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时间:2017-12-28
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1、凝血四项(PT、APTT、FIB、TT)操作规程目录1.凝血酶原时间(PT)测定2.活化部分凝血酶原时间(APTT)测定3.纤维蛋白原(FIB)测定4.血酶时间(TT)测定贺州市广济医院检验科作业指导书凝血酶原时间(PT)测定编号:版本:生效日期:第页共页测定原理:待测血浆加入过量的含钙组织凝血活酶,重新钙化的血浆在组织因子存在时激活因子X成为Xa,后者使凝血酶原转变为凝血酶,凝血酶使纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,测定凝固所需的时间,即为待测血浆凝血酶原时间。试剂主要组成成分:1.PT试剂:1
2、0瓶(内含脑粉提取物、缓冲液、稳定剂、防腐剂)本批试剂国际敏感指数ISI值:见瓶标2.PT缓冲液:1瓶(内含缓冲液、稳定剂、防腐剂)注:不同批号试剂盒中各组分不可互换操作步骤1.试剂重建与保存每瓶试剂加入2.0ml缓冲液轻摇溶解。2.半自动血凝仪测定取待测血浆(正常质控血清或正常混合血浆)0.1ml,37℃孵育3分钟,加入37℃预温PT试剂0.2ml,记录凝固时间,即为PT值。3.数据处理待测血浆PT凝血酶原时间比值(PTR)=————————————正常质控(混合)血浆PT国际标准化比值(IN
3、R)=PTRISI参考值10~14秒以PTR表示:0.95~1.24;以INR表示:0.94~1.30临床意义用于体外人血浆中凝血酶原时间(PT)测定。PT测定是外源性凝血系统较理想和常用的筛选试验。也可作为外源性途径及共同途径凝血因子的定量试验,同时,也可用于口服抗凝剂治疗的监控。PT延长:见于先天性凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏症,低(无)纤维蛋白原血症,DIC,原发性纤溶症,VitK缺乏,肝病,口服抗凝剂、肝素和FDP等。PT缩短:见于先天性凝血因子Ⅴ增多,口服避孕药,高凝状态,血栓性疾病等。
4、储存条件及有效期:未开启试剂于2~8℃保存可稳定至标签所示失效日期;试剂复溶后于2~8℃可保存7天。试剂保存应防止冷冻。编写:审核:批准:批准日期年月日贺州市广济医院检验科作业指导书活化部分凝血酶时间(APTT)测定编号:版本:生效日期:第页共页测定原理:待测血浆加入部分凝血活酶溶液,在Ca++参与下纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,测定凝固所需的时间,即为待测血浆活化部分凝血酶时间。试剂主要组成成分:1.APTT(鞣花酸)试剂:10瓶(内含脑磷脂、鞣花酸、稳定剂、防腐剂)2.0.025mol/L
5、CaCl2:1瓶(内含氯化钙、防腐剂)注:不同批号试剂盒中0.025mol/LCaCl2可互换操作步骤1.试剂使用前振摇均匀。2.半自动血凝仪测定⑴取待测血浆(正常质控血浆或正常混合血浆)0.1ml,加入37℃预温APTT试剂0.1ml,37℃孵育5min。⑵加入37℃预温0.025mol/LCaCl2溶液0.1ml,记录凝固时间。参考值22~38秒临床意义用于体外人血浆中活化部分凝血活酶时间(APTT)测定。APTT测定是内源性凝血系统较敏感和常用的筛选试验,也可作为内源性途径凝血因子的定量试
6、验,可检测除Ⅶ因子外的其它血浆凝血因子,特别是用于因子Ⅶ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ和前激肽释放酶的测定。同时,APTT测定可用于肝素治疗监控。APTT延长:见于凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ减低,纤维蛋白原缺乏症,纤溶活力增强,抗凝物质存在(如血内肝素含量增加及口服抗凝剂)是监控肝素治疗的重要指标。APTT缩短:见于高凝状态,血栓性疾病,如心肌梗塞、不稳定性心绞痛、脑血管病变、肺梗死、深静脉血栓形成、妊娠高血压综合症和肾病综合症等。注意事项1.实验材料不能有去污剂存在,否则测定结果会出现假性延长。2.APTT
7、(鞣花酸)试剂预温不可超过15分钟。预温试剂应按每天实际用量量取预热。3.APTT(鞣花酸)试剂与血浆温育时间不宜少于5min。参考文献详见说明书编写:审核:批准:批准日期年月日贺州市广济医院检验科作业指导书纤维蛋白原(FIB)含量测定编号:版本:生效日期:第页共页测定原理:采用Clauss凝固法原理,高浓度凝血酶存在时,待稀释血浆的凝固时间与其纤维蛋白原(FIB)含量成反比关系。试剂主要组成成分:1.FIB凝血酶:5瓶(内含凝血酶、缓冲液、高岭土、稳定剂、防腐剂)2.FIB定值血浆:1瓶定值见
8、瓶标3.FIB缓冲液:2瓶(内含缓冲液、防腐剂)操作步骤1.每瓶FIB凝血酶加入2.5ml蒸馏水轻摇溶解。
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