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时间:2017-12-10
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1、万方数据考点专题一、疑难点拨(一】微生物分类高中生物教材中所涉及的微生物,按照以下不同标准,分类如下:1.按照细胞结构的复杂程度划分(1)原核生物:包括各类细菌(如醋酸菌、乳酸菌、硝化细菌、分解尿素的细菌、分解纤维素的细菌)、蓝藻(如颤藻、发菜)、放线菌等。。(2)真核生物:包括绿藻(如小球藻)、真菌(如酵母菌、毛霉、青霉、曲霉)。2.按照同化作用的类型划分(1)自养生物:包括能进行光合作用的绿藻和蓝藻、能进行化能合成作用的硝化细菌。(2)异养生物:包括真菌(如酵母菌、毛霉、青霉、曲霉)、醋酸菌、乳酸菌、分解尿素的细菌、分解
2、纤维素的微生物、放线菌。3.按照异化作用的类型划分(1)需氧生物:包括真菌(如酵母菌、毛霉、青霉、曲霉)、醋酸菌、分解尿素的细菌、分解纤维素的微生物、绿藻、蓝藻、放线菌。(2)厌氧生物:乳酸菌。(3)兼性厌氧生物:酵母菌。(二)微生物的鉴定1.分解尿素的细菌的鉴定(1)鉴定原理:分解尿素的细菌能合成脲酶,脲酶能将尿素分解成氨,氨是碱性物质,能使培养基的pH升高。酚红指示剂遇碱变红色。(2)鉴定方法:当向以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂后,如果酚红指示剂变红色,说明该培养基上有分解尿素的微生物。2.分解纤维素的微生物(
3、1)鉴定原理:刚果红能与纤维素形成红色复合物,但不能与纤维素的水解产物纤维二糖和葡萄糖形成红色复合物。分解纤维素的微生物能分解纤维素,使之形成纤维二糖和葡萄糖,在以纤维素为唯一碳源的培养基上,在分解纤维素的微生物的菌落的周围纤维素已经被分解,添加刚果红后,在菌落的周围会形成透明圈。(2)鉴定方法(刚果红染色法):在培养基中添加纤维素作为唯一碳源,用刚果红染色,如果在菌落的周围出现透明圈,即说明该微生物是能分解纤维素的微生物。(三)微生物的培养基1.培养基的营养成分培养不同微生物的培养基的配方有差异,但一般都含有四种成分,即水
4、、碳源、氮源和无机盐。除了以上物质外,培养基还应满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。2.培养基的类型(1)根据培养基的物理状态划分。①液体培养基:不加凝固剂,培养基呈液态,各种营养物质一般都溶解在水中。使用液体培养基培养需氧型微生物需要定期向培养液中通人氧气(例如果醋的制作)或振荡培养。②固体培养基:在液体培养基中加入一定含量的凝固剂琼脂,可以制成琼脂固体培养基,这种培养基是实验室最常用的培养基之一。【特别提示】往培养基中添加琼脂的作用:万方数据@考点专题琼脂是一种多糖物质,但它并不能为所培养的微生物提供碳源和
5、能源,这是因为琼脂中的多糖一般不被微生物分解和利用。因此,培养基中加入琼脂的唯一目的是作为凝固剂使液体培养基变为固体培养基。(2)根据培养基的用途划分。①选择培养基:允许特定种类微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。在这种培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长。例如,分离纤维素分解细菌可以在培养基中加入唯一碳源纤维素,在这种培养基上只有能分解纤维素的微生物才能生长,而不能分解纤维素的微生物则不能生长;又如分离分解尿素的细菌的培养基中应以尿素作为唯一氮源,在
6、这种培养基上,只有能分解尿素的细菌才能生长繁殖,其他微生物则不能生长繁殖,从而被淘汰。②鉴别培养基:鉴别培养基是根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品的培养基。例如,筛选纤维素分解菌时加入刚果红的培养基就是一种鉴别培养基。【特别提示】选择培养基一般只生长具有特定目的的微生物;鉴别培养基可以存在其他微生物,而且能鉴别特定的微生物。3.培养基的制备方法(1)培养基制备的流程。计算一称量一溶化一灭菌一倒平板。(2)制备中的三个关键操作。①溶化:溶化是将培养基中的各种营养成分和琼脂通过加热溶于水中,先溶化各种营养成
7、分,最后溶化琼脂。溶化时使用玻璃棒不断搅拌,以促进溶解和防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。②灭菌:培养基转移到锥形瓶中,加棉塞,包上牛皮纸,并用皮筋勒紧后,放人高压灭菌锅内,在100kPa、121℃下灭菌15~30min。③倒平板:培养基灭菌后,待培养基冷却到50℃左右时倒平板。为了防止杂菌的污染,倒平板应在酒精灯火焰旁进行,在拔去锥形瓶的棉塞后瓶口应迅速通过火焰,倒培养基之前培养皿只打开一条稍大于瓶口的缝隙,倒培养基后立即盖上皿盖,待平板冷凝后需要将平板倒置。【特别提示】培养基灭菌后,为什么需要冷却到50℃左右时才能用来倒平板?
8、——培养基灭菌后,冷却到50℃左右时琼脂还没有凝固,由于培养皿内与培养皿外温差较小,此时倒平板可以避免形成太多的冷凝水。待平板冷凝后,应将平板倒置,这样做的目的是防止皿盖上的冷凝水落入培养基表面,造成污染。(四)消毒和灭菌1.消毒和灭菌的比较使用方法结果常用方法较为温和的仅杀死物体表面或内
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