黏着斑激酶和磷酸酶基因蛋白在肝细胞癌中的表达及意义.pdf

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1、·2216·广东医学2014年7月第35卷第14期GuangdongMedicalJournalJu1．2014．Vo1．35．No．14黏着斑激酶和磷酸酶基因蛋白在肝细胞癌中的表达及意义李匡凡，杨真真，李勇南昌大学第一附属医院普外科(南昌330006)【摘要】目的研究黏着斑激酶(FAK)和磷酸酶基因(PTEN)蛋白在人肝细胞癌的表达情况，并分析两者表达的相关性及临床意义。方法采用免疫组织化学EnVision法检测人原发性肝细胞癌78例、相应的癌旁组织56例、正常肝组织20例中FAK、PTEN蛋白的表达。结果FAK、PTEN蛋白主要在

2、胞浆中表达，FAK在肝细胞癌、癌旁、正常肝组织中表达率分别为51．3％、39．3％和5．0％，FAK在肝细胞癌、癌旁组织中的表达差异无统计学意义，两组较正常组织表达差异均有统计学意义(P<0．01)；PTEN蛋白在肝细胞癌、癌旁、正常肝组织中表达率分别为62．8％、94．6％和95．0％，在癌旁组织、正常纽织的表达差异无统计学意义，两组较肝癌组表达差异均有统计学意义(P<0．01)。FAK和PTEN蛋白表达与组织学分级、血管浸润、卫星结节、淋巴转移有关，与患者的年龄、性别、血清甲胎蛋白值、肿瘤大小、有无肝硬化、乙型肝炎病毒感染因素无关

3、。FAK与PTEN蛋白表达呈负相关。结论人肝细胞癌中PTEN蛋白表达下调、缺失，FAK表达上调，提示两者异常表达参与了肝癌的发生、浸润转移过程。【关键词】肝细胞肝癌；黏着斑激酶；磷酸酶基因；免疫组织化学原发性肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之～，其发例，低分化癌30例。门静脉癌栓浸润者35例，卫星结病隐匿，早期无典型的临床症状，故发现多已为晚期，节者32例，淋巴转移者30例；有肝硬化者52例，Hb—总体5年生存率仅有35％左右。手术切除虽然是最有sAg阳性36例。收集同期20例肝良性组织标本，主要效的治疗手段，但根治术后5年转移和复发率仍高

4、达来源于肝外伤、肝血管瘤、肝囊肿等患者，其中男14例，60％～70％⋯。因此研究肝癌发生及侵袭转移机制具女6例，年龄28～63岁，平均(42．6±8．5)岁。有重要意义。黏着斑激酶(focaladhesionkinase，FAK)1．2试剂和方法鼠抗人FAK单克隆抗体购自美国是一种非受体酪氨酸激酶，作为多种信号通路的枢纽，SantaCruz公司，鼠抗人PTEN单克隆抗体购自北京中与肿瘤的发生、发展及转移有密切的关系。磷酸酶杉金桥生物公司，均为工作液，工作滴度1：100；即用型基因(phosphataseandtensinhomolog

5、deletedfromchro—快速免疫组化MaxVision2HRP试剂盒(SantaCruz公mosome，PTEN)是一种具有双特异性磷酸酶活性的抑司)，DAB显色剂，0．01mol／LPBS缓冲液，0．01mol／L癌基因，其参与细胞生长增殖的调节及与细胞外基质柠檬酸盐抗原修复液等。采用免疫组织化学EnVision(extracellularmatrx，ECM)的相互作用，在许多恶性肿法检测FAK、PTEN蛋白在组织中的表达，实验步骤严瘤存在表达下调或缺失。本研究拟通过联合检测两格按照试剂盒说明书操作，采用试剂公司提供的阳性者

6、在肝癌肝组织、癌旁组织及正常组织中的表达，分析片作为阳性对照，以PBS液代替一抗作为阴性对照。FAK、PTEN蛋白在肝细胞癌中表达的相关性，及它们1．3染色结果的判定请2位病理学专家双盲法观与各临床病理参数间的关系，探讨两者在肝癌发生发察切片，采用半定量法判断结果。每例染色切片随展中的作用和相关机制。机观测5个高倍镜(400倍)视野，首先根据染色强度打分：不着色记为0分，淡黄色1分，棕黄色2分，棕褐1资料与方法色记为3分；再依据阳性细胞所占百分比打分：阴性记1．1一般资料收集2010年1月至2012年12月间为0分，阳性细胞数≤10％

7、为1分，11％～50％者2南昌大学第一附属医院肝癌石蜡包埋标本78例，所有分，51％～75％为3分，>75％者记为4分。将染色强患者临床资料完整，术前均未接受其他治疗(包括放度与阳性细胞百分比得分相乘，结果>3免疫组化结疗、化疗及介入治疗等)，术后所有病例标本均经病理果为阳性，≤3者为阴性。若2位专家判定结果不同，检查证实为肝细胞癌，其中56例附相应癌旁(距切缘则重新观察判定。2cm及以上)组织蜡块；病例中男50例，女28例，年龄1．4统计学方法应用SPSS19．0统计软件，两个样本24～78岁，平均(47．8±14．3)岁；血清甲胎

8、蛋白率的比较行’c2检验，相关性采用Spearman相关分析。(AFP)I>400L者55例，<400L者23例；肿瘤2结果直径>5cm者49例，≤5cm者29例；高中分化癌482．1FAK、PTEN蛋白在肝癌组织、癌旁