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《山豆根致大鼠肝损伤外周血microRNA早期变化特征研究-论文.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中国中西医结合杂志2013年3月第33卷第3期CJITWM,March2013,Vo1.33,No.3山豆根致大鼠肝损伤外周血microRNA早期变化特征研究盛云华金若敏’姚广涛’周璐’乔靖怡’摘要目的探讨山豆根致肝损伤外周血微小RNA(microRNA,rniRNA)的早期变化特征,寻找肝损伤早期外周血miRNA标志物。方法60只Wistar大鼠随机分为山豆根组和对照组,每组30只,分别给予山豆根水煎液12g/kg(2mL/100g)和等容量蒸馏水灌胃。于给药3、7、14、28天和停药后28天分批处理动物,取血清,测定常规血液生化指标ALT、AST、TBlL、碱性磷酸酶(A
2、LP)、总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)水平,计算球蛋白(GLO)水平;取肝组织进行HE染色,观察病理形态学变化。同时分别取两组大鼠给药7、14、28天全血进行miRNA芯片检测,筛选差异表达miRNA,并进行RT—PCR验证。结果山豆根组给药7—28天ALT明显升高(P<0.05),组织病理学检查显示肝组织于给药28天出现肝细胞变性肿大。外周血miRNA芯片检测中,给药7、14、28天上调差异表达miRNA分别有11个、22个、13个,下调差异表达miRNA分别有1个、13个、2个。对给药7、14、28天共有差异表达miRNA通过靶基因预测和pathway分析发现,参与调控
3、信号转导、细胞间相互作用、细胞骨架、免疫相关的差异表达miRNA可能参与了肝损伤的进程。时效高峰在7天的miR_291a-5P的RT—PCR验证显示,miR-291a-5P在外周血和肝组织的表达基本一致。结论miR_291a-5P可在早期提示肝脏的损伤,可作为山豆根致肝损伤早期标志物之一。关键词山豆根;肝损伤;微小RNA;标志物StudyonEarlyChangeFeaturesofmicroRNAinthePeripheralBloodofSophoraeTonk~ens『sRadixetRhizomalnducedLiverInJuryRatsSHENGYun-hua。’
4、,JlNRuo-min。,YA0Guang—tao。,ZHOULu。.andQIAOJing-yi。1ResearchCenterforDrugSafetyEvaluation,ShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shanghai(201203),China;2CenterforDrugSafetyEvaluation,ShanghaiInstituteofFoodandDrugTesting,DepartmentofPharmacotoxicty,ShanghaiInstituteofFoodandDrugTesti
5、ng,Shanghai~01203),ChinaABSTRACTObjectiveTostudyearlychangefeaturesofmicroRNA(miRNA)intheperipheralbloodofSophoraeTonkinensisRadixetRhizomainducedliverinjuryrats.andtoIookforthemiRNAbiomarkersintheperipheraIbloodofearlyIiverinjury.MethodsSixtyWistarratswererandomlydividedintothecontroIgroup
6、andtheSophoraeTonkinensisRadixetRhizoma(abbreviatedasSTRR)group,30ineachgroup.RatsintheSTRRgroupwasadministeredwithSTRRdecoctionat12g/kg(2mL/100g),whileequalvolumeofthedis-tilledwaterwasgiventothoseinthecontrolgroup.Ratswereanesthetizedonday3,7,14,and28,and28daysafterwithdrawaI.Theserumsamp
7、leswerewithdrawn.Thealanineaminotransferase(ALT),aspartatetransaminase(AST),totalbile(TBIL),alkalinephosphatase(ALP),totaIprotein(TP),andalbumin(ALB)weredetected.111eglobulin(GLO)levelwascalculated.HEstainingwasperformedontheIivertissuetoob-servethepatho
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