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1、粗料日粮下添加苹果酸对内蒙古白绒山羊瘤胃TVFA浓度的影响瘤胃发酵所产生的挥发性脂肪酸是反刍动物的重要能量来源，约占反刍动物吸收能量的70%～80%，而其中乙、丙、丁酸又占瘤胃TVFA总产量的95%以上[1]。而在乙酸、丙酸及丁酸三者之中，丙酸是糖异生的主要前体物质，因而，提高TVFA中丙酸比例对反刍动物生产具有重要意义。苹果酸作为一种四碳二羧酸，是三羧酸循环的重要的中间产物，也是瘤胃细菌（如反刍动物新月单胞菌）在琥珀酸－丙酸代谢途径发挥作用的关键性中间产物[2]。大量试验证明，高精料日粮条件下体外添加苹果酸，可以提
2、高底物发酵后培养液中丙酸浓度、TVFA浓度，降低乙丙比；而在非高精料（粗料型）日粮条件下的研究较少。为此，本试验研究在两种不同精粗比的粗料型日粮条件下体外添加苹果酸对内蒙古白绒山羊瘤胃挥发性脂肪酸浓度动态变化的影响。1材料与方法1.1试验动物选择4头体况良好、体重相近[（30±1）kg]的安装有永久性瘤胃瘘管的内蒙古白绒山羊的半同胞羯羊作为瘤胃液供体。1.2试验日粮精粗比为3：7和2：8的两种日粮，日粮配方参照NRC(1981)30kg体重的山羊的饲养标准，采用1.25倍ME水平进行配制。具体日粮配方见表1。2.饲料
3、成分的RDP、UDP值参考feedstuff（2007）。1.3试验设计分别称取0.4g两种精粗比的基础日粮作为体外培养底物，试验设空白组和试验组，试验组中苹果酸的添加量分别为0、3、6、9、12mmol/l；空白组不添加底物和苹果酸，只加瘤胃液和缓冲液；每组设3个重复；进行0、2、4、8、12、18、24h的体外批次培养。苹果酸购自上海赛亚精细化工有限公司，纯度为99%。1.4试验方法1.4.1装置和缓冲液的配制采用人工瘤胃装置进行体外批次培养。缓冲液的配制参照熊本海博士论文（1998）[3]。1.4.2瘤胃液的采
4、集与培养液的制备晨饲（06:00）前1h由4只绒山羊瘤胃内上下左右不同位点采集足量瘤胃液，灌入经预热达39℃并通有CO2的保温瓶中，灌满后立即盖严瓶口，迅速返回试验室，经40～60ml尼龙布过滤后持续通入CO2气体5min，然后迅速分装至上述已预热好并通有CO2的培养瓶内（每个培养瓶加20ml瘤胃液）。接通培养瓶和注射器，打开振荡开关，开始培养。1.5测定指标培养液培养0、2、4、8、12、18和24h后，测定培养液的挥发性脂肪酸（VFA）浓度，测定参照秦为琳的方法进行[4]。1.6数据处理试验数据经Excel(20
5、03)初步整理后，采用SPSS软件（SPSS11.5forwindows）中单因素方差分析过程（One-WayANOVA）进行统计，均值的多重比较采用其中的Duncan's法进行分析。2结果与分析2.1添加不同剂量苹果酸对培养液中乙酸浓度的影响(见表2)由表2可知，3：7日粮除培养0和18h外，其余各培养时间点，均是添加苹果酸组高于对照组；其中培养4、8、18和24h后差异显著（P<0.05）；而2：8日粮在培养8、12和24h后，苹果酸各添加组均高于对照组，但在培养8h后差异显著（P<0.05），而培养12和24h
6、后差异不显著（P>0.05），在培养18h后，除添加9mmol/l外，其余各添加苹果酸组均显著高于对照组（P<0.05）。2.2添加不同剂量苹果酸对培养液中丙酸浓度的影响（见表3）由表3可知,3：7日粮除0h外,其余各时间点丙酸浓度均是添加苹果酸组高于对照组,且差异均显著（P<0.05）,其中在培养2h后，3、6、12mmol/l组显著高于9mmol/l组（P<0.05）；培养8h后,3mmol/l组高于6mmol/l组,低于9、12mmol/l组,差异显著（P<0.05）；培养12、18、24h后，均是6、9、12
7、mmol/l组显著高于3mmol/l组(P<0.05);而2：8日粮除培养0、2h外，其余各时间点均是添加苹果酸组高于对照组，其中在培养8、12、18和24h后，差异显著（P<0.05）；在培养2h后，3mmol/l组显著低于对照组，其余各苹果酸添加组均显著高于对照组（P<0.05）；且两种日粮下，随着苹果酸添加量的增加，其培养液丙酸浓度有升高的趋势。 2.3添加不同剂量苹果酸对培养液中丁酸浓度的影响(见表4)由表4可知,3：7日粮下,培养2h后,9mmol/l组丁酸浓度低于对照组和其余各组，差异不显著(P>0.05
8、)；培养4、8h后,均是添加3mmol/l组高于对照组,其余各添加组低于对照组,其中培养4h后,差异显著(P<0.05);培养12h后,6mmol/l组高于对照组和其余各添加组,而培养18h后,9mmol/l组高于对照组和其余各添加组，差异不显著(P>0.05);培养24h后,各添加苹果酸组均高于对照组,其中6mmol/l组显著高于其余各组(P
