高效液相色谱-蒸发光散射法测定黄芪中单糖和双糖的含量.pdf

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1、Websitehttp://xuebao.ahtem.edu.cnE-mailahxbbjb@163.com82安徽中医药大学学报第34卷第2期2015年4月JANHUIUNIVCHINESEIVIEDVo1.34No.22Apr.2015高效液相色谱一蒸发光散射法测定黄芪中单糖和双糖的含量李芳,胡容峰。,黄丽丹,王斌。(1.安徽中医药大学研究生部,安徽合肥230038;2.省部共建新安医学教育部重点实验室,安徽合肥230038;3.安徽省“l15”新安医药研究与开发创新团队,安徽合肥230038;4.安徽省中药研究与开发重点实验室,安徽合肥23

2、0012;5.安徽省食品药品检验研究院,安徽合肥230051)[摘要]目的采用高效液相色谱一蒸发光散射法建立黄芪中单糖和双糖含量的测定方法。方法色谱柱为WatersXBridge氨基柱(250mm×4.6mm,5雎m),流动相为乙腈一水(70:30),流速为1.0mL/min,柱温为30。C。蒸发光散射检测器参数:雾化器温度为50℃,漂移管温度为9O℃,气体流量为1.60L/rain,增益值为1.0。结果果糖、蔗糖和麦芽糖分别在0.10~0.90g(r一0.9999)、1.OO~9.O0fig(r===0.9996)、0.25~2.25耻g(r一

3、0.9994)范围内其对数值与峰面积的对数值呈良好的线性关系;平均回收率分别为97.97(RSD—1.56)、97.82(RSD一1.53)、97.36(RSD一1.59)。结论所建立的高效液相色谱一蒸发光散射法简单、准确、重复性好,可用于黄芪中单糖和双糖的含量测定。[关键词]黄芪;高效液相色谱一蒸发光散射法;果糖;蔗糖;麦芽糖[中图分类号]R927.2[文献标志码]AEDOI]lO.3969/j.issn.2095-7246.2015.02.024中药复方脑络欣通是著名新安医家王乐匀先生380一ELSD检测器:美国安捷伦公司;WatersX针对

4、缺血性中风而创立的临床验方,黄芪是复方脑BridgeTM氨基柱(250mm×4.6mm,5“m):美国沃络欣通中君药_】]。黄芪是豆科草本植物蒙古黄芪特世公司;ML204型电子天平:瑞典METTLERAstragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mon—T0LEDO公司;HH—S2系列恒温水浴锅:江苏金坛gholicus(Bge.)Hsiao或荚膜黄芪AstragalusP一市环宇科学仪器厂;WB一2000旋转蒸发仪:郑州长branaceus(Fisch.)Bge.的根,具有补气升阳、固表城科工贸有限公司;SHB一Ⅲ

5、循环水式多用真空泵:止汗、利水消肿、生津养血等功效],临床上应用于郑州长城科工贸有限公司;HeraeusMultifugeX1R治疗病毒性心肌炎、糖尿病、炎症和肿瘤口_6_。离心机:赛默飞世尔科技公司;KQ_2200型超声波黄芪药材中含有丰富的糖类成分,测定糖类成清洗器:江苏省昆山市超声仪器有限公司。分的含量常用的方法是比色法,此方法稳定性和操1.2试药果糖对照品(批号100231—200904,供作精密度都较差,且只能测定总糖含量,不能分析糖含量测定用)、蔗糖对照品(批号111507—201303,供含量测定用)和麦芽糖对照品(批号100287

6、—的种类,高效液相色谱法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)可改善以上不足_7]。目前201102,供含量测定用):均购于中国食品药品检定研究院;黄芪(产地为内蒙古,批号12091301):购于针对黄芪中糖类成分的研究主要集中在多糖方面,而对于单糖和双糖的研究报道却很少。本实验中笔合肥乐家老铺中药饮片有限公司;乙腈:色谱纯,瑞典;水为纯化水;其他试剂为分析纯。者采用HPLC和蒸发光散射检测器(evaporative2方法与结果lightscatteringdetector,ELSD)建立了黄芪中单糖

7、2.1色谱条件色谱柱为WatersXBridgeTM氨基和双糖含量的测定方法。柱(250mm×4.6mm,5fm),流动相为乙腈一水1仪器与试药(70:30),流速为1.0mL/min,柱温为30。C。ELSD1.1仪器Agilent1260高效液相色谱仪和Agilent参数:雾化器温度为50℃,漂移管温度为9O℃,蒸发基金项目:国家科技支撑计划项目(2012BAI26B03);国家自器气流为1.60L/min,增益值为1.0。此条件下然科学基金项目(81274100);安徽省学术和技术带头人HPLC色谱图见图1。及后备人选学术科研活动经费资助项

8、目(皖人社秘2.2对照品溶液的配制精密称取适量果糖、蔗2O¨一381号一26)糖、麦芽糖对照品,分别置于容量瓶中,加入纯化水作者简介:李

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