蒙古口蘑活性成分提取工艺优化和体外抗氧化性研究.pdf

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1、分类号Q93学校代码10129UDC579学号08210005蒙古口蘑活性成分提取工艺优化和体外抗氧化性研究StudiesonExtractionofTricholomamongolicumActiveComponentsanditsAntioxidationinVitro申请人：张智毓学位门类：理学学科专业：微生物学研究方向：资源微生物指导教师：姚庆智副教授论文提交日期：二○一一年五月摘要蒙古口蘑是一种著名的野生食药用菌，研究表明蒙古口蘑具有抗肿瘤、提高机体免疫功能、抗氧化能力等功效。但由于蒙古口蘑子实体无法人工栽培，加之我国的食药用菌品种登

2、记制度尚未完善，也造成我国蒙古口蘑资源品种混杂，且存在蒙古口蘑活性成分功效不明的情况，这均制约其更好的应用和开发。针对上述现象，本文对蒙古口蘑的菌株进行了鉴定，研究了蒙古口蘑活性成分的最佳提取条件，并研究活性成分的体外抗氧化活性。本文主要研究内容及结果如下：1、采用ITS序列分析方法对从锡林郭勒草原与呼伦贝尔草原不同地区采集的子实体和纯培养菌株进行分子鉴定，结果表明在20个供试材料中，12个属于蒙古口蘑。确认蒙古口蘑菌株是其子实体分离的纯培养物，并证明锡林郭勒草原与呼伦贝尔草原的蒙古口蘑无地域遗传差异性。2、选取经过鉴定为蒙古口蘑的子实体和菌丝

3、体为材料，利用响应面法对蒙古口蘑活性成分（多糖、多肽和三萜）提取工艺进行优化，结果表明，蒙古口蘑子实体多糖提取工艺：温度87.09℃，料液比1：9.94，乙醇浓度89.97%，提取时间4h，提取次数2次；菌丝体多糖提取工艺：温度89.36℃，料液比1：13.08，提取时间3.14h，乙醇浓度70%，提取次数2次。蒙古口蘑子实体多肽提取工艺：pH6.86，提取时间15.77h，乙醇浓度69.16%，提取温度40℃，料液比1：15，提取次数2次；菌丝体多肽提取工艺：pH8.78，料液比1：19.97，乙醇浓度79.70%，提取次数2次，提取温度40

4、℃，时间10h。蒙古口蘑子实体三萜提取工艺：温度80℃，料液比1：22.81，乙醇浓度68.72%，提取时间24h，提取次数3次；菌丝体三萜提取工艺：温度78.49℃，料液比1：26.74，乙醇浓度60%，提取时间30h，提取次数4次。3、利用可见分光光度法对蒙古口蘑子实体和菌丝体活性成分的体外抗氧化活性（清除羟自由基、清除超氧阴离子自由基、还原能力和总抗氧化能力）进行测定，结果表明：蒙古口蘑活性成分（多糖、多肽、三萜）都具有一定的抗氧化能力，而且随着浓度的增加，抗氧化能力不断增强。蒙古口蘑活性成分的提取物在不同浓度0.1mg/ml-0.4mg

5、/ml间对体外抗氧化能力有显著性影响。蒙古口蘑子实体多肽对羟自由基、超氧阴离子自由基、还原能力和总抗氧化能力的抑制清除作用都明显大于菌丝体多肽。蒙古口蘑子实体三萜对超氧阴离子自由基的清除能力明显大于菌丝体三萜。蒙古口蘑菌丝体三萜的还原能力明显大于子实体三萜。关键词：蒙古口蘑；ITS；活性成分；体外抗氧化活性StudiesonExtractionofTricholomamongolicumActiveComponentsanditsAntioxidationinVitroAbstrastTricholomamongolicumisthefamou

6、swildediblemushroom.Inpresentstudy,scientistsfoundthatTricholomamongolicumcouldimproveimmune,anti-cancer,anti-oxidation,andsoon.Tricholomamongolicumisnotartificialcultivation.TheregistrationsystemofediblefungusinChinaisnotperfectatpresent,soTricholomamongolicumwasvarietalcom

7、plexity.AndtheefficacyofTricholomamongolicumwasnotclear.AlloftheserestrictedtheapplicationandexploitationofTricholomamongolicuminChina.Inthispaper,Tricholomamongolicumwereidentified,theoptimalextractionconditionsandantioxidationinvitroofTricholomamongolicumwasstudied.Themain

8、contentandresultswereasfollows:1.InordertoidentifytheauthenticityofTricholo