1.色谱柱清洗和再生方法

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1、色谱柱的清洗和再生方法除非特殊说明，在所有情况下，所用溶剂的体积应该是色谱柱体积的40-60倍。应在清洗过程开始和结束时各测一次柱效和容量因子等，比较色谱柱性能的改善，以确定清洗的效果。确保色谱柱中没有样品和缓冲溶液，清洗前所用的溶剂应与最初清洗时所用的溶剂相溶。应确保实验测试时所用的流动相与色谱柱中最后的溶剂相溶。1正相填料用四氢呋喃冲洗。用甲醇冲洗。用四氢呋喃冲洗。二氯甲烷冲洗。用无苯正己烷冲洗。2反相填料用HPLC级水冲洗，冲洗时进4等份的200µl的二甲亚砜（DMSO）。用甲醇冲洗。用氯仿冲洗。用

2、甲醇冲洗。3阴离子交换填料用HPLC级水冲洗。用甲醇冲洗。用氯仿冲洗。Tel:0411-3641666(总机)●Fax:0411-3644564●E-mail:info@eliteHPLC.com●Http://www.eliteHPLC.com4阳离子交换填料用HPLC级水冲洗；在冲洗的过程中进4等份200µl的DMSO四氢呋喃冲洗。5蛋白质凝胶过滤填料去除蛋白质尺寸排阻介质中的污染物有两种清洗/再生的方法。弱保留蛋白质用30moL/LpH3.0磷酸盐缓冲液冲洗。强保留蛋白质用100%的水到100%的乙

3、腈梯度洗脱60min。Tel:0411-3641666(总机)●Fax:0411-3644564●E-mail:info@eliteHPLC.com●Http://www.eliteHPLC.com6多孔石墨化碳多孔石墨碳有四种再生的方法，选用哪一种方法依赖于被分析物和所用的溶剂。酸碱再生适合于使用极性流动相分析离子类分析物。将色谱柱倒装用50ml含0.1%三氟乙酸的四氢呋喃／水(1:1)溶液1ml/min流速冲冼。用50ml含0.1%三乙胺或氢氧化钠的四氢呋喃／水(1:1)溶液1ml/min流速冲冼。用

4、50ml含0.1%三氟乙酸的四氢呋喃／水(1:1)溶液1ml/min流速冲冼。用95%甲醇水溶液冲洗重新平衡。将色谱柱改为正向。作者：英国的R.Plumb-Glaxo强有机溶剂再生适合于水相分析极性或离子类分析物。用50ml丙酮以1ml/min流速冲洗。用120ml二丁醚以1ml/min流速冲洗。用50ml丙酮以1ml/min流速冲洗。用水冲冼至平衡。正相再生适合于主要使用正相流动相的多孔石墨化碳柱。用50ml二氯甲烷以1ml/min流速冲洗。用50ml甲醇以1ml/min流速冲洗。用50ml水以1ml/

5、min流速冲洗。用50ml0.1mol/L盐酸以1ml/min流速冲洗。用50ml水以流速1ml/min冲洗。用50ml甲醇以1ml/min流速冲洗。用50ml二氯甲烷以1ml/min流速冲洗。用流动相冲冼至平衡。Tel:0411-3641666(总机)●Fax:0411-3644564●E-mail:info@eliteHPLC.com●Http://www.eliteHPLC.com作者：瑞典的A.Karlsson-Uppsala三氟乙酸的去除适合于流动相中含有三氟乙酸的多孔石墨化碳柱。用加热到75℃

6、的乙腈冲洗，同时色谱柱也要保持在这一温度。Tel:0411-3641666(总机)●Fax:0411-3644564●E-mail:info@eliteHPLC.com●Http://www.eliteHPLC.com7带金属抗衡离子的聚合物填料基质是带金属抗衡离子的聚合物色谱柱，有三种再生方法，每种方法详细列于下表：色谱柱类型金属污染物有机污染物色谱柱清冼氢离子型用25℃的0.1mol/L的用25℃的20:80的乙腈用65℃的20:80的H2SO4溶液以0.1ml/min水溶液以0.1ml/min的AC

7、N:0.01NH2SO4溶液的流速反向冲冼4—16小流速反向冲冼4小时以0.1ml/min的流速反时向冲冼4小时钙离子型用25℃的0.1mol/LpH6.3用25℃的20:80的乙腈用25℃的20:80的乙腈的Ca(NO3)2溶液以水溶液以0.1ml/min的水溶液以0.1ml/min的0.1ml/min的流速反向冲流速反向冲冼4小时流速反向冲冼4小时冼4—16小时钠离子型用85℃的0.1mol/L的用25℃的20:80的乙腈用25℃的20:80的乙腈NaNO3溶液以0.1ml/min水溶液以0.1ml/

8、min的水溶液以0.1ml/min的的流速反向冲冼4—16小流速反相冲冼4小时流速反向冲冼4小时时银离子型没有再生过程的报导。用25℃的20:80的乙腈用25℃的20:80的乙腈水溶液以0.1ml/min的水溶液以0.1ml/min的流速反向冲冼4小时流速反向冲冼4小时铅离子型用85℃的pH5.3的0.1M用25℃的20:80的乙腈用25℃的20:80的乙腈Pb(NO3)2溶液以水溶液以0.1ml/min的水溶液以0.1ml/