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时间:2020-06-18
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1、C18色谱柱保存、清洗、再生方法一、色谱柱的保存方法1.纯乙腈或甲醇保存色谱柱(当使用流动相中含有盐时,注意首先用20倍柱体积的5%-10%的乙腈-水或5%-10%甲醇-水流动相过渡)。二、色谱柱的清洗方法1.以乙腈:水(1:9,v/v)→乙腈→乙腈:水(1:9,v/v)依次冲洗,然后进行使用。2.多次使用后某些样品可能会吸附到入口筛板或填料上,引起柱压升高伴随峰形展宽的现象。此时,可将色谱柱与检测器断开,将色谱柱反接后进行冲洗。三、色谱柱的再生方法:1.一般污染再生:乙腈:水(1:9,v/v)→乙腈→氯仿(或异丙醇
2、)→乙腈→乙腈:水(1:9,v/v)→流动相,分别冲洗10~20倍柱体积。2.蛋白污染再生:0.1%的三氟乙酸水溶液:异丙醇(4:1,v/v)→乙腈:异丙醇(1:2,v/v,内含0.1%三氟乙酸)→水:异丙醇(1:4,V/V),分别冲洗10~20倍柱体积。(注意每项过渡时,压力的控制,压力最好控制在1500psi以下,根据柱子的具体情况请自己优化流速)。
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