。4．DNA的析出：DNA滤液与混合，静置一段时间后析出的就是DNA。5．DNA的鉴定：取2支洁净的试管，编号甲、乙，各加

3、入等量的溶液。甲中放入少量白色丝状物，使之溶解。在甲、乙试管中各加4mL，混合均匀。沸水浴5min，观察颜色变化，甲试管呈现色。三、操作提示1．在鸡血中加入防止凝固2．玻璃棒搅拌以免。3．二苯胺试剂要。4．为提高DNA纯度，实验中通常使用的洗涤剂有等。【基础训练】1.在研究DNA的基因样本前，采集来的血样需要蛋白水解酶处理，然后用有机溶剂除去蛋白质。用蛋白水解酶处理血样的目的是（）A.除去血浆中的蛋白质B.除去染色体上的蛋白质C.除去血细胞表面的蛋白质D.除去血细胞中的所有的蛋白质，使DNA释放，便于进一步提纯2．与析出DNA粘稠物有关的叙述，不正确的是（）A.操作

4、时缓缓滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度B.在操作A时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证DNA分子完整C.加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度，两者均可析出D.当丝状粘稠物不再增加时，此时NaCl的浓度相当于0.14mol/L3．洗涤剂能够瓦解（），但对DNA没有影响。A.细胞壁B.细胞膜C.细胞核D.细胞质4．在沸水浴的条件下，DNA遇（）会被染成蓝色。A.斐林试剂B.苏丹Ⅲ染液C.双缩脲试剂D.二苯胺5．DNA的粗提取中，将与滤液体积相等的、冷却的（），静置2—3min，溶液中会出现白色丝状物。A.0．9%的NaClB.0.14mol/L的NaCl溶液C.质量分数15%

5、的HClD.体积分数为95%的酒精溶液6.以血液为实验材料时，需要向血液中加入（），防止血液凝固。A.醋酸钠B.龙胆紫C.柠檬酸钠D.醋酸洋红7.在向溶解DNA的NaCl溶液中，不断加入蒸馏水的目的是（）A.加快溶解DNA的速度B.加快溶解杂质的速度C.减少DNA的溶解度，加快DNA析出D.减小杂质的溶解度，加快杂质的析出8.去除滤液中的杂质时，直接在滤液中加入嫩肉粉，利用嫩肉粉中的（）分解蛋白质。A.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.木瓜蛋白酶D.肠肽酶9．填写本实验完成下列实验操作时所用试剂。⑴提取鸡血细胞中核物质⑵溶解核内DNA：⑶析出2mol/LNaCl溶液中的DNA

6、⑷DNA粘稠物的再溶解⑸提取杂质较少的DNA白色乳状丝状物⑹DNA的鉴定课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段【新课导学】1．PCR原理填写下列表格参与的组分在DNA复制中的作用解旋酶DNA母链合成子链的原料DNA聚合酶引物DNA的两条链是反向平行的，通常将DNA的羟基末端称为，而磷酸基团的末端称为。DNA聚合酶不能开始合成DNA，而只能，因此，DNA复制需要引物。DNA的合成方向总是。在DNA的复制过程中，复制的前提是。在体外可通过控制来实现。在的温度范围内，DNA的双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称为。PCR利用了DNA的原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合

7、。由于PCR过程的温度高，导致DNA聚合酶失活，后来的DNA聚合酶的发现和应用，大大增加了PCR的效率。PCR反应需要在一定的缓冲溶液中提供：，，，，同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。2．PCR的反应过程PCR一般要经历循环，每次循环可以分为、和三步。从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，并且由延伸而成的DNA单链会与结合，进行DNA的延伸，这样，DNA聚合酶只能，使这段固定长度的序列成指数扩增。3．实验操作在实验室中，做PCR通常使用，它是一种薄壁塑料管。具体操作时，用，按PCR反应体系的配方在中依次加入各组分，，再参照下表的设置设计