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1、环境与健康杂志2013年lO月第30卷第lO期JEnvironHealth,October2013,Vo1.30,No.10·实践与分析·氯氧化锆对小鼠肝脏的损伤作用石惠惠,柳晓琳,李丹,王永伟,王强,熊燕辽宁医学院公共卫生管理学院,辽宁锦州121001摘要:为探讨锆对小鼠肝脏功能和病理组织学的影响,将50只健康6-8周龄清洁级雄性昆明小鼠按体重随机分成5组,分别为对照(生理盐水)组和0.855mg/kg(1/200LD50)、1.71mg/kg(1/100LD50)、3.42mg/kg(1/50LD50)、17.1mg/kg(
2、1/10LD)氧氯化锆染毒组,每组10只。采用腹腔注射方式进行染毒,每日1次,连续30d。测定血清谷氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量及肝脏匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)的活力和丙二醛(MDA)的含量。结果显示,与对照组比较,仅17.1mg/kg氧氯化锆染毒组小鼠血清中ALT含量升高(P3、浆中SOD活力均下降,1.71、3.42、17.1mg/kg剂量组小鼠肝脏匀浆中MDA含量均升高,差异有统计学意义(R0.05)。表明在本实验范围内,仅17.1mg/kg剂量组氧氯化锆对小鼠肝脏有轻微损伤。关键词:锆;小鼠;肝脏中图分类号:R994.6文献标志码:C文章编号:1001—5914(2013)10—0928—03目前,锆及其化合物在电子、原子能、医疗器械等SCXK[(辽)2008—0002]。实验室温度20~22℃,相对湿行业使用量逐年增加,而氧氯化锆是生产其他锆制品度为46%~60%,自然光照。实验期间,大鼠可自由4、摄(二氧化锆、碳酸锆、硫酸锆等)的主要原料,该化合物食,饮水。也常被用作油漆催干剂、涂料干燥剂、防水剂等的处适应性喂养1周后,根据氧氯化锆的半数致死量理剂。李丹]在对某地区铬污染的调查中发现,井水(LD。,171mg/kg),将小鼠按体重随机分成5组,分别中不但含有较高的六价铬,也含有锰、钒、锆等金属,为对照(生理盐水)组和0.855mg/kg(1/200LD∞)、1.71且铬渣污染区地下水对小鼠的毒性强于相同浓度铬mg/kg(1/100LDso)、3.42mg/kg(1/50LDso)、17.1mg/kg溶液。当地的某合金厂被5、认为是该地区水污染的一个(1/10LD卯)氧氯化锆染毒组,每组l0只。采用腹腔注重要污染源,且氧氯化锆是该合金厂的重要产品之射进行染毒,染毒容量为20ml/kg,每日1次,连续染一。本研究采用不同剂量的氧氯化锆腹腔注射,观察毒30d。每天记录小鼠的一般情况(活动、饮食、饮水、其对小鼠肝脏的影响。排泄),并测定小鼠的体重。1.3小鼠肝脏重量及其脏器系数的测定染毒结束1材料与方法后,空腹称重,断头处死小鼠,取全血后迅速分离肝1.1主要仪器与试剂PUZS一300全自动生化分析仪脏,生理盐水洗净,滤纸吸干,去除脂肪和结缔组织后(南京普朗6、医疗器械有限公司),MK3型酶标仪(上海称重,并计算肝脏系数(肝脏系数=肝脏重量/体重×热电仪器有限公司)。100%)。八水氧氯化锆(分析纯,天津市科密欧化学试剂1.4肝脏中氧化损伤指标的测定取肝左叶0.1g,以有限公司),超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化1:9(m/V)加入预冷的生理盐水制成10%的组织匀浆物酶(GSH—Px)、丙二醛(MDA)、蛋白浓度检测试剂盒液,以2000r/min离心(离心半径为16am),15rain后均购于南京建成生物工程研究所。取上清液,采用相关试剂盒测定SOD、GSH—Px活力和氧氯化锆7、染毒溶液的配制:准确称取1.5467gMDA、蛋白的含量。具体操作步骤严格按照试剂盒说八水氧氯化锆溶于1000ml的三蒸水中,混匀,得到明书进行。855mg/L的氧氯化锆溶液,再用三蒸水稀释成所需要1.5血清谷氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移浓度,4℃保存,待用。酶(ALT)和乳酸脱氢酶(LDH)含量的测定取全血于1.2实验动物分组和染毒方法选择健康6~8周龄离心管中静置30~60min,以2500r/min离心(离心半清洁级雄性昆明小鼠50只,体重为(19.37_+1.82)g,购径为16cm),15rain后,收集血8、清至离心管中,一20℃于大连医科大学动物实验中心,动物合格证号为保存,备用。采用全自动分析仪测定AST、ALT和LDH作者简介:石惠惠(1988一),女,硕士研究生,从事流行病与卫生统计学的含量。研究。1.6病理组织观察取一部分肝左叶置于10%甲醛通讯作者:柳晓
