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1、安徽农业科学,JotlmalofAnhuiAgri.Sei.2014,42(4):1178—1180责任编辑李菲菲责任校对李岩固相萃取一高效液相色谱法同时测定发酵豆制品中4种大豆异黄酮旷勇,卢成瑛,龚竹琼,昌海。(1.湖南省泸溪县武陵阳光生物科技有限公司,湖南吉首416000;2.吉首大学林产化工工程湖南省重点实验室,湖南张家界427000;3.张家界市计量测试检定所,湖南张家界427000)摘要[目的]采用固相萃取一高效液相色谱法同时测定大豆发酵制品中的异黄酮含量。[方法]以乳酸、霉菌发酵大豆样品为试材,将发酵豆制品以60%的乙醇溶液超声波提取
2、1h,稀释后用SPE小柱做净化处理,以C反相色谱柱(4.6mm×250.0mm,5.0m),0.2%甲酸和乙腈进行梯度洗脱、流速为1.2ml/min、紫外检测波长260nm,同时测定4种大豆异黄酮含量。[结果]试验得出,发酵豆制品中4种大豆异黄酮的平均回收率分别为大豆甙96.7%、染料木甙97.9%、大豆甙元102.2%、染料木素103.1%。[结论]该方法可同时测定发酵豆制品中4种大豆异黄酮成分,数据准确,重现性好。关键词固相萃取;高效液相色谱;发酵豆制品;大豆异黄酮中图分类号S509.9;0657.72文献标识码A文章编号0517—6611(
3、zo14)04—01178—03SimultaneouslyDeterminationforFourKindsofSoybeanIsoflavonesofFermentedSoybeanProductsbyS0l-d—phaseExtraction(SPE)andHighPerformanceLiquidChromatography(HPLC)KUANGYongetal(WulingSunshineBiotechnologyCo.·Ltd.,Jishou,Hunan416000)Abstract『Objective].r0simultaneous
4、lydetermineisoflavonescontentoffermentedsoybeanproductsbySPEandHPLc.IMeth0dlThefer_mentedsoybeanproductsareextractedfor1hourby60%ethanolsolution.afterdiluted.carryoutcleaningtreatmentbySPEcolumnandcar—ryoutgradientelutionbyCl8reversed—phasechromatographiccolumn(4.6mm×250.0mm,
5、5.0txm),0.2%formicacidandacetonitrile,withflowvelocityof1.2mL/minandUVdetectionwavelengthof260nm.theaveragerecoveryrateoffourcomponentsiSdaidzin96.7%,genistoside97.9%,daidzein102.2%andgenistein103.1%.『Conclusion]Themethodcansimultaneouslydeterminefourkindsofsoybeanisoflavones
6、content,thedataisaccurateandreproducibilityisgood.KeywordsSolid—phaseextraction(SPE);Highperformanceliquidchromatography(HPT);Fermentedsoybeanproducts;Soybeanisoflavones大豆异黄酮(ISO)是大豆中的一类重要的非营养素成捣碎机;高速离心机;固相萃取装置。标准品:大豆甙(纯度分,主要活性成分为葡萄糖甙一金雀异黄甙和大豆甙及其相≥98%)、染料木甙(纯度≥98%)、大豆甙元(纯度≥应金
7、雀异黄素(又称染料木素)和大豆素。经过研究,发现大98%)、染料木素(纯度I>98%),上海顺勃生物工程技术有豆异黄酮的生理活性有抗氧化、抗肿瘤、提高雌激素水平、减限公司。主要试剂:甲醇(色谱纯)、乙腈(色谱纯)、乙醇少动脉硬化、改善心血管功能、抗骨质疏松等功效。。并(分析纯)、超纯水。SPE小柱:CLEAN—UPCEC18156、美国且有文献资料指出,大豆异黄酮中异黄酮甙元比异黄酮葡萄SEPAX、500mg/6ml。糖甙更容易被人体吸收,同时,异黄酮甙元具有较强的1.2标准溶液的配制于1/100000天平分别精密称取大抗氧化活性和对癌细胞增殖的
8、特异性抑制作用,因此异黄酮豆甙、染料木甙、大豆甙元、染料木素的标准物质为7.37、甙元被认为是大豆异黄酮中具有预防和治疗癌症最有效的7.
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