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1、第16卷第2期分析测试技术与仪器Volume16Number22010年06月ANALYSISANDTESTINGTECHNOLOGYANDINSTRUMENTSJune2010专论(71～77)高效液相色谱柱清洗与再生方法刘翻,熊志超,张凌怡,张维冰(华东理工大学化学与分子工程学院,上海200237)摘要:分别对反相、正相、离子交换、体积排阻及亲和等色谱柱的清洗与再生方法加以系统综述.使用适当的方法对受污染的色谱柱进行清洗与再生,可恢复其部分分离能力,延长使用寿命.对硅胶基质反相色谱柱,可选择一系列溶剂,按洗脱能力逐渐增强的顺序依次冲
2、洗,或者使用二甲基甲酰胺、乙酰丙酮、SDS及盐酸胍等强洗脱试剂清洗;硅胶基质正相色谱柱用极性逐渐增强的溶剂系统冲洗;有机聚合物、石墨碳及氧化锆固定相色谱柱,用稀酸、稀碱和有机溶剂结合清洗,可将受污染的色谱柱柱效提高50%以上.关键词:高效液相色谱;色谱柱;清洗;再生中图分类号:O657.32文献标识码:A文章编号:1006-3757(2010)02-0071-07色谱作为一种高效的分离手段,自1906年色谱柱市场调查及投资策略分析报告中估计,中国[3]Tswett创立至今百余年来得到了长足发展.高效液每年消耗的分析型反相色谱柱达5万支.
3、这些被相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的污染的色谱柱有一部分经简单的方法进行清洗后,一种色谱方法,已成为现代分离测定的重要手段,广可恢复部分甚至大部分离能力,不仅节省资源,还能泛运用于石油、化工、食品科学、环境及生物等几乎大大降低分离分析的成本.[1]所有研究领域.色谱柱是色谱分离系统的"心色谱柱的清洗与再生方面的研究具有十分重要脏",由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复的现实意义,也一直是色谱工作者和仪器厂商关注杂,色谱柱极易被污染,是导致柱压升高、分离能力的热点.很多色谱专著介绍过色谱柱清洗与再生,并[2]下降的原
4、因之一.通常,样品中含有一些对分析提出许多简单有效的方法,各色谱柱厂商也推荐对不利的物质,这些非目标物能被检测器检测到而形应其商品色谱柱的经验性方法.本文对液相色谱柱成色谱峰、气泡、基线漂移或负峰.其中保留值较弱清洗和再生方法加以系统综述,并在此基础上对各的物质,一般能快速从色谱柱冲洗出来,对分析不产种色谱柱的清洗和再生提出建议.生干扰.中等保留强度的杂质能被缓慢冲洗出来,但1反相色谱柱的清洗和再生对分析产生一定的干扰.强保留杂质通常难以被洗脱,多次上样后,聚集在柱头或色谱柱中.有的分析反相色谱法是当今液相色谱法中应用最广泛的物甚至可能
5、在使用时与填料发生相互作用.这些被一种技术,它能分析非极性、可离子化和离子化样吸附的杂质累积到一定程度后会形成新的伪固定品,应用比例超过90%.随着HPLC技术的发展,色相,从而改变色谱柱的性能.对于基质复杂的样品,谱柱的种类也越来越多,除经典的键合硅胶固定相一根色谱柱的使用寿命可能只有百余次.而且每种填充柱,还有如聚合物填充柱、聚合物整体柱及以氧色谱柱适用的样品有限,一次错误进样甚至可能导化锆基质固定相为代表的其它无机基质固定相色谱致色谱柱失效.中国市场调查研究中心在中国反相柱.这些色谱柱因其固定相基质差异,具有不同的物收稿日期:20
6、10-01-25;修订日期:2010-03-25.基金项目:国家自然科学基金资助项目(20675083);国家重点基础研究发展规划(973)资助项目(o1CB5m202);科技部“十一五”国家科技支撑计划重大项目资助(2006BAF07B03).作者简介:刘翻(1983-),男,博士研究生,主要从事色谱研究工作.通讯联系人:张维冰,教授.E-mail:weibingzhang@ecust.edu.cn72分析测试技术与仪器第16卷理和化学性质及应用范围,其清洗与再生方式也存积的二氯甲烷∶甲醇(96∶4,V/V),加1%氢氧化铵在一定差别
7、.冲洗,其中加入的氢氧化铵对聚集在柱头的污染物1.1硅胶基质反相色谱柱的清洗与再生具有良好的清洗效果.二氯甲砜也被Themo公司用在反相色谱中,硅胶基质色谱柱使用比例达于色谱柱的清洗,具体方法是:在用水冲洗色谱柱同70%,被应用于各种样品的分析.清洗硅胶基质反相时进4等份的200μL二氯甲砜,然后依次用甲醇、色谱柱,关键是弄清楚污染物的性质,并且能找到合氯仿和甲醇冲洗.用N,N-二甲基甲酰胺、丙酮依[10]适的溶剂将其洗脱.对于被不同样品污染的色谱柱,次冲洗色谱柱,可将色谱柱柱效提高约50%.这如常规样品污染、蛋白质污染及金属离子污染的
8、色些方法耗时短,但使用的特殊溶剂,如氢氧化铵、二谱柱,具有对应的清洗和再生方法.氯甲砜、N,N-二甲基甲酰胺等,均对色谱固定相有1.1.1常规样品污染色谱柱清洗与再生方法一定损伤.被常规样品污染的硅胶基质反
