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《TLR4通路对polyI:C诱导肝癌细胞凋亡的影响-论文.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、中国免疫学杂志2014年第3O卷doi:10.3969/j.issn.1000q84X.2014.01.005TLR4通路对polyI:C诱导肝癌细胞凋亡的影响①赵华俊林昂韩秋菊张建(山东大学药学院免疫药理与免疫治疗学研究所,济南250012)中图分类号R446.61文献标志码A文章编号1000-484X(2014)01-0030-04[摘要]目的:研究TLR4信号通路活化对polyI:C诱导人肝癌细胞系H7402凋亡的影响,并分析其可能的作用机制。方法:用TLR4激动剂LPS处理H7402细胞24h后,转染polyI:C刺激24h,然后利用流式细胞术检测细胞凋亡,荧光定量PCR检测凋亡基
2、因及胞内RNA模式识别受体TLR3、MDA5、RIG.I和LGP2的表达.Westernblot检测识别受体的蛋白表达水平。结果:LPS预处理,减弱了polyI:C诱导H7402细胞凋亡的作用。同时,促凋亡基因Noxa的表达水平降低。在此过程中polyI:C的胞内识别受体RIG—I、MDA5的基因和蛋白水平表达下调。结论:LPS可能通过降低H7402细胞内dsRNA识别受体的表达。抑制了polyI:C诱导H7402细胞凋亡的作用。[关键词]脂多糖;肝癌;polyI:C;凋亡InfluenceofTLR4signalingonpolyI:C-inducedapoptosisofhepatoc
3、ellularcar-cinomacellsZHAOHua—Jun,LINAng,HANQiu—Ju,ZHANGJian.InstituteofImmunopharmacologyandImmunotherapy,SchoolofPharmaceuticalSciences,ShandongUniversity,Ji'nan250012,China[Abstract]Objective:ToinvestigatetheinfluenceofTLR4signalingactivationonpolyI:C—inducedapoptosisofH7402cellsandthemechanism
4、sinvolvedinthisprocess.Methods:Afterpre—treatmentwithTLR4ligandLPSfor24h,polyI:Cwastransfectedin—toH7402cells.Afteranadditional24hs,FACSwasusedtoevaluatetheapoptosisrate,andreal—timequantitivePCRwasperformedtoanalyzetheexpressionofapoptoticgenesandRNA-sensingpatternrecognitionreceptors(PRRs),inclu
5、dingTLR3,MDA5,RIG—IandLGP2.TheproteinlevelofMDA5andRIG—1wasmeasuredbyWesternblot.Results:LPSpre.treatmentcouldinhibitpolyI:C—in—ducedtheapoptosisofH7402cells.FurtherresearchshowedthattheexpressionofRIG—I,MDA5aswellasthepro—apoptoticgeneNoxawasdecreasedintheprocess.Conclusion:LPSpre—treatmentleadto
6、thereductionofintracellularRNA—sensingPRRs.andtheninhibitepolyI:C—inducedtheapoptosisofH7402cells.[Keywords]LPS;Hepatocellularcarcinomacells;polyI:C;Apoptosis{Toll样受体(Tolllikereceptors,TLRs)是一类模癌细胞、乳腺癌细胞等均有表达。而TLRs对不同式识别受体,在生物体进化过程中高度保守⋯。大种类肿瘤细胞发挥着不同的生物学功能。例如,人量研究表明,TLRs在多种细胞中均有表达,其中以头颈部鳞癌细胞系上的TLR
7、4活化后能够促进肿瘤免疫细胞表达为主,如树突状细胞、T细胞、中性粒的发展,并保护肿瘤免受免疫系统攻击[3];乳腺癌细胞等[1,21。TLRs的活化在宿主抵抗外来病原体感细胞的TLR5在活化后能够抑制细胞增殖.从而抑染和组织损伤的天然免疫应答过程中发挥着重要作制肿瘤的生长_4I5J。因此,研究TLR激动剂对肿瘤用,并可以通过多种机制间接调节获得性免疫应答。的直接作用,对于肿瘤的免疫治疗具有重要的意义。早期的研究主要是立足于
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