猪鹦鹉热衣原体CJ4株生物学特性研究.doc

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1、猪鹦鹉热衣原体CJ4株生物学特性研究　　摘要：从发病猪分离出鹦鹉热衣原体ＣＪ４株，该菌株对青霉素敏感，不被磺胺嘧啶钠所抑制；能够致死６～７日龄鸡胚，其ＥＬＤ５０为１０-７．69/０．３ｍＬ；用该毒株制备的疫苗免疫小鼠可以抵抗衣原体强毒的攻击，具有较好的免疫原性。　　关键词：猪衣原体ＣＪ４株；生物学特性；免疫原性　　中图分类号：Ｓ８５２．６７；Ｓ８５８．２８文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11423－4902-03　　　　ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃＲｅｓｅａｒｃｈｏｎＣＪ４ＳｔｒａｉｎｏｆＳｗｉｎｅＣｈｌａｍｙｄｉａｐｓｉｔｔａｃｉ　　　　ＬＩＵＺｅ－ｗｅ

2、ｎ，ＴＩＡＮＹｏｎｇ－ｘｉａｎｇ，ＺＨＯＵＤａｎ－ｎａ，ＹＵＡＮＦａｎｇ－ｙａｎ，ＹＡＮＧＫｅ－ｌｉ，ＬＩＡＮＧＷａｎｇ－ｗａｎｇ，　　ＤＵＡＮＺｈｅｎｇ－ｙｉｎｇ，ＧＵＯＲｕｉ　　　　　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅＣｈｌａｍｙｄｉａｐｓｉｔｔａｃｉＣＪ４ｓｔａｉｎwasｓｅｐａｒａｔｅｄｆｒｏｍｉｌｌｓｗｉｎｅ．Ｉｔｗａｓｓｅｎｓｉｔｉｖｅｔｏｔｈｅｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎａｎｄｗａｓｕｎｉｎｈｉｂｉｔｅｄｂｙｔｈｅｓｕｌｆａｄｉａｚｉｎｅｓｏｄｉｕｍ．Ｉｔｃｏｕｌｄｋｉｌｌｔｈｅｃｈｉｃｋｅｍｂｒｙｏｏｆ６~７ｄａｙｓａｇｅａｎｄｔｈｅｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｔｉｔｅｒＥＬＤ５０ｗａｓ

3、１０-７．69／０．３ｍＬ．ＴｈｅｍｉｃｅｉｍｍｕｎｉｚｅｄｗｉｔｈｔｈｅｖａｃｃｉｎｅｍａｄｅｏｆＣＪ４ｓｔｒａｉｎｃｏｕｌｄｒｅｓｉｓｔｔｈｅａｔｔａｃｋｆｒｏｍＣｈｌａｍｙｄｉａｖｉｒｕｌｅｎｔｓｔｒａｉｎｓａｎｄｉｔｈａｄｗｅｌｌｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ．　　Ｋｅｙｗｏｒｄs：sｗｉｎｅＣｈｌａｍｙｄｉａｐｓｉｔｔａｃｉ；ＣＪ４sｔｒａｉｎ；bｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ；ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ　　衣原体病是由衣原体科衣原体属鹦鹉热衣原体所引起的人畜共患传染病，能使多种动物、禽类和人发病［１］。猪衣原体病是由鹦鹉热衣原体引起的繁殖障碍等多种疾病

4、的总称，各年龄段的猪均能感染，但临床表现有所不同。妊娠母猪主要表现为流产、死胎、产弱仔和围产期新生仔猪大批死亡；公猪发生睾丸炎、附睾炎、尿道炎；断奶仔猪常会发生肺炎、肠炎、多发性关节炎等，病死率较高。该病常给养猪生产带来重大的经济损失。　　目前对猪衣原体病的早期感染可用四环素、土霉素、金霉素等多种抗生素治疗，但由于其细胞内寄生性引起的隐性、持续性的感染以及长期使用抗生素所造成的耐药性增加等因素，使得使用抗生素并不能从根本上控制该病。因而最有效的防治措施就是接种安全、有效的疫苗。　　猪鹦鹉热衣原体ＣＪ４株是从发病猪体内分离出来的具有良好免疫原性的菌株，对其生物学特性进行了研究，现报

5、道如下。　　１材料与方法　　１．１试验材料　　猪鹦鹉热衣原体ＣＪ４菌株由本实验室分离、鉴定和保存；ＳＰＦ鸡胚购自北京梅里亚维通实验动物技术有限公司，本实验室恒温箱培养６～７日龄时用于试验；试验用昆明小鼠购自湖北省医学科学院实验动物中心，饲养于湖北精牧兽医技术开发有限公司试验动物房。　　１．２试验方法　　１．２．１培养特性以鸡胚卵黄囊膜悬液接种８～１０ｇ小鼠，腹腔注射０．５ｍＬ／只，４～５ｄ后取小鼠脾脏和腹液涂片，用姬姆萨氏法染色，显微镜下观察。　　１．２．２药物敏感性试验　　青霉素敏感性试验：用鸡胚卵黄囊膜研磨液进行试验。将鸡胚卵黄囊膜研磨液用灭菌的0.9%的生理盐水作１０－１、

6、１０－２、１０－３、１０－４、１０－５、１０－６、１０－７稀释，分成２份，一份于每毫升鸡胚卵黄囊膜研磨液中分别加青霉素２５００Ｕ，在４℃下作用４ｈ，分别在卵黄囊内接种６～７日龄鸡胚５枚，每胚接种０．３ｍＬ；另一份不添加青霉素，各取０．３ｍＬ于卵黄囊内接种６～７日龄鸡胚５枚作为对照。　　磺胺嘧啶钠敏感性试验：用鸡胚卵黄囊膜研磨液进行试验。将鸡胚卵黄囊膜研磨液用灭菌的0.9%的生理盐水作１０－１、１０－２、１０－３、１０－４、１０－５、１０－６、１０－７稀释，分成２份，一份于每毫升鸡胚卵黄液中分别加入磺胺嘧啶钠１０．０、７．５、５．０和１．０ｍｇ，在４℃下作用４ｈ，分别于卵黄囊内接种

7、６～７日龄鸡胚５枚，每胚接种０．３ｍＬ；另一份不添加磺胺嘧啶钠，各取０．３ｍＬ于卵黄囊内接种６～７日龄鸡胚５枚作为对照。　　１．２．３毒力试验以鸡胚卵黄囊膜悬液于卵黄囊内分别接种１００枚６～７日龄鸡胚，接种后于３７℃条件下继续孵化，记录鸡胚的死亡情况。　　１．２．４毒价测定将鸡胚卵黄囊膜悬液用灭菌的０．９％的生理盐水作１０倍系列稀释，取１０－５、１０－６、１０－７、１０－８、１０－９稀释液各接种6~7日龄鸡胚４枚，接种剂量为0．３ｍＬ，置３７℃孵育，记录７２ｈ后死亡鸡胚数，并计算