纳豆激酶发酵及冻干粉制备-论文.pdf

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1、食品与发酵科技FoodandFermentationTechnology第48卷(第3期)VoL48,No.3纳豆激酶发酵及冻干粉制备曾志刚,王刚(1.中国医药集团四川抗菌素工业研究所,四川成都610052;2.m)ll省食品发酵工业研究设计院,四川成都611130)摘要:以纳豆菌为出发菌株.在300L发酵罐中液体发酵生产纳豆激酶并进行了提取分离,制备了纳豆激酶冻干酶粉.并考察了其热稳定性。结果表明:根据发酵时间与酶活力的关系,发酵培养时间需要控制在20h以内,由于泡沫会使得酶失活,应当控制发酵罐中泡沫,通过硫酸铵分级沉淀获得纳豆激酶粗提物,制备的纳豆激酶冻干酶粉活性在有

2、明胶保护的情况下非常稳定.冻干粉在6O℃保存6d的条件下,酶活力没有受到显著的影响。关键词:纳豆菌.纳豆激酶,热稳定性中图分类号:TS201.2*5文献标识码:A文章编号:1674—506X(2012)03—0057—0003FermentationofNattokinsaeandPreparationofFreezd-driedPowderZENGZhi-gang,WANGGang2(J.SichuanIndustrialInstituteofAntibiotic,ChinaPharmaceuticalGroup,Chengdu610052,China;2.Siehua

3、nAcademyofFoodandFermentationIndustries,Chengdu611130,China)Abstract:Theliquidf珊entationprocessfornattokinasebyBacillusnattoin300Lfermentor,andseparationofnat—tokinase,andthetemperaturestabilityofnattokinasefreezd-driedpowderwerestudied.Theresultsshowedthat,theliquidfermentationprocesssho

4、uldbestoppedin20hraccordingtherelationoffermentationtimeandnattokinaseactiv-ityandshouldcontrolthefoambecausethefoammadethenattokinaselosetheactivity.Nattokinaseextractwasac-quiredbyammoniunsulfategradericipitation,theactivityofnattokinasefreezd—driedpowderwasstronglyprotectedbythepresenc

5、eofgelatin,wasnotsignificantlyaffectedwhenthenattokinasefreezd—driedpowderwasstayed6dayat6O.Keywords:Bacillusnatto;nattokinase;temperaturestabilitydoi:10.39690.issn.1674—506X.2012.03—015纳豆在日本已有2000多年的食用历史.它是由面进行了研究,许多研究参数是无法通过实验室大豆经过发酵而制成;其中的纳豆激酶(nattokinase,摇瓶工艺获得的,该研究更加接近大生产的实际NK)是纳豆枯草芽

6、孢杆菌(Bacillusnatto)在发酵过情况,因而该研究的工艺过程及参数更加具有参程中产生的一种丝氨酸蛋白酶。有防治心脑血管考性及实用性。血栓形成的作用_】。国内外关于其菌株筛选、发酵1材料与方法优化、纤溶性能、提取分离及制剂等方面的研究方1.1材料兴未艾,但是多是从实验室摇瓶发酵的角度进行纳豆菌:重庆西吉瑞有限公司提供:纤维蛋白原研究分析[4-5];本文利用四川抗菌素工业研究所的购自中国医学科学院输血研究所;尿激酶购于丽珠中试基地良好条件,从中试生产的角度.对纳豆菌集团丽宝生物化学制剂有限公司;凝血酶购于杭康的发酵过程,提取分离过程及酶粉原料制备等方生物药业。收稿日

7、期:2012—05—09作者简介:曾志刚(1974一),男,硕士,副研究员,研究方向为微生物及生化药学。通讯作者:王刚(1968一),男,高级工程师,主要从事发酵工程方面研究。58食品与发酵科技2Ol2-~-'JIg3期1.2培养基取0.4mL凝血酶溶液溶解在3.6mL生理盐水中.斜面培养基:大豆蛋白胨0.5%,牛肉膏0.5%。立即倒入纤维蛋白原和琼脂糖的混合液中,摇匀,NaCl0.5%,琼脂1.5%。倾倒在9cmx9cm平皿中,静置1h,备用;用生理盐种子培养基:大豆蛋白胨0.5%,葡萄糖0.5%,水溶解尿激酶,配置为不同浓

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