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时间:2020-07-26
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1、第十章维生素的测定AnilysisofVitamins第一节概述一、定义:维生素:维持人体正常生命活动所必需的一类天然有机化合物。二、分类与命名:目前已确认有30余种,被认为对维持人体健康和促进发育至关重要的有20余种。按溶解性维生素分为脂溶性的和水溶性的两类。维生素命名有三种:1、按发现历史时间,以英文字母顺序排列,如维生素A,B,C,D,E…;2、按特有功能和作用命名,如抗干眼因子,抗赖皮病因子,抗坏血酸因子,生育酚等等;3、按化学结构命名,如视黄醇,硫胺素,核黄素等等。三、维生素特点维生素结构多样性、复杂性、含量低,理化性质及生理功能各异,有的属于醇类,有的属于胺类,有的
2、属醛类,还有的属于酚或醌类化合物。它们有以下共性:这些化合物或其前体化合物都在天然食物中存在;它们不能供给机体热能,也不是构成组织的基本原料;主要是作为辅酶的成份调节代谢过程,需要量极小;它们—般在体内不能合成,或合成量不能满足生理需要,必须经常从食物中摄取;长期缺乏任何一种维生素都会导致相应的疾病。食品中各种维生素含量主要取决于食品品种;还与食品工艺、贮存等条件有关,许多维生素对光、热、氧、pH值敏感。四、测定意义:有利于评价食品营养价值,开发富含维生素食品资源;有利于指导人们合理调整膳食结构,防止维生素缺乏症;有利于研究维生素在食品加工、贮存等过程中的稳定性,指导人们制定,
3、合理的工艺条件及贮存条件,最大限度地保留各种维生素;有利于监督维生素强化食品的强化剂量,防止因摄入过多而引起维生素中毒症等方面。五、常用测定方法(相关GB)比色法化学法滴定法Vit分析法紫外法仪器法荧光法HPLC法微生物法(酶法、酶联免疫法)干扰因素多,操作步骤较多。测定时间较长,测定成本较高。仪器成本,分析成本高干扰因素多,操作步骤较多。化六、样品前处理1、水溶性VitVB1,VB2可能与蛋白质,淀粉等结合在一起,一般可通过酸水解或酶水解使其游离出来,然后进行提取,纯化和测定。2、脂溶性Vit样品→皂化→脂溶性Vit和皂化物→过滤→有机溶剂抽提→浓缩→溶于适当溶剂→测定。国际
4、单位:IU(InternationalUnit)1IU=0.3μgVA=0.025VD=1.79μgβ-胡萝卜素=1.1mgα-VE=3μgVB作业1、移取消毒牛奶5.00mL温度为20℃,乳稠度为38°;消化后,定容100mL取5.00mL的定容液进行碱化蒸馏滴定,用去0.01087mol/L的HCl体积9.27mL,试剂空白为0.20mL;乳制品的蛋白质中氮的量为15.67%,求此消毒牛奶中的氮;蛋白质的量各为多少?2、加速蛋白质消化常用的方法有那些,简述它们的理论依椐?3、简述蛋白质的凯氏测定法定量的依椐,操作要点,方法特点?4、蛋白质从营养的角度如何分类,简述蛋白质三
5、种快速测定方法的要点?第二节脂溶性维生素测定脂溶性VA、D和E,与类脂物一起共存于食物。它们一般能在体内积贮,不完全依赖日常饮食提供。脂溶性维生素理化性质:1、溶解性:不溶于水,易溶于脂肪、乙醇、丙酮、氯仿、乙醚、苯等有机溶剂。2、耐酸碱性:VA、D对酸不稳定,对碱稳定;VE对酸稳定,对碱不稳定;但在抗氧化剂存在下或惰性气体保护下,也能经受碱的煮沸。3、耐热性、耐氧化性:VA、D、E耐热性好,能经受煮沸。VA因分子中有双链,易被氧化,光、热促地其氧化;VD性质稳定,不易被氧化;VE在空气中能慢慢被氧化,光、热、碱能促进其氧化作用。分析操作一般要在避光、防氧化作用(常加入抗氧化剂
6、如焦性没食子酸、抗坏血酸等)条件下进行。VA氧化产物(无活性)光、热、氧化剂、氧VA测定(一)概述VA存在于动物性脂肪中,主要来源于肝脏、鱼肝油、蛋类、乳类等动物性食品。植物性食品中不含VA,在深色果蔬中含胡萝卜素,它在人体内可转变为VA,称为VA原。VA是由β—紫罗酮环与不饱和一元醇所组成的一类化合物及其衍生物总称,包括A1和A2。VA1即视黄醇;VA2即3-脱氢视黄醇,VA1还有许多种衍生物,包括视黄醛、视黄酸、3—脱氢视黄醛、3—脱氢视黄酸及其各类异构体,它们也都具有VA的作用,总称为类视黄素。其化学结构式:(二)测定方法2、适用范围及特点:适用于VA含量较高样品(高于1
7、0μg/g)。该法生成的蓝色络合物的稳定性差,比色测定必须在6分钟内完成,否则蓝色会迅速消退,将造成极大误差。测定方法:三氯化锑比色法、荧光法、紫外分光光度法、HPLC等。A、三氯化锑比色法(GB/T5009.82—2003 第二法)1、原理:在氯仿溶液中,VA与三氯化锑可生成蓝色可溶性的配合物,在620nm波长处有最大吸收峰,其吸光度与VA的含量在一定的范围内成正比,用比色法测定。VA氯仿液(10~20IU)加SbCl3/CHCl3蓝色B、紫外分光光度法1、原理:VA的异丙醇溶液在325n
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