shh基因在肝细胞癌中的表达及意义的论文

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1、Shh基因在肝细胞癌中的表达及意义的论文作者：云建刘蛟陈强谱欧琨管清海夏国华汪谦【摘要】目的探讨sonichedgehog（shh）基因在肝细胞癌(hcc)中的表达及其临床意义。方法采用组织芯片技术和免疫组化(abchrp)法对150例hcc手术切除标本进行shh检测，评估shh的表达与hcc临床病理的关系。结果150例肝癌组织，脱片9例，139例中39例有高表达（26.6%）；25例癌旁肝组织无脱片，阳性表达3例（12.0%）；二者比较有显著性差异（p＜0.05）。shh阳性表达与hcc的转移、淋巴浸润、包膜形成及细胞分化密切相关（p＜0.05）。结论shh检测对判断hcc的

2、转移、复发及预后具有意义。【关键词】肝肿瘤sonichedghog基因【abstract】objectivetoinvestigatetheeffectofsonichedgehoggeneontheinvasion,metastasisandprognosisofhepatocellularcarcinoma(hcc).methodsimmunohistochemistryandtissuemarraytechniqueetersallivertissueallivertissue.thepositiverateofshhgenephnodeinvasion,capsule,m

3、etastasis(intraorextrahepaticmetastasis)andpathologicalstage.conclusiontheseresultssuggestthatshhgenemayplayimportantrolesintheinvasion,metastasisandprognosisofhcc.【keyor，sonichedgehoggenesonichedgehog（shh）基因与肿瘤的发生和发展关系密切。.我们采用组织芯片技术和免疫组化（abchrp）法对150例肝细胞癌（hcc）手术切除标本进行检测，研究shh基因表达与hcc临床病理的

4、关系，旨在探讨其在hcc的转移、复发及预后判断中的作用，现报告如下。1材料与方法1.1材料标本来自本院1993—1997年手术切除的hcc150例，肝癌癌旁组织25例为对照，患者术前未行放疗、化疗。标本在甲醛中浸泡8～12h后石蜡包埋。150例中，脱片11例；参检的139例中，男115例，女24例；年龄24～77岁。有肝外转移者占29.8%(42/139)，有淋巴结转移者占10.6%（15/139）。对照组25例组织取自肿瘤边缘外部位，并经he染色，病理切片证实无癌变。1.2组织微阵列制备蜡块用组织芯片仪（md）制作。150例肿瘤组织和25例癌旁组织每例放入两孔，孔直径0.6mm

5、。制作芯片时参考he染色玻片，选择最有代表性区域取组织。小心切片（厚约6μm）固定在显微镜的玻片上。he染色的组织芯片供形态学参考。1.3免疫组化石蜡包埋的组织芯片经脱蜡，0.3%h2o210min阻断内源性过氧化酶活性。微波炉抗原热修复处理（700in）。山羊血清封闭非特异性抗原，滴加一抗4℃过夜，然后滴加生物素化羊抗鼠/兔igg，37℃孵育30min。dab显色后，苏木素复染细胞核，脱水树胶封固。每项试验都有阴性对照（缺少一抗）。1.4结果判定光镜下以细胞质（膜）呈棕黄色为阳性。每例组织芯片随机观察10个高倍（hpfs×400）视野，胞质（膜）呈棕黄色细胞数＜10%为0，10

6、%～30%为1，31%～50%为2，＞50%为3。对照组shh染色程度1为正常。1.5统计学方法采用fisher精确计算法或χ2检验。p＜0.05为差异有统计学意义。2结果2.1shh在肝细胞癌中的表达139例hcc中，39例阳性表达；25例癌旁组织中，3例(12%)阳性表达。两者比较，有显著性差异（p＜0.05）。2.2shh表达水平和hcc临床病理特征的关系见表1。shh阳性表达率与hcc的淋巴浸润、转移、包膜形成、肿瘤分化明显相关（分别为p=0.002，p=0.012，p=0.031），而与性别、年龄、肿瘤大小及肿瘤分期无明显关系。表1shh表达水平与hcc临床病理特征的关

7、系注：同一病理特征内比较，*p＜0.053讨论sonichedgehog（shh）信号通道由shh配体、2个跨膜蛋白受体patched（ptc）和smoothened（smo）组成的复合物以及转录因子gli蛋白等组成，在胚胎发育过程中对细胞的增殖和分化意义重大，通路的功能异常会引起肿瘤发生。shh是shh通路中的起始基因。patild等［１］的研究表明，gli1和smo在肝癌中的表达较正常肝组织高，认为shh信号通路在某些肝癌组织中有异常活动，可以作为肝癌治疗的新靶标。sickl