3、浆中SOD活力均下降,1.71、3.42、17.1mg/kg剂量组小鼠肝脏匀浆中MDA含量均升高,差异有统计学意义(R0.05)。表明在本实验范围内,仅17.1mg/kg剂量组氧氯化锆对小鼠肝脏有轻微损伤。关键词:锆;小鼠;肝脏中图分类号:R994.6文献标志码:C文章编号:1001—5914(2013)10—0928—03目前,锆及其化合物在电子、原子能、医疗器械等SCXK[(辽)2008—0002]。实验室温度20~22℃,相对湿行业使用量逐年增加,而氧氯化锆是生产其他锆制品度为46%~60%,自然光照。实验期间,大鼠可自由
4、摄(二氧化锆、碳酸锆、硫酸锆等)的主要原料,该化合物食,饮水。也常被用作油漆催干剂、涂料干燥剂、防水剂等的处适应性喂养1周后,根据氧氯化锆的半数致死量理剂。李丹]在对某地区铬污染的调查中发现,井水(LD。,171mg/kg),将小鼠按体重随机分成5组,分别中不但含有较高的六价铬,也含有锰、钒、锆等金属,为对照(生理盐水)组和0.855mg/kg(1/200LD∞)、1.71且铬渣污染区地下水对小鼠的毒性强于相同浓度铬mg/kg(1/100LDso)、3.42mg/kg(1/50LDso)、17.1mg/kg溶液。当地的某合金厂被
5、认为是该地区水污染的一个(1/10LD卯)氧氯化锆染毒组,每组l0只。采用腹腔注重要污染源,且氧氯化锆是该合金厂的重要产品之射进行染毒,染毒容量为20ml/kg,每日1次,连续染一。本研究采用不同剂量的氧氯化锆腹腔注射,观察毒30d。每天记录小鼠的一般情况(活动、饮食、饮水、其对小鼠肝脏的影响。排泄),并测定小鼠的体重。1.3小鼠肝脏重量及其脏器系数的测定染毒结束1材料与方法后,空腹称重,断头处死小鼠,取全血后迅速分离肝1.1主要仪器与试剂PUZS一300全自动生化分析仪脏,生理盐水洗净,滤纸吸干,去除脂肪和结缔组织后(南京普朗
6、医疗器械有限公司),MK3型酶标仪(上海称重,并计算肝脏系数(肝脏系数=肝脏重量/体重×热电仪器有限公司)。100%)。八水氧氯化锆(分析纯,天津市科密欧化学试剂1.4肝脏中氧化损伤指标的测定取肝左叶0.1g,以有限公司),超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化1:9(m/V)加入预冷的生理盐水制成10%的组织匀浆物酶(GSH—Px)、丙二醛(MDA)、蛋白浓度检测试剂盒液,以2000r/min离心(离心半径为16am),15rain后均购于南京建成生物工程研究所。取上清液,采用相关试剂盒测定SOD、GSH—Px活力和氧氯化锆
7、染毒溶液的配制:准确称取1.5467gMDA、蛋白的含量。具体操作步骤严格按照试剂盒说八水氧氯化锆溶于1000ml的三蒸水中,混匀,得到明书进行。855mg/L的氧氯化锆溶液,再用三蒸水稀释成所需要1.5血清谷氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移浓度,4℃保存,待用。酶(ALT)和乳酸脱氢酶(LDH)含量的测定取全血于1.2实验动物分组和染毒方法选择健康6~8周龄离心管中静置30~60min,以2500r/min离心(离心半清洁级雄性昆明小鼠50只,体重为(19.37_+1.82)g,购径为16cm),15rain后,收集血
8、清至离心管中,一20℃于大连医科大学动物实验中心,动物合格证号为保存,备用。采用全自动分析仪测定AST、ALT和LDH作者简介:石惠惠(1988一),女,硕士研究生,从事流行病与卫生统计学的含量。研究。1.6病理组织观察取一部分肝左叶置于10%甲醛通讯作者:柳晓
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