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《豆科植物幼嫩子叶染色体制片的预处理方法-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、..第8卷第三期Vol8NO3云南教育学院学报1992年6月June1992*豆科植物幼嫩子叶染色体制片的预处理方法张长顺(云南教育学院生物系),。:子叶的预处理不提要材料的预处理是否适宜是染色体制片成败的很重要的操作步骤。、ciab,umtim宜用根尖预处理的方法作者试验了蚕豆(vifaa)豌豆(Pisavu)和救荒野豌,、。豆(Viciasativ豆芙活体注射和豆粒活体注射a)子叶预处理的三种方法即离体处理试验结,,,、果表明只有豆拉活体注射法可行效果很好子叶细胞分裂中期相的比率很高染色体形态结。。构清晰豆芙活体注射法和离体处理法效果都很差豆芙活体注射过的子叶同
2、未经处理的一样;,,。经离体处理的子叶细胞的有丝分裂指数显著下降染色体染色差并很难分散。:;;;关键词子叶染色体离体处理活体注射,〔门19作者曾于86年报导过植物子叶的染色体制片法其优点是子叶细胞的有丝分裂活性高,取材和制片方便。但在文中未介绍子叶预处理的方法。材料的预处理可分为离体处理和非,,。〔”离体处理两种而子叶不宜用离体处理只能用非离体处理我们参照动物骨髓细胞染色体‘3,〔’制片的预处理方法即腹腔注射法将秋水仙素溶液注人几种豆科植物的幼小豆粒内进行预,,。处理试验效果很好现报告如下材料和方法(一)供试材料,、,、-VieiabaZn一12Pisumsativ
3、umZn=14Vieiasat蚕豆(fa)豌豆()救荒野豌豆(,OivaZn一12)(二)预处理、,1非离体处理采用两种处理方法一种是用注射器将秋水仙素溶液直接注人幼小豆粒,。,内进行处理另一种是药物只注人豆荚内而不进人豆粒前者我们称豆粒活体注射法后者称.。:1豆荚活体注射法豆粒活体注射法使用的秋水仙素溶液的浓度和预处理的时问是蚕豆用0%..,,,(或005%)的液度处理5一一8小时;豌豆和救荒野豌豆用005%的液度豌豆处理3一一5小时。。救荒野豌豆3一一4小时豆荚活体注射法使用的药物浓度和豆粒活体注射法相同预处理的时,。,:间是豌豆6一一12小时救荒野豌豆6一一8
4、小时用以上两种预处理方法进行处理时均注射药,,。物两次即开始时一次中间一次、,,2离体处理将子叶从幼小豆粒内取出投人秋水仙素溶液中或在培养皿中铺二层滤纸,,加人一薄层预处理液然后将子叶按一定距离均匀地放在滤纸上进行处理使用的药物浓度与。,。,非离体处理的相同蚕豆处理1一一2小时豌豆和救荒野豌豆2小时此外为研究子叶离体后对细胞分裂活性的影响,将材料放人蒸馏水中进行处理,处理时间与用药物的相同。(三)制片,,经预处理的子叶放人醋酸酒精固定液中固定用50一一5℃的45%醋酸解离改良的石碳,。酸品红染液染色尔后压片观察结果和讨论我们对三种预处理方法进行了多次试验,结果发现彼
5、此间效果差别很大,其具体表现如。下(一)豆粒活体注射法,,,效果很好(图版13)经处理的子叶有丝分裂中期的细胞数比未经处理的明显增多而且,。因子叶细胞的分裂活动很旺盛经预处理后有丝分裂中期的细胞比率相当高(见表l)蚕豆子叶..,经预处理的和未经处理的分别是7945%和189%经预处理的比未经处理的高达四倍;豌豆子..,。叶经预处理的和未经处理的分别是8319%和2004%经预处理的比未经处理的也高四倍二。,,、者差异十分明显另外经预处理的子叶同经预处理的根尖一样染色体形态结构都比较清,、、、。,、晰(图版I1267)这样用豆粒活体注射法可获得大量染色体形态结构较好的
6、中期分裂,、。相供染色体计数核型分析和分带使用、表1经活体预处理和未经处理的蚕豆豌豆子叶细胞有丝分裂中期的细胞比率比较Table1CoPasionoftherateofmitotiemetaphaseeellsineotyledonspretreated访vivoandmar.untreatedeiabaandPisumsativumVila材料子叶数现察分裂期细胞总数分裂中期细胞数分裂中期细胞比率(%)·-.r:一materialnumberoftotalnumbeoflunnberofmitotieateofmitotiemetaeotyledonobsvere
7、deellsmetaPhaseeellsphaseeells(%).蚕豆子叶预处理168036387945eoedonofPretreatedtyl.未处理167671451890eiabaVifauu脾七L1七dLeu碗豆子叶预处理1657748083一leotyledonpd成retreate1尸妇um忍a杏.落口“刀舀169231852004未处理u刀etreatedPr(二)离体处理效果很差,经离体处理的子叶细胞分裂活性与未经处理的比较明显下降,分裂细胞大大减.,、、、,。,少(图版l4589)有丝分裂指数很低蚕豆子叶经处理的有丝分裂指数是383瓜未经处